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Long noncoding RNAs in hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma 被引量:8
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作者 Ting-Ting Yu Xi-Ming Xu +4 位作者 Yi Hu Jun-Jian Deng Wei Ge Na-Na Han Mei-Xia Zhang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2015年第23期7208-7217,共10页
AIM: To study the expression of long noncoding RNAs(lncRNAs) in hepatitis B virus(HBV)-related hepatocellular carcinoma(HCC).METHODS: The lncRNA profiles between HBV-related HCC tissues and corresponding normal liver ... AIM: To study the expression of long noncoding RNAs(lncRNAs) in hepatitis B virus(HBV)-related hepatocellular carcinoma(HCC).METHODS: The lncRNA profiles between HBV-related HCC tissues and corresponding normal liver tissues were generated using microarray analysis. Datasets were analyzed using multiple algorithms to depict alterations in gene expression on the basis of gene ontology(GO), pathway analysis, and lncRNA levels.RESULTS: The microarray revealed that 1772 lncRNAs and 2508 mRNAs were differently expressed. The pathway analysis demonstrated that the cell cycle, cytokinecytokine receptor interaction, chemokine signaling pathway, and phosphoinositide 3-kinase-protein kinase B signaling pathway may play important roles in HCC.Several GO terms, such as cell cycle, DNA replication,immune response, and signal transduction, were enriched in gene lists, suggesting a potential correlation with HBVrelated HCC. The upregulated large intergenic noncoding RNA ULK4P2 was physically combined with enhancer of zeste homolog 2. Therefore, the lncRNAs may participate in regulating HBV-related HCC.CONCLUSION: lncRNAs play important roles in HCC,future studies should verify whether large intergenic noncoding ULK4P2 functions by combining with enhancer of zeste homolog 2 in HCC. 展开更多
关键词 enhancer of ZESTE HOMOLOG 2 Hepatocellularcarcinoma LONG noncoding rnas Microarray ULK4P2
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The untold story between enhancers and skeletal muscle development
2
作者 ZHANG Yong-sheng LU Dan +2 位作者 LIU Yu-wen YI Guo-qiang TANG Zhong-lin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第9期2137-2149,共13页
Currently,enhancers have key transcriptional regulatory roles in muscle development.Skeletal muscle formation involves various molecules,and in animals,enhancers are one of the main types of transcriptional regulatory... Currently,enhancers have key transcriptional regulatory roles in muscle development.Skeletal muscle formation involves various molecules,and in animals,enhancers are one of the main types of transcriptional regulatory regions that are of great importance to regulate myogenic gene expression.In muscle development,enhancers can generate enhancer RNAs(eRNAs)that are involved in the regulation of gene transcription.The regulation of gene expression by eRNAs offers great potential in improving animal production traits.Herein we comprehensively review the roles of enhancers in muscle formation and its potential function in skeletal muscle development.This review will describe the future application of enhancers in skeletal muscle development and discuss the prospects that enhancer studies offer for agriculture,biotechnology,and animal breeding. 展开更多
关键词 ANIMAL enhancer eRNA skeletal muscle growth and development
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lncRNA-MIAT通过靶向调控miR-584/EZH2轴促进DLBCL细胞的自噬
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作者 张红莉 徐晓玮 +1 位作者 阿迪娜·乌提库尔 石雨薇 《西部医学》 2024年第10期1412-1418,1426,共8页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-MIAT通过调控微小RNA(miR)-584/ZESTE同源物增强子2(EZH2)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞自噬的影响。方法将DLBCL细胞系Raji分为siMIAT组[lncRNA-MIAT的小干扰RNA(siRNA)构建沉默组]、沉默阴性对照... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-MIAT通过调控微小RNA(miR)-584/ZESTE同源物增强子2(EZH2)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞自噬的影响。方法将DLBCL细胞系Raji分为siMIAT组[lncRNA-MIAT的小干扰RNA(siRNA)构建沉默组]、沉默阴性对照组(siNC组)、miR-584的模拟物组(mimic组)、模拟物阴性对照组(mimic-NC组)。将siMIAT组的Raji继续分为miR-584的inhibitor组(inhibitor组)、inhibitor的阴性对照组(inhibitor-NC组)、EZH2过表达组(pcDNA-EZH2组)以及过表达空载体组(pcDNA-null组)。用实时定量PCR法(qRT-PCR)检测lncRNA-MIAT和miR-584的表达,用荧光原位杂交(FISH)实验检测lncRNA-MIAT在Raji中的定位。用Western blot法检测EZH2和细胞自噬标志物LC3-I、LC3-II、Atg5、Beclin-1和p62的表达。CCK-8法检测细胞的增殖活性。用双荧光素酶报告基因分析miR-584与EZH2的靶向调控作用以及miR-584与lncRNA-MIAT的靶向调控作用。结果与B淋巴细胞系MAO比,lncRNA-MIAT在Raji中高表达(P<0.05),lncRNA-MIAT的表达主要定位在MAO和Raji的细胞质中。沉默lncRNA-MIAT抑制细胞的增殖活性并抑制细胞的自噬(均P<0.05),沉默lncRNA-MIAT还抑制EZH2的表达并促进miR-584的表达(均P<0.05)。生信分析预测lncRNA-MIAT与miR-584具有多个结合位点,以及EZH2与miR-584也具有多个结合位点,双荧光素酶报告基因实验证实EZH2是miR-584的靶基因,且miR-584与lncRNA-MIAT也具有靶向调控作用。在沉默lncRNA-MIAT的细胞中,与inhibitor-NC组比,inhibitor组中细胞的增殖活性以及细胞的自噬均增加(P<0.05)。在沉默lncRNA-MIAT的细胞中,与pcDNA-null组比,pcDNA-EZH2组中细胞的增殖活性以及细胞的自噬均增加(P<0.05)。结论lncRNA-MIAT通过靶向调控miR-584/EZH2轴促进DLBCL的增殖,增强DLBCL细胞的自噬。 展开更多
关键词 长链非编码RNA-MIAT 微小RNA-584 ZESTE同源物增强子2 弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞 自噬
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急性缺血性脑卒中患者血清长链非编码RNA母系表达基因3和Zeste同源物增强子-2表达与神经功能损伤的相关性分析
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作者 李晨曦 白如玉 《心脑血管病防治》 2024年第3期27-31,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)与Zeste同源物增强子-2(EZH2)在急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清中的表达水平及其与神经功能损伤之间的关系。方法选取延安市人民医院2021年1月至2022年11月收治的92例AIS患者为脑卒中... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)与Zeste同源物增强子-2(EZH2)在急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清中的表达水平及其与神经功能损伤之间的关系。方法选取延安市人民医院2021年1月至2022年11月收治的92例AIS患者为脑卒中组,92例健康体检者为对照组,根据NIHSS评分将脑卒中组患者分为致残性损伤组19例,非致残性损伤组73例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应、酶联免疫吸附法分别检测血清lncRNAMEG3、EZH2水平。采用Spearman相关分析法进行AIS患者血清lncRNAMEG3、EZH2表达水平与美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分之间的相关性分析;采用多因素Logistic回归分析AIS患者合并神经功能致残性损伤的影响因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA MEG3、EZH2水平对AIS患者合并神经功能致残性损伤的诊断价值。结果脑卒中组患者血清lncRNA MEG3、EZH2表达水平均高于对照组(t=11.817、11.542,P<0.05)。Spearman相关分析显示,AIS患者血清lncRNA MEG3、EZH2水平与NIHSS评分均呈正相关(r=0.540、0.603,P<0.01)。致残性损伤组体质量指数、吸烟史占比、甘油三酯、总胆固醇、同型半胱氨酸、发病-到院时间(ODT)、lncRNAMEG3、EZH2水平均高于非致残性损伤组(t/χ2=2.103、5.050、9.121、5.585、2.276、5.448、4.638、4.682,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,甘油三酯、总胆固醇、lncRNA MEG3、EZH2以及ODT均是AIS患者合并神经功能致残性损伤的影响因素(OR=4.853、4.277、2.674、3.052、3.901,P<0.05)。lncRNA MEG3、EZH2联合诊断AIS患者合并神经功能致残性损伤的曲线下面积(AUC)大于lncRNAMEG3以及EZH2单独诊断的AUC(Z=2.626、2.954,P<0.01),敏感度、特异度分别为94.74%、82.15%。结论AIS患者血清lncRNA MEG3、EZH2水平均上升,与AIS患者神经功能损伤程度均正相关,可用作AIS患者合并神经功能致残性损伤的诊断指标,且联合诊断效果更好。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 神经功能损伤 长链非编码RNA母系表达基因3 Zeste同源物增强子-2
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缺血性疾病患者血清lncRNA PVT1和FOXM1表达水平及联合心脏磁共振延迟强化成像与预后的关系
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作者 尹晓翔 赵森 +2 位作者 郭颖 刘梦雯 庄琰 《中国CT和MRI杂志》 2024年第3期73-75,共3页
目的 探讨缺血性疾病患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)和叉头框转录因子M1(FOX M1)表达水平及联合心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像(LGE-MRI)与预后的关系。方法 选取2021年2月-2022年2月我院收治的缺血性心脏... 目的 探讨缺血性疾病患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)和叉头框转录因子M1(FOX M1)表达水平及联合心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像(LGE-MRI)与预后的关系。方法 选取2021年2月-2022年2月我院收治的缺血性心脏病患者118例即为研究组,随访一年根据随访过程中是否发生主要心脏不良事件(MACE),分为MACE组32例,无MACE组86例。同期选择在我院体检健康的志愿者118例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清lncRNA PVT1的相对表达量。采用酶联免疫吸附试验(E LISA)检测FOXM1水平。受试者工作特征(ROC)曲线分析LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1对缺血性心脏病患者预后发生MACE的预测价值。结果 研究组患者DBP、SBP、TG、TC、 LDL-C、GLU水平与对照组相比显著升高,HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,研究组的血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者DBP、SBP、TC、LDL-C水平显著升高, HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。MACE组的LGE-MRI阳性数量显著高于无MACE组(P<0.)05。与LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1单独预测相比,三者联合预测MACE发生的AUC更高(Z=7.221,P<0.001;Z=7.737,P<0.001;Z=7.091,P<0.001)。结论 缺血性心脏病预后发生MACE的患者血清lncRNA PVT1和FOXM1水平呈高表达,二者联合LGE-MRI对MACE的发生有一定的预测价值。 展开更多
关键词 长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1 叉头框转录因子M1 心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像 预后 缺血性疾病
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lncSIL通过EZH2/P21/CDK6信号通路负向调控TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞间质转化
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作者 张万方 王琳 +10 位作者 潘鹏涛 李文昕 康瑞丽 朱子任 陈浩勤 方新宇 张星灿 张雨昕 姜依雯 李欣妍 袁本琪 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期600-604,共5页
目的研究在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化(EMT)进程中lncSIL的作用及其相关信号通路。方法采用Western blot法研究沉默lncSIL后对TGF-β1诱导EMT进程中细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)... 目的研究在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化(EMT)进程中lncSIL的作用及其相关信号通路。方法采用Western blot法研究沉默lncSIL后对TGF-β1诱导EMT进程中细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达的影响;通过RNA pulldown分析lncSIL相互作用蛋白,并检测过表达或沉默lncSIL后对其靶基因组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)以及下游因子P21蛋白(P21)和细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)表达的影响,并结合流式细胞术分析lncSIL对细胞周期进程的作用。结果沉默lncSIL后,间质细胞标志蛋白α-SMA和Col I表达升高,肺泡上皮细胞标志蛋白E-cad表达下降;RNA pulldown实验结果显示EZH2是与lncSIL相互作用的靶蛋白,并且沉默lncSIL后EZH2表达升高,其下游基因P21表达下调,CDK6表达上调,同时S期细胞的数量显著升高;过表达lncSIL时,EZH2与CDK6表达下调,P21表达上调,同时S期细胞的数量明显降低。结论lncSIL通过负向调控EZH2/P21/CDK6信号通路抑制细胞周期进程进而抑制TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞向间质转化。 展开更多
关键词 lncSIL 长链非编码RNA 特发性肺纤维化 上皮细胞间质转化 转化生长因子β1 Zeste同源物增强子2 细胞标志蛋白
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LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2对肺间质细胞增殖、迁移及侵袭的作用 被引量:1
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作者 王春燕 王萍 +2 位作者 宋龙飞 刘永全 满君 《基础医学与临床》 2024年第1期43-50,共8页
目的研究长链非编码RNA FEZ家族锌指1-反义RNA 1(lncRNA FEZF1-AS1)调控zeste同源物增强子2(EZH2)对肺间质细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法将人肺腺癌细胞系A549分为对照组(control)和模型组... 目的研究长链非编码RNA FEZ家族锌指1-反义RNA 1(lncRNA FEZF1-AS1)调控zeste同源物增强子2(EZH2)对肺间质细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法将人肺腺癌细胞系A549分为对照组(control)和模型组[model,用转化生长因子β1(TGF-β1)20 ng/mL作用48 h,诱导成为肺间质细胞]。用Western blot检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的蛋白表达。RT-qPCR检测细胞中lncRNA FEZF1-AS1和EZH2基因表达。转染组细胞分为转染si NC组、si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组和si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZH2组。CCK-8法检测细胞增殖、细胞划痕检测细胞迁移、Transwell小室法检测细胞侵袭;用Western blot检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin及EZH2的蛋白表达,用RNA免疫沉淀(RIP)测定FEZF1-AS1与EZH2的直接结合作用。结果与对照组比较,模型组E-cadherin的蛋白表达水平减少(P<0.05);N-cadherin及vimentin的蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,模型组lncRNA FEZF1-AS1与EZH2基因的表达水平明显升高(P<0.05);与si NC组相比,si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达降低(P<0.05);与si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组比较,si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZHZ组细胞增殖、侵袭、迁移能力升高,E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达升高(P<0.05);RIP实验进一步证实了lncRNA FEZF1-AS1与EZH2具有结合作用。结论LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2促进肺间质细胞增殖、侵袭、转移和EMT过程。 展开更多
关键词 特发性肺间质纤维化 FEZ家族锌指1-反义RNA 1(FEZF1-AS1) 上皮细胞-间充质转化(EMT) zeste基因增强子同源物2(EZH2) 人非小细胞肺癌细胞系A549
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幽门螺杆菌诱导增强子RNA调控MYC促进胃癌的作用及机制研究
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作者 石韫 高赟 +2 位作者 颜财旺 彭锐 李刚 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2024年第5期465-474,共10页
目的探究幽门螺杆菌(H.pylori)诱导增强子RNA(eRNA)的表达,eRNA对原癌基因MYC的调控作用及eRNA调控MYC的分子机制,探索eRNA在胃癌发生和发展中的作用。方法根据胃上皮细胞GES-1与H.pylori共培养后测得的RNA-seq筛选差异基因MYC,通过ATAC... 目的探究幽门螺杆菌(H.pylori)诱导增强子RNA(eRNA)的表达,eRNA对原癌基因MYC的调控作用及eRNA调控MYC的分子机制,探索eRNA在胃癌发生和发展中的作用。方法根据胃上皮细胞GES-1与H.pylori共培养后测得的RNA-seq筛选差异基因MYC,通过ATAC-seq、CUTTag确定MYC的eRNA(eMYC)。采用RT-qPCR检测GES-1感染H.pylori前后eMYC和MYC的表达量。使用Western blot检测蛋白含量变化。敲低eMYC后采用RT-qPCR检测MYC的表达量来检验eMYC对MYC的调控作用。采用CUTRUN探究eMYC调控MYC的机制。在胃癌细胞系MKN1中使用RT-qPCR检测eMYC和MYC在感染H.pylori后表达水平的变化,使用EdU检测细胞增殖能力,使用流式细胞术检测细胞凋亡。结果原癌基因MYC在H.pylori感染后表达增加(FDR<1×10-300),MYC基因上下游1MB以内存在染色质开放区域(FDR<0.05)。CUTTag结果显示,H3K27ac、H3K4me1和RNA聚合酶Ⅱ在这个区域呈现高信号。RT-qPCR结果显示,eMYC和MYC的表达水平在GES-1细胞感染H.pylori后都升高(P<0.001),MYC蛋白含量升高。敲低eMYC后,MYC的表达水平(P<0.001)和蛋白含量降低。CUTRUN实验结果显示,敲低eMYC后,eMYC转录位置基因组区域富集到的H3K27ac和BRD4含量降低(P<0.01)。MKN1感染H.pylori后eMYC和MYC的表达水平升高(P<0.01),敲低eMYC后细胞增殖能力降低(P<0.001),细胞凋亡增加(P<0.05)。结论H.pylori感染诱导eMYC的表达,通过影响H3K27ac修饰以及与BRD4相互作用促进原癌基因MYC的转录,在胃癌的发生中有重要作用。eMYC促进胃癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,与胃癌的进展有关。 展开更多
关键词 胃癌 幽门螺杆菌 增强子RNA MYC
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增强子RNA ENSR00000313345在头颈鳞癌发展中的作用研究
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作者 吴葭 薛飞飞 袁华 《口腔生物医学》 2024年第5期257-264,共8页
目的:探究增强子RNA(eRNA)ENSR00000313345在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的作用。方法:通过Spearman相关性分析检测生存相关eRNA ENSR00000313345与其假定靶基因WWC2之间的共表达。通过实时荧光定量PCR检测HNSCC细胞中eRNA ENSR00000313... 目的:探究增强子RNA(eRNA)ENSR00000313345在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的作用。方法:通过Spearman相关性分析检测生存相关eRNA ENSR00000313345与其假定靶基因WWC2之间的共表达。通过实时荧光定量PCR检测HNSCC细胞中eRNA ENSR00000313345的表达;在HNSCC细胞中转染小干扰RNA以敲低eRNA ENSR00000313345,采用CCK⁃8、划痕实验、Transwell迁移实验探讨eRNA ENSR00000313345对HNSCC细胞增殖、迁移的影响。在HNSCC细胞中转染小干扰RNA以敲低WWC2,通过CCK⁃8、划痕实验、Transwell迁移实验以检测WWC2对HNSCC细胞增殖、迁移的影响。通过实时荧光定量PCR和Western blot检测eRNA ENSR00000313345与WWC2的相关性。结果:WWC2的表达量与EN⁃SR00000313345呈正相关。eRNA ENSR00000313345在HNSCC细胞系中的表达量高于口腔黏膜角化上皮细胞系(P<0.05)。敲低eRNA ENSR00000313345可以抑制HNSCC细胞的增殖、迁移(P<0.05)。敲低WWC2能够抑制HNSCC细胞的增殖、迁移(P<0.05)。敲低eRNA ENSR00000313345时,WWC2的表达水平随之下调(P<0.05)。结论:eRNA ENSR00000313345可以通过调控WWC2表达进而促进HNSCC细胞的增殖与迁移。 展开更多
关键词 头颈部鳞状细胞癌 增强子RNA 增强子RNA ENSR00000313345 WWC2
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超级增强子在骨骼肌发育过程中的研究进展
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作者 黄慧君 谭宝华 +5 位作者 肖丽窈 杨玉铭 洪林君 黄思秀 蔡更元 顾婷 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1-6,共6页
超级增强子(Super Enhancers,SEs)是基因组中一类长度在8~20 kb之间、具有超强转录激活特性的顺式作用元件,SEs中富集高密度的关键转录因子(Master Transcription Factors)、转录共激活因子溴结构域蛋白4(Bromodomain Containing Protei... 超级增强子(Super Enhancers,SEs)是基因组中一类长度在8~20 kb之间、具有超强转录激活特性的顺式作用元件,SEs中富集高密度的关键转录因子(Master Transcription Factors)、转录共激活因子溴结构域蛋白4(Bromodomain Containing Protein4,BRD4)、中介粘连蛋白(Mediator Cohesin)及H3K27ac和H3Kme1等组蛋白修饰(Histone Modification Marks)。SEs在调控肌细胞分化、骨骼肌细胞生长发育和维持肌肉细胞身份命运等方面发挥着关键作用。因此,本文总结了SEs在骨骼肌发育过程中的作用和调控机制,为深入解析SEs等顺式调控元件在调控骨骼肌发育过程中的机制及在肌肉疾病的治疗和应用等方面的作用提供理论参考。 展开更多
关键词 超级增强子 超级增强子RNA 骨骼肌发育 转录因子 肌肉疾病
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银胶中三螺旋RNA  poly(rU).poly(rA).poly(rU)的付立叶表面增强拉曼光谱研究 被引量:4
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作者 方晔 王霆 +2 位作者 白春礼 唐有祺 曹恩华 《生物物理学报》 CSCD 北大核心 1995年第2期149-154,共6页
采用近红外付上叶拉曼光谱研究了三螺旋RNA(rU).poly(rA).poly(rU)在溶液中的构象和在银胶中的表面增强拉曼散射行为。结果表明在溶液中,该三螺旋RNA分子中以Watson—Crick碱基配对的两条链处... 采用近红外付上叶拉曼光谱研究了三螺旋RNA(rU).poly(rA).poly(rU)在溶液中的构象和在银胶中的表面增强拉曼散射行为。结果表明在溶液中,该三螺旋RNA分子中以Watson—Crick碱基配对的两条链处于A-构型,而第二条嘧啶链处于C2'-endo/anti构象。在银胶中,该三螺旋RNA的表面增强拉曼效应明显。与溶液状态下相比,835和819cm-1谱带的出现暗示该三螺旋RNA吸附到银胶表面后,该三螺旋RNA分子的螺旋结构仍得到保留,且其构象与溶液中的相近。同时该三螺旋RNA主要是通过核酸骨架上带负电荷的磷酸基团定位于银胶表面而吸附的。 展开更多
关键词 三螺旋RNA 表面增强 拉曼光谱 构象
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小干扰RNA对人淀粉样前体蛋白基因的沉默作用(英文) 被引量:8
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作者 邱昕 潘纪安 +2 位作者 陈宇 张苏明 郭德银 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期801-805,共5页
目的观察小干扰RNA(siRNA)对人淀粉样前体蛋白(APP)基因的沉默作用。方法该研究将设计好的一对寡核甘酸在细胞内源性地转录成小发夹RNA(shRNA),同时构建了携带两个APP亚型的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的GFP-APP重组质粒。利用EGFP作为报... 目的观察小干扰RNA(siRNA)对人淀粉样前体蛋白(APP)基因的沉默作用。方法该研究将设计好的一对寡核甘酸在细胞内源性地转录成小发夹RNA(shRNA),同时构建了携带两个APP亚型的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的GFP-APP重组质粒。利用EGFP作为报告基因,在COS-7细胞内通过共转染siRNA表达质粒和GFP-APP的重组质粒来观察沉默效应。结果针对APP的siRNA可有效地下调APP基因。结论针对APP的siRNA将不仅在研究APP基因功能和深入研究阿尔茨海默病(AD)的病理分子机制上,而且在运用siRNA这种新型的反义核酸药物治疗AD方面扮演重要角色。 展开更多
关键词 淀粉样前体蛋白 增强型绿色荧光蛋白 小干扰RNA 人淀粉样前体蛋白基因
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针对增强型绿色荧光蛋白RNA干扰表达载体的构建和鉴定 被引量:5
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作者 马龙洋 刘家云 +3 位作者 许彦鸣 贾林涛 王成济 杨安钢 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第8期676-678,共3页
目的: 构建针对增强型(EGFP)的pSUPERsiRNA(smallinterferencingRNA)表达载体,并在哺乳动物细胞COS 7细胞中观察其干扰效果.方法: 设计针对EGFP编码区的寡核苷酸链,体外退火后克隆入经BglⅡ和HindⅢ双酶切线性化的干扰载体pSUPER中,对... 目的: 构建针对增强型(EGFP)的pSUPERsiRNA(smallinterferencingRNA)表达载体,并在哺乳动物细胞COS 7细胞中观察其干扰效果.方法: 设计针对EGFP编码区的寡核苷酸链,体外退火后克隆入经BglⅡ和HindⅢ双酶切线性化的干扰载体pSUPER中,对重组质粒进行酶切分析和DNA序列测定.通过脂质体介导,将重组干扰质粒与pIRESE2 EG FP瞬时共转染COS 7细胞, 48h后荧光显微镜下观察干扰效果.结果: 经酶切鉴定及DNA序列测定证实,重组质粒中已插入了目的基因片段.瞬时共转染后荧光显微镜观察结果显示: 只转染pIRES2 EGFP及共转染pIRES2 EGFP和空载体pSUPER的COS 7细胞中有大量的EGFP表达.而共转染pIRES2 EGFP和pSUPER R237、pSUPER R304、pSUPER R447的COS 7细胞中发出荧光的细胞数量明显减少,荧光强度也明显降低.结论: 成功构建了针对EGFP的RNA干扰表达载体pSUPER R237,pSUPER R304和pSUPER R447,并与pIR ESE2 EGFP瞬时共转染COS 7细胞,有效地抑制了EGFP在哺乳动物细胞中的表达. 展开更多
关键词 RNA干扰 增强型绿色荧光蛋白 COS-7细胞系
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白细胞介素增强因子3对胃癌细胞侵袭转移能力的影响及机制 被引量:4
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作者 刘羽 李勇 +4 位作者 赵雪峰 檀碧波 贾楠 张萌 王冬 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第7期45-50,共6页
目的探讨白细胞介素增强因子3(ILF3)对胃癌细胞侵袭转移能力的影响及相关机制。方法免疫组织化学技术检测ILF3在胃癌组织、转移淋巴结组织、正常胃黏膜组织中表达情况;收集患者临床资料,分析ILF3与胃癌患者临床病理特征的关系。Western ... 目的探讨白细胞介素增强因子3(ILF3)对胃癌细胞侵袭转移能力的影响及相关机制。方法免疫组织化学技术检测ILF3在胃癌组织、转移淋巴结组织、正常胃黏膜组织中表达情况;收集患者临床资料,分析ILF3与胃癌患者临床病理特征的关系。Western blot检测不同胃癌细胞株中ILF3表达。合成针对ILF3的小干扰RNA转染人胃癌细胞株MGC803;MTT法检测MGC803细胞活性;细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测细胞的迁移侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和Western blot检测MMP-7、MMP-9、TIMP-1基因的m RNA和蛋白表达情况。结果胃癌组织中ILF3蛋白阳性率高于癌旁组织;转移淋巴结中ILF3蛋白阳性率高于胃癌组织(P<0.05)。胃癌组织中ILF3蛋白阳性表达与患者的肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移、临床分期有关(P<0.05)。各胃癌细胞株中MGC803的ILF3蛋白表达最强,抑制MGC803细胞内源性ILF3表达后细胞的活性减弱;迁移和侵袭能力也降低(P<0.05)。ILF3-si RNA转染MGC803后细胞的MMP-2、MMP-7表达减弱,而TIMP-1的表达增高(P<0.05)。结论 ILF3对胃癌的侵袭转移有促进作用,ILF3可能是通过调节MMP-7、MMP-9、TIMP-1基因而参与了胃癌的侵袭转移。 展开更多
关键词 胃癌 白细胞介素增强因子3 RNA干扰 侵袭 转移
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探讨多聚胞嘧啶结合蛋白E2诱骗RNA对32D-BCR/ABL细胞增殖的影响 被引量:5
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作者 王雅珍 曾建明 +7 位作者 袁颖 魏容 彭智 肖青 刘钉宾 黄世峰 陈新敏 冯文莉 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期518-522,共5页
目的:在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)由慢性期向急性期的过渡阶段伴随有多聚胞嘧啶结合蛋白E2[poly(rC)-binding protein E2,hnRNP E2]的异常表达。本研究初步探讨hnRNP E2诱骗RNA(decoy RNA)对32D-BCR/ABL细胞增殖... 目的:在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)由慢性期向急性期的过渡阶段伴随有多聚胞嘧啶结合蛋白E2[poly(rC)-binding protein E2,hnRNP E2]的异常表达。本研究初步探讨hnRNP E2诱骗RNA(decoy RNA)对32D-BCR/ABL细胞增殖的影响及其可能的分子机制。方法:用电转染方法将hnRNP E2诱骗RNA野生序列和突变序列的表达载体(pGD和pGM)转入32D-BCR/ABL细胞,用G418筛选出稳定表达诱骗RNA的细胞。锥虫蓝染色法和克隆形成实验检测细胞的增殖能力。FCM分析细胞周期,RT-PCR和Western印迹法检测下游CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-bindingproteinα,C/EBPα)和c-Myc的表达。结果:筛选出稳定表达野生型和突变型诱骗RNA的32DP210-pGD细胞和32DP210-pGM细胞。野生型32DP210-pGD细胞与未转染32D-BCR/ABL细胞相比,其细胞增殖抑制率为(69.48±5.21)%,克隆形成能力明显减弱,细胞周期由G0/G1期向S期进展受阻;C/EBPαmRNA水平无改变,但在蛋白水平上42 ku-C/EBPα的表达增加(43.83±4.91)%;c-Myc mRNA水平下降(35.67±6.64)%,蛋白水平降低(30.91±3.84)%。突变型32DP210-pGM细胞与未转染32D-BCR/ABL的细胞相比,其上述各指标无明显差异。结论:hnRNP E2诱骗RNA能够抑制32D-BCR/ABL细胞的增殖,其机制可能是诱骗RNA阻断hnRNP E2和C/EBPαmRNA的结合,引起42 ku-C/EBPα表达增加,进而引起其下游靶基因c-Myc下调。 展开更多
关键词 白血病 髓样 慢性 多聚嘧啶区结合蛋白质 CCAAT增强子结合蛋白α 细胞增殖 诱骗RNA
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dsRNA阻断大鼠骨髓源性神经干细胞Hes5表达的实验研究 被引量:3
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作者 王海燕 徐如祥 +1 位作者 姜晓丹 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期35-38,41,共5页
目的 观察外源性短双链RNA(dsRNA)在转录后水平即mRNA水平降低基因表达的效率,并对其影响因素进行初步探讨。方法 将体外分离培养的大鼠骨髓基质细胞,通过由本实验室配制的特殊培养基诱导成神经干细胞,应用人工合成的dsRNA于不同浓... 目的 观察外源性短双链RNA(dsRNA)在转录后水平即mRNA水平降低基因表达的效率,并对其影响因素进行初步探讨。方法 将体外分离培养的大鼠骨髓基质细胞,通过由本实验室配制的特殊培养基诱导成神经干细胞,应用人工合成的dsRNA于不同浓度转染神经干细胞,Western bloting检测dsRNA是否能阻断转录因子Hes5的表达,0.5%锥虫蓝法测定各浓度组中培养细胞活力。结果 200、300nmol/L浓度的dsRNA能特异有效地阻断Hes5的表达,而50~200nmol/L浓度的dsRNA有利于干细胞存活。结论 dsRNA能在神经干细胞内启动RNA干扰作用,适宜浓度的dsRNA能在特异有效地阻断内源性基因的表达的同时,最大限度地保持细胞活力。 展开更多
关键词 DSRNA 大鼠 骨髓源性神经干细胞 Hes5 实验 外源性短双链RNA 基因表达
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HOTAIR EZH2和VEGF在鼻咽癌组织中的表达情况及其对预后的影响 被引量:6
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作者 叶贝华 傅明 +2 位作者 何锦添 陈顺金 蒋迪 《河北医学》 CAS 2020年第5期758-762,共5页
目的:分析血管内皮生长因子(VEGF)、zeste基因增强子同源物2(EZH2)和长链非编码RNA Hox转录反义RNA(HOTAIR)在鼻咽癌组织中的表达情况及其对预后的影响。方法:采用回顾性研究,收集本院72例鼻咽癌(鼻咽癌组)和54例鼻咽慢性炎症(对照组)... 目的:分析血管内皮生长因子(VEGF)、zeste基因增强子同源物2(EZH2)和长链非编码RNA Hox转录反义RNA(HOTAIR)在鼻咽癌组织中的表达情况及其对预后的影响。方法:采用回顾性研究,收集本院72例鼻咽癌(鼻咽癌组)和54例鼻咽慢性炎症(对照组)患者的临床资料,通过免疫组织化学法检测两组VEGF和EZH2蛋白表达情况,并采用实时荧光定量聚合酶链反应检测患者VEGF、EZH2和HOTAIR mRNA的表达情况。根据HOTAIR在鼻咽癌组织中的表达情况,将鼻咽癌患者分为低表达组与高表达组,比较两组临床病理特征的差异。结果:鼻咽癌组VEGF和EZH2蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.001)。相比对照组,鼻咽癌组VEGF、EZH2和HOTAIR mRNA相对表达量均明显升高(P<0.05)。高表达组病理分级、N分期、M分期、近期疗效与低表达组比较,均存在明显差异(P<0.05);两组年龄、性别、病理类型的比较,均无明显差异(P>0.05)。结论:VEGF、EZH2和HOTAIR高表达于鼻咽癌组织,并且HOTAIR可能通过EZH2和VEGF而起到诱导鼻咽癌远处转移的作用,且与患者预后不良存在密切关系。 展开更多
关键词 鼻咽癌 血管内皮生长因子 zeste基因增强子同源物2 Hox转录反义RNA
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MEF2A RNA干扰对小鼠主动脉内皮细胞MEF2A表达及细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1表达的影响 被引量:3
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作者 周文平 张辉 张金盈 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第4期502-505,共4页
目的:观察肌细胞增强因子2A(MEF2A)RNA干扰对小鼠主动脉内皮细胞MEF2A及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响。方法:培养小鼠主动脉内皮细胞,构建MEF2A RNA干扰慢病毒或者阴性对照慢病毒(NC)并转染小鼠主... 目的:观察肌细胞增强因子2A(MEF2A)RNA干扰对小鼠主动脉内皮细胞MEF2A及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响。方法:培养小鼠主动脉内皮细胞,构建MEF2A RNA干扰慢病毒或者阴性对照慢病毒(NC)并转染小鼠主动脉内皮细胞。实验设对照组(不加慢病毒)、NC组和MEF2A RNA干扰组3组,应用ELISA和RT-PCR法分别检测MEF2A及ICAM-1、VCAM-1蛋白及mRNA的表达水平。结果:ICAM-1在对照组、NC组和MEF2A RNA干扰组上清液中的表达量分别为(1.133±0.182)、(1.267±0.115)、(2.249±0.185)μg/L;VCAM-1在对照组、NC组和MEF2A RNA干扰组上清液中的表达量分别为(2.382±0.204)、(2.253±0.281)、(5.077±0.198)μg/L。ICAM-1、VCAM-1在上清液中的水平及mRNA表达水平,NC组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);MEF2A RNA干扰组与对照组和NC组相比均升高(P<0.05)。结论:慢病毒介导的MEF2A RNA干扰可抑制小鼠主动脉内皮细胞MEF2A活性及mRNA的表达,并可促进血管内ICAM-1、VCAM-1蛋白及mRNA的表达。 展开更多
关键词 小鼠 肌细胞增强因子2A RNA干扰 ICAM-1 VCAM-1
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小干扰RNA表达载体介导的EOLA1基因表达抑制研究 被引量:1
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作者 苏踊跃 梁光萍 +4 位作者 罗向东 刘月明 陈渝 陈建 杨宗城 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期200-202,共3页
目的 设计和构建EOLA1基因特异性的小干扰RNA质粒 ,并初步验证其对靶基因的抑制作用。方法 将靶点特异性的寡核苷酸连接到经ApaⅠ EcoRⅠ酶切线性化的pBS/U6质粒 ,测序验证 ,阳性重组质粒转染ECV3 0 4细胞 ,半定量RT PCR方法检测靶... 目的 设计和构建EOLA1基因特异性的小干扰RNA质粒 ,并初步验证其对靶基因的抑制作用。方法 将靶点特异性的寡核苷酸连接到经ApaⅠ EcoRⅠ酶切线性化的pBS/U6质粒 ,测序验证 ,阳性重组质粒转染ECV3 0 4细胞 ,半定量RT PCR方法检测靶基因的表达 ,阳性重组质粒与pEGFP EOLA1共转染 ,观察外源报告基因绿色荧光蛋白的表达。结果 构建的阳性重组质粒转染能够抑制靶基因EOLA1mRNA的表达 ,并能够显著抑制EOLA1 EGFP融合蛋白的表达。结论 成功构建了针对EOLA1基因的siRNA质粒 ,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 ECV304 EOLA1 增强绿色荧光蛋白
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小分子干扰RNA沉默果蝇zeste基因增强子同源物2对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响 被引量:2
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作者 秦海霞 李少平 +2 位作者 朱利红 张全华 王世进 《新乡医学院学报》 CAS 2019年第2期116-120,共5页
目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响。方法培养宫颈癌Hela细胞,收集对数生长期Hela细胞继续培养,待贴壁细胞长满底部面积80%~90%时进行转染。将Hela细胞随机分为空白... 目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响。方法培养宫颈癌Hela细胞,收集对数生长期Hela细胞继续培养,待贴壁细胞长满底部面积80%~90%时进行转染。将Hela细胞随机分为空白对照组、control siRNA组和EZH2 siRNA组,空白对照组Hela细胞不作处理,control siRNA组Hela细胞转染control siRNA,EZH2 siRNA组Hela细胞转染EZH2 siRNA。收集3组转染后Hela细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Hela细胞中EZH2 mRNA表达,Western blot法检测Hela细胞中EZH2蛋白表达,流式细胞术检测Hela细胞的细胞周期。收集3组转染后Hela细胞,分别加入不同质量浓度(0. 0、12. 5、25. 0、50. 0、100. 0、200. 0 g·L^(-1))的顺铂,48 h后采用四甲基偶氮唑蓝法检测Hela细胞在顺铂作用下的体外存活率。结果 Control siRNA和EZH2 siRNA可高效转染Hela细胞,转染率均达90%以上。空白对照组、control siRNA组和EZH2 siRNA组Hela细胞中EZH2 mRNA相对表达量分别为396. 7±88. 4、389. 2±70. 6和98. 5±20. 3,EZH2 siRNA组Hela细胞中EZH2 mRNA相对表达量显著低于空白对照组和control siRNA组(t=2. 057、2. 015,P <0. 01),空白对照组与control siRNA组Hela细胞中EZH2 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(t=1. 476,P> 0. 05)。空白对照组、control siRNA组和EZH2 siRNA组Hela细胞中EZH2蛋白相对表达量分别为509. 4±110. 7、497. 5±80. 4和120. 4±31. 3,EZH2 siRNA组Hela细胞中EZH2蛋白相对表达量显著低于空白对照组和control siRNA组(t=2. 682、2. 597,P <0. 01),空白对照组与control siRNA组Hela细胞中EZH2蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(t=1. 943,P> 0. 05)。EZH2 siRNA组G_0/G_1期细胞比例显著高于空白对照组和control siRNA组(t=2. 893、3. 087,P <0. 05),EZH2 siRNA组S期、G_2/M期细胞比例显著低于空白对照组和control siRNA组(EZH2 siRNA组与空白对照组比较:t=2. 526、5. 462,P <0. 05; EZH2 siRNA组与control siRNA组比较:t=2. 498、5. 417,P <0. 05),空白对照组与control siRNA组G_0/G_1期、S期及G_2/M期细胞比例比较差异均无统计学意义(t=0. 926、1. 017、0. 947,P> 0. 05)。不同质量浓度顺铂作用48 h后,同一质量浓度下EZH2 siRNA组Hela细胞的存活率明显低于空白对照组及control siRNA组(P <0. 05),且随着顺铂浓度的增加,3组Hela细胞的存活率均呈逐渐下降趋势。结论沉默EZH2表达可提高宫颈癌Hela细胞对顺铂的敏感性,而阻滞细胞周期可能是其主要作用机制之一。 展开更多
关键词 zeste基因增强子同源物2 宫颈癌 小分子干扰RNA 顺铂 药物敏感性
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