急性梗阻性化脓性胆管炎时大鼠肝组织清道夫受体-A的表达及意义

目的观测急性梗阻性化脓性胆管炎(acute obstructive suppurative cholangitis,AOSC)时大鼠肝组织中清道夫受体-A(scavenger receptor A,SR-A)的表达及其与炎症介质的产生和肝组织损害的关系。方法结扎大鼠胆总管,于胆总管内注入大肠杆菌O111∶B4(菌落浓度5×109cfu/ml),建立急性胆管炎动物模型。测定血浆中内毒素,观测不同时相点肝组织中SR-A mRNA及蛋白质的表达及肝组织病理形态学变化,同时测定TNF-α含量变化,并与结扎胆总管注射生理盐水组、假手术组比较。结果在急性胆管炎组中,随着梗阻感染时间的延长和血浆内毒素浓度的升高,血浆中TNF-α含量明显增加,肝组织中SR-A的mRNA和蛋白质的表达明显下降,与对照组比较有统计学差异(P<0.01)。同时可见随着处理时间延长而逐渐加重的肝组织损伤的病理改变。结论AOSC时,随着肝组织中SR-A表达的下调,枯否细胞(Kupffer cells,KCs)清除、灭活内毒素的能力下降,同时KCs激活释放的细胞因子增多,诱发并加重肝组织的损害。

乳果糖对肝损伤及其伴发的内毒素血症防治研究

研究了乳果糖口服对急性肝损害的防治效果。发现：（1）乳果糖灌服可迅速减少正常大白鼠门脉血中的内毒素。（2）给用D-氨基半乳糖破坏肝脏，乳果糖做预防性及治疗性口服，可明显地保护肝细胞及减轻内毒素并减轻肝组织损害。（3）首创了一种暴发性肝衰竭模型，用乳果糖口服可明显预防此种暴发性肝坏死之发生，（4）口服乳果糖可以减轻用四氯化碳引致的肝纤维化。（5）用Shwartzman反应证明乳果糖对内毒素的生物活性没有阻断或抑制作用。

茵陈蒿承气汤配合乳头括约肌切开术治疗急性胆管炎内毒素血症的临床研究

为了探讨与分析茵陈蒿承气汤配合内镜乳头括约肌切开术对急性胆管炎内毒素血症的治疗作用机理，将２１例符合乳头切开指征，具有内毒素血症的急性胆管炎患者随机分为切开加中药组（ｎ＝１０）和单纯切开组（ｎ＝１１）。结果与单纯切开组相比，切开加中药组患者外周血中内毒素水平明显降低（治疗后第七日，４７．８０±１１．６２ｐｇ／ｍｌＶＳ３５．９２±８．３０ｐｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．０５），丙二醛与Ｃ反应蛋白亦明显下降（Ｐ＜０．０５）；超氧化物歧化酶与补体Ｃ３水平升高显著（Ｐ＜０．０５）。认为茵陈蒿承气汤配合乳头切开治疗急性胆管炎内毒素血症疗效显著。

生脉散调节大鼠慢性肝衰竭内毒素血症的机理研究

目的:探讨生脉散调节慢性肝衰竭大鼠内毒素血症的作用机理。方法:CCL4腹腔注射法建立大鼠慢性肝衰竭模型,在此基础上以LPS攻击以建立慢性肝衰竭内毒素血症模型,用生脉散治疗并与对照组比较。取造模后2h时间点,检测大鼠血清LPS(内毒素)与细胞因子如TNF-a,IL-6,ICAM-1水平。结果:2h后生脉散可减低慢性肝衰竭内毒素血症大鼠血清LPS、TNFα、IL-6,ICAM-1水平,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:慢性肝衰竭状态下,可存在不同程度的内毒素血症,并引起细胞因子水平变化,生脉散通过调节内毒素及细胞因子水平是其起到治疗作用的重要原因。

湿润烧伤膏对内毒素血症大鼠血液流变学的影响

目的:观察湿润烧伤膏(MEBO)对内毒素血症大鼠血液流变学的影响。方法:实验分为实验组和内毒素模型组,实验组应用湿润烧伤膏涂抹大鼠背部无毛区(2 cm×2 cm),每日2次;内毒素模型组不作任何处理。72 h后给两组大鼠静脉注射内毒素(2 ml/kg),进行血液流变学观察。结果:实验组的全血表观粘度的高切与低切变率均较模型组低,实验组的红细胞压积也低于对照组,经统计学处理,P<0.01。结论:湿润烧伤膏能改善内毒素血症早期的血液流变性。

慢加急性/亚急性肝衰竭患者的小肠细菌过度生长和内毒素血症相关研究

目的:探讨慢加急性/亚急性肝衰竭患者小肠细菌过度生长与血浆内毒素水平的关系。方法:对55例慢加急性/亚急性患者进行葡萄糖氢呼气试验检查小肠细菌过度生长情况,使用鲎试验检测血浆中内毒素水平,ELLISA法检测血浆中TNF-α水平,分析二者之间的关系。结果:慢加急性/亚急性肝衰竭患者小肠细菌过度生长发生率74.54%;与健康对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.01)。慢加急性/亚急性肝衰竭患者内毒素、血浆TNF-α在葡萄糖氢呼气试验阳性者明显高于阴性者(P值均<0.01)。结论:慢加急性/亚急性肝衰竭患者小肠细菌过度生长与血浆内毒素、血浆TNF-α呈正相关。

M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高中的作用：与MAPK信号通路的关系

目的评价M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高中的作用及其与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的关系。方法将人肺微血管内皮细胞以1×105个/ml的密度接种于6孔板（2 ml/孔）或培养瓶（4 ml/瓶）中，采用随机数字表法分为6组（n＝5）：空白对照组（C组）、M3受体shRNA转染组（shRNA组）、脂多糖组（LPS组）、盐酸戊乙奎醚＋脂多糖组（P＋LPS组）、脂多糖＋M3受体shRNA转染组（LPS＋shRNA组）和盐酸戊乙奎醚＋脂多糖＋M3受体shRNA转染组（P＋LPS＋shRNA组）。shRNA组、LPS＋shRNA组和P＋LPS＋shRNA组以含2.5 nmol/L M3受体shRNA的质粒转染细胞。LPS组和LPS＋shRNA组于孵育24 h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1 h；P＋LPS组和P＋LPS＋shRNA组于孵育24 h时加入终浓度为2 μg/ml的盐酸戊乙奎醚，孵育1 h后加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS再孵育1 h。采用Transwell法测定肺微血管内皮细胞通透性，采用Western blot法测定磷酸化p38 MAPK（p-p38 MAPK）和磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK1/2）的表达水平，采用免疫荧光染色法测定热休克蛋白27（HSP27）的表达水平，采用实时定量PCR法测定M3受体mRNA的表达。结果与C组比较，shRNA组M3受体mRNA表达下调，LPS组细胞通透性增高，p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27、和M3受体mRNA表达上调（P〈0.05）；与LPS组比较，P＋LPS组、LPS＋shRNA组和P＋LPS＋shRNA组细胞通透性降低，p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27和M3受体mRNA表达下调（P〈0.05）；与LPS＋shRNA组比较，P＋LPS＋shRNA组细胞通透性降低，p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27和M3受体mRNA表达下调（P〈0.05）。结论盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高的机制与其下调M3受体表达后抑制MAPK信号通路激活有关。