Sigma-1受体在神经病理性疼痛大鼠内质网应激中的作用

目的 探讨sigma-1受体(sig-1R)对神经病理性疼痛(NP)大鼠内质网应激的作用。方法 将鞘内置管成功的SPF级雄性SD大鼠24只按随机数字表法分为假手术组(S组)、NP模型组(C组)、sig-1R抑制剂BD1047干预组(B组),每组8只。C组和B组采用坐骨神经慢性挤压性损伤法建立NP模型。术后第4、5、6天,S组和C组鞘内注射生理盐水20μL,B组鞘内注射BD1047(120μmol/L)20μL,1次/d。于术前1 d及术后第1、3、5、7天检测术侧足机械缩足反应阈(MWT)。采用Westen blot和免疫荧光染色法检测背根神经元(DRG)sig-1R、免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)、转录活化因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达情况;采用HE染色法观察DRG形态大小及病理改变;采用透射电镜观察DRG内质网改变。结果 与S组比较,C组大鼠术后各时间点术侧足MWT明显下降,DRG病理损伤和内质网破坏明显加重,sig-1R、BIP、ATF4、CHOP表达均上调(P<0.05);与C组比较,B组大鼠术后第5、7天MWT升高,DRG病理损伤和内质网破坏减轻,sig-1R、BIP、ATF4、CHOP表达均下调(P<0.05)。结论 sig-1R参与了大鼠神经病理性疼痛的过程,其机制可能与抑制DRG内质网应激有关。

岩白菜素治疗特发性肺间质纤维化的研究

目的目前岩白菜素对特发性肺间质纤维化(IPF)的治疗作用尚未进行深入研究。文中旨在探讨岩白菜素通过抑制PERK/ATF4/CHOP信号通路治疗IPF的作用机制。方法动物实验利用博来霉素(BLM)构建IPF小鼠模型。经适应性饲养7 d后,按随机数字表法分为对照组(不作任何处理)、模型组(BLM 5 mg/kg气管内滴注制作模型)、阳性药组(造模后给予地塞米松5 mg/kg灌胃)、岩白菜素高剂量组(造模后给予岩白菜素100 mg/kg灌胃)、岩白菜素低剂量组(造模后给予岩白菜素50 mg/kg灌胃),每组10只。记录小鼠体重变化,计算肺指数;通过HE染色观察肺组织病理变化;Masson染色观察胶原纤维变化;免疫荧光观察Collagen III的表达;q-PCR检测PERK、ATF4、CHOP mRNA的表达;Western-blot检测PERK、ATF4、CHOP蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠中Collagen III的荧光强度明显升高;与模型组比较,阳性药组、岩白菜素高剂量组、岩白菜素低剂量组干预的荧光强度降低。与对照组PERK mRNA表达(1.005±0.069)比较,模型组明显升高(14.930±1.120),差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,模型组IPF小鼠肺组织中PERK、ATF4、CHOP mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,岩白菜素高剂量组、岩白菜素低剂量组和阳性药组肺组织PERK、ATF4、CHOP mRNA及蛋白表达下降(P<0.05)。结论岩白菜素可以通过抑制内质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通路,为岩白菜素缓解IPF提供了实验依据。

GRP94生物学特点与肿瘤的关系的研究进展

葡萄糖调节蛋白94又叫做内质网蛋白99,是一种内质网分子伴侣蛋白,与HSP90有50%的同源性。GRP94蛋白可以和Ca2+结合具有蛋白伴侣特性,能协助新合成的多肽转位、折叠、寡聚体的组装、降解,抑制错误折叠蛋白的分泌;GRP94还具有抗原呈递的作用,可以作为肿瘤细胞的伴侣蛋白,参与肿瘤细胞的新陈代谢,保护肿瘤细胞免受有害因素的侵害。GRP94可能与人类多种肿瘤的发生有关,其表达的增高可能是肿瘤发生发展的一个重要因素。GRP94在肿瘤组织中高表达提示相关研究者,应用基因手段抑制GRP94的表达可能能够抑制肿瘤细胞的生长、侵袭和转移、增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性等,并且利用GRP94作为一种新的肿瘤治疗的靶分子或介质可能为肿瘤的基因治疗带来更广泛的应用前景。

内质网应激抑制剂4-苯基丁酸对肥胖大鼠肝胰岛素信号转导通路的影响

目的观察内质网应激（ERS）抑制剂4-苯基丁酸（4-PBA）对高脂喂养的肥胖大鼠肝脏脂质沉积及肝胰岛素信号传导通路的影响。方法雄性Wistar大鼠43只，体重240～270g，按随机数字表法分为3组：对照组（n=14，正常喂养）、肥胖组（n=14，高脂喂养）和4-PBA组（n=15，自高脂喂养第4周后给予4．PBA0．35g／kg·d），喂养8周后，应用正葡萄糖．高胰岛素钳夹技术测定各组大鼠葡萄糖输注率（GIR），处死大鼠后测定肝脏甘油三酯（TG）含量；应用WesternBlotting法测定各组ERS标志物及肝脏内胰岛素信号转导分子的蛋白表达。多组间数据比较采用单因素方差分析，两组间比较采用t检验。结果（1）肥胖组GIR[（10．2±1．4）mU／（kg·min）]较对照组的GIR[（17．1±1．5）mU／（kg·min）1显著下降（t=33．12，P〈0．05），4．PBA组[（14．2±2.3）mU／（kg·min）]较肥胖组的GIR明显增高（t=21．69，P〈0．05）。（2）／Ig胖组[（29．2±3．3）μmol／g]肝TG较对照组[（11．6±0．5）μmol／g]显著增加（t=24．31，P〈0．05），而4．PBA组[（16．9±2．8）μmol／g]肝TG较肥胖组显著降低（t=61．22，P〈0．05）。（3）与对照组相比，肥胖组大鼠的肝内磷酸化真核细胞转录起始因子α亚单位（p-eIF2α）及X盒连接蛋白1的剪切蛋白（s—XBP-1）的蛋白表达显著增加，而4-PBA组肝ERS标志物较肥胖组表达减少（均P〈0．05）。（4）与对照组相比，肥胖组的磷酸化胰岛素受体底物1（p-IRS-1）、磷酸化-Akt（p-Akt）及磷酸化糖原合成酶激酶3α/β（p—GSK-30α/β）的蛋白表达显著下降（t=16．80、24．66、16．43；P均〈0．05），4-PBA组p-IRS-1、p-Akt、p-GSK-3α/β的蛋白表达均显著高于肥胖组（t=19．12、39．52、23．72，P均〈0．05）。结论4-PBA可通过抑制肝脏ERS改善肝胰岛素信号传导通路，从而改善高脂饮食诱导的肥胖大鼠的胰岛素敏感性和脂肪肝。