芪归通络方联合针刺改善卒中后偏瘫的临床观察及对内质网应激-自噬的影响

目的 探讨芪归通络方联合针刺治疗脑卒中后偏瘫的临床疗效及对内质网应激-自噬的影响。方法 选取2019年6月-2021年2月医院脑病科收治的卒中后偏瘫患者86例纳入研究,随机数字表法分为对照组与针药组,各43例。对照组在西医常规治疗基础上给予针刺治疗,每次30 min,日1次,每6 d休息1 d;针药组在对照组基础上加用芪归通络方口服,每剂药取汁300 mL,早晚分2次服用,两组均连续治疗4周后进行疗效评定及安全性评价,比较两组的中医临床证候积分、美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS)评分、Fug-Meyer运动功能量表(Fug-meyer Assessment Scale, FMA)评分及卒中影响量表(Stroke Impact Scale, SIS)评分,检测并比较患者血清内质网应激-自噬相关指标水平。结果 两组治疗后的中医证候评分、NIHSS量表评分均较治疗前显著降低(P<0.05),针药组明显低于对照组(P<0.05);FMA和SIS量表评分均较治疗前显著升高(P<0.05),针药组明显高于对照组(P<0.05)。针药组治疗后的总显效率(74.42%,32/43)和总有效率(95.35%,41/43)均明显高于对照组(48.84%,21/43和81.40%,35/43),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后的血清内质网应激相关蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulatory protein 78,GRP78)、半胱天冬酶-12(Caspase-12)、自噬标志物LC3Ⅱ、自噬基因Beclin1水平均较治疗前显著降低(P<0.05),针药组明显低于对照组(P<0.05);B细胞淋巴瘤因子2(B-cell lymphoma factor 2,Bcl-2)水平较治疗前显著升高(P<0.05),针药组明显高于对照组(P<0.05)。针药组研究期间不良反应率为4.65%(2/43),与对照组的不良反应率(6.98%,3/43)比较,差异未见统计学意义(χ^(2)=0.212,P>0.05)。结论 芪归通络方联合针刺治疗脑卒中后偏瘫能够明显改善患者临床症状,增强疗效,改善神经功能损伤、肢体运动功能及生存质量,其机制可能与调控内质网应激途径影响脑卒中神经元凋亡与自噬相关。

内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇介导卵巢癌细胞自噬和内质网应激

目的:探讨内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇(AEA)在卵巢癌中的作用,并深入研究其作用机制。方法:ELISA实验分析健康对照组和卵巢癌组患者血清中AEA的水平,并结合ROC曲线评估AEA对卵巢癌患者的诊断价值;结合CCK-8实验、Transwell小室侵袭实验和划痕实验检测AEA对卵巢癌细胞活性、迁移和侵袭的影响;并通过肿瘤体积、瘤重的测量及瘤组织肉眼观图进一步验证AEA对卵巢癌的作用;同时用流式细胞术和Western blot检测AEA对卵巢癌细胞凋亡的影响,进而采用Western blot检测卵巢癌细胞自噬及内质网应激相关蛋白的水平,探究其促进卵巢癌细胞凋亡的机制。结果:卵巢癌患者体内AEA的含量较健康对照组显著下降,ROC结果提示AEA有望成为区分卵巢癌患者和健康个体的灵敏性生物学标志物,且AEA可以抑制卵巢癌细胞的活力、迁移、侵袭,抑制卵巢癌组织生长。结论:AEA通过促进卵巢癌细胞内质网应激并影响其自噬,进而促进卵巢癌细胞凋亡。

针刺血清调控内质网应激反应对无镁诱导培养大鼠海马神经元惊厥性损伤的保护作用

目的:观察针刺血清对无镁诱导惊厥样放电海马神经元凋亡数及内质网应激伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(Caspase-12)表达的影响,探讨针刺血清对海马神经元惊厥性损伤的保护机制。方法:SD大鼠腹腔注射戊四唑诱发急性惊厥后分为针刺组及对照组。针刺组取"百会""大椎"针刺,每日1次,共7d。末次针刺后,针刺组大鼠取血清作为针刺血清,对照组取血清作为非针刺血清。以无镁诱导惊厥样放电的原代培养胎鼠海马神经元为模型,根据对培养10d海马神经元的不同处理分为正常细胞外液组(简称正常组)、无镁细胞外液组(简称无镁组)、针刺血清组和非针刺血清组。正常组将无血清培养液换成细胞外液培养3h后换液培养,其他各组用无镁细胞外液培养3h后换液培养。4组分别于换液培养2、12、48h3个时间点采用TUNEL法和Western blot法分别检测海马神经元凋亡情况及GRP 78、CHOP和Caspase-12蛋白表达情况。结果:正常组仅见少量凋亡海马神经元;无镁组3个时间点凋亡海马神经元数均较正常组明显增加(P<0.01);针刺血清组3个时间点凋亡海马神经元数与无镁组比较明显减少(P<0.05,P<0.01),与非针刺血清组12、48h比较凋亡海马神经元数明显减少(P<0.01)。与正常组比较,无镁组3个时间点海马神经元CHOP和Caspase-12蛋白表达均明显增强(P<0.05,P<0.01),2h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达明显增强(P<0.05);与无镁组比较,针刺血清组3个时间点神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P<0.01,P<0.05),12、48h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.01),3个时间点神经元Caspase-12蛋白表达均显著减少(P<0.05,P<0.01);与非针刺血清组相比,针刺血清组2、12h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P<0.01,P<0.05),12、48h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P<0.05),3个时间点海马神经元Caspase-12蛋白表达均明显减少(P<0.01,P<0.05)。结论:针刺血清能明显减少海马神经元凋亡数,上调GRP 78蛋白表达,下调CHOP和Caspase-12蛋白表达,发挥维持内质网稳定性的重要作用。