黄瓜霜霉病菌烯肟菌酯敏感基线的建立及其室内抗药性风险评估

为研究黄瓜霜霉病菌对烯肟菌酯的敏感性及室内抗药性风险，采用叶碟保湿法测定了52株黄瓜霜霉病菌对烯肟菌酯的敏感性。结果表明52个菌株的EC50（抑制中浓度）差异较小，平均EC50为（0．0101±0．0031）μg／mL。黄瓜霜霉病菌对烯肟菌酯的敏感性频率分布呈连续单峰曲线，接近正态分布，没有出现敏感性下降的抗药性群体，这些病菌均为烯肟菌酯野生敏感菌株，因此可以采用其平均EC如作为黄瓜霜霉病菌对烯肟菌酯的敏感基线。室内药剂驯化和紫外线诱变试验，获得了10株黄瓜霜霉病菌对烯肟菌酯不同抗性水平的突变体，其EC50为1～5μg／mL，抗性指数为80～500倍，抗药性稳定，致病力、适合度、竞争力与亲本菌株相比没有明显差异，或优于亲本菌株。室内抗药性风险评估表明，黄瓜霜霉病菌对烯肟菌酯具有较高的抗药性风险，预示田间自然情况下抗药性菌株可能形成优势菌群而导致药剂防治失败的潜在风险。

黄瓜霜霉病菌不同发育阶段对烯肟菌酯的敏感性

【目的】研究黄瓜霜霉病菌不同发育阶段对烯肟菌酯的敏感性,明确建立敏感性基线的生物测定方法。【方法】本研究以专性寄生菌黄瓜霜霉病菌为靶标菌,采用凹玻片法和叶碟保湿法,测定了该病原菌不同发育阶段对烯肟菌酯的敏感性。【结果】研究结果表明,烯肟菌酯对黄瓜霜霉病菌休止孢的萌发没有影响,对黄瓜霜霉病菌游动孢子释放、游动孢子游动、芽管伸长、菌丝扩展、孢囊梗形成及孢子囊产生均有抑制作用,而且对黄瓜霜霉病菌的游动孢子释放、游动孢子游动和芽管伸长有显著的抑制作用。其中对黄瓜霜霉病菌的游动孢子释放和芽管伸长EC50值分别为0.0250和0.0037μg·ml-1;并且当烯肟菌酯浓度为0.05μg·ml-1时能使游动孢子消解,抑制休止孢的形成;当药剂浓度为5μg·ml-1时,对病斑的扩展和孢子囊产生抑制率分别达到60.41%和92.10%,且对孢囊梗的产生也有显著的抑制作用。【结论】综合考虑试验方法的可操作性和稳定、准确性,推荐使用叶碟保湿法测定烯肟菌酯对菌丝扩展的EC50,用以建立敏感基线并进行田间抗药性监测。

烯肟菌酯正辛醇-水分配系数的测定

建立了水中微量烯肟菌酯的测定方法,水中的烯肟菌酯经二氯甲烷萃取后,进HPLC测定,方法的平均添加回收率为98.1%～100.9%,烯肟菌酯的最小检出量为2×10-9g,最小检出浓度为0.02μg.mL-1.摇瓶法对烯肟菌酯正辛醇-水分配系数的测定结果表明,烯肟菌酯在二次蒸馏水中的lgKow为3.03±0.12.生物体对烯肟菌酯具有较强程度的富集作用.

超高效液相色谱-串联质谱法测定食品中烯肟菌酯残留量

提出了用超高效液相色谱一串联质谱法测定食品中烯肟菌酯残留量的方法。样品经乙腈提取后，以伯仲胺、c18和无水硫酸镁为萃取剂用基质分散固相萃取净化，净化液经EclipsePlusC，8色谱柱（50mmX2．1mm，1．8μm）分离，用乙腈与5mmol-L-1。乙酸铵溶液（75＋25）的混合液洗脱，采用正离子模式监测。烯肟菌酯的质量浓度在50μg·L-1以内与峰面积呈线性关系，检出限（3S／N）为1肚g·kg-1，以空白样品为基体进行加标回收试验，所得回收率在76．7％～89．6％之间，相对标准偏差（n=10）在4．2％～11％之间。