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人产肠毒素大肠杆菌ST、LT-B肠毒素基因融合的研究
被引量:
3
1
作者
汪江
陈添弥
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1995年第2期173-178,共6页
将人产肠毒素大肠杆菌(ETEC),编码耐热肠毒素(ST)的基因片段与编码不耐热肠毒素B亚基(LT-B)的基因进行融合,并在此基础上进行不同数目ST基因的串联,ELISA检测融合基因表达蛋白产物观察到ST与LT-B之间存在着相互影响。ST的检测滴度随基...
将人产肠毒素大肠杆菌(ETEC),编码耐热肠毒素(ST)的基因片段与编码不耐热肠毒素B亚基(LT-B)的基因进行融合,并在此基础上进行不同数目ST基因的串联,ELISA检测融合基因表达蛋白产物观察到ST与LT-B之间存在着相互影响。ST的检测滴度随基因串联个数增加而逐渐升高,而LT的ELISA滴度则减弱。说明了ST可以通过基因串联提高表达产物抗原活性,这为产肠毒素大肠杆菌多价疫苗的研制提供了重要的研究基础。
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关键词
产肠毒素
大肠杆菌
st
lt
-B
基因融合
病原菌
下载PDF
职称材料
人毒素原性大肠杆菌肠毒素ST、LT-B基因的融合
2
作者
汪江
陈添弥
《生物技术通讯》
CAS
1994年第1期8-12,共5页
将毒素原性大肠杆菌(ETEC)编码耐热肠毒素(ST)的基因片段与编码热敏肠毒素B亚基(LT—B)的基因进行融合,并在此基础上进行不同数目ST基因的串联。ELISA检测融合基因表达蛋白产物,观察到ST与LT-B之间存在着相互影响。ST的检测滴度随基因...
将毒素原性大肠杆菌(ETEC)编码耐热肠毒素(ST)的基因片段与编码热敏肠毒素B亚基(LT—B)的基因进行融合,并在此基础上进行不同数目ST基因的串联。ELISA检测融合基因表达蛋白产物,观察到ST与LT-B之间存在着相互影响。ST的检测滴度随基因串联个数增加而逐渐升高,而LT的ELISA滴度则减弱。本研究说明ST可以通过基因串联提高表达产物抗原活性。这为毒素原性大肠杆菌多价疫苗的研制提供了重要的研究基础。
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关键词
毒素原性大肠杆菌
st
lt
-B
基因融合
重组疫苗
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职称材料
LTB-2xSTN12S融合蛋白联合cGAMP和dmLT双佐剂对小鼠的免疫保护效果
被引量:
1
3
作者
陈敬
张燕斌
+4 位作者
刘钰
王雪薇
钟佑秀
王平
刘梅影
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2020年第12期1345-1351,共7页
目的在原核系统中表达肠产毒性大肠埃希菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)不耐热肠毒素B亚基(heat labile enterotoxin B subunit,LTB)和耐热肠毒素(heat stable enterotoxin)突变体(STN12S)的融合蛋白,联合环鸟-腺二核苷酸(cy...
目的在原核系统中表达肠产毒性大肠埃希菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)不耐热肠毒素B亚基(heat labile enterotoxin B subunit,LTB)和耐热肠毒素(heat stable enterotoxin)突变体(STN12S)的融合蛋白,联合环鸟-腺二核苷酸(cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate,cGAMP)和dmLT(double mutant heat-labile enterotoxin)佐剂初步评价其保护效果并进行免疫反应分析。方法构建表达质粒pET28α-LTB-2xSTN12S,转化至E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,镍柱纯化,将纯化的重组LTB-2xSTN12S蛋白联合dmLT和cGAMP佐剂(为抗原+dmLT+cGAMP组;同时设空白对照组、感染对照组、抗原组),均经皮下途径免疫BALB/c小鼠,免疫2针,间隔2周,末次免疫2周后滴鼻攻击ETEC-HN临床分离株(LT+/ST+),2周后称重,取眼眶静脉血及脾淋巴细胞进行体液和细胞免疫分析。结果重组质粒pET28-LTB-2xSTN12S基因测序正确,纯化的重组LTB-2xSTN12S蛋白相对分子质量约20000,纯度为93%,与霍乱毒素(cholera toxin,CT)和ST多抗均能发生特异反应。抗原+dmLT+cGAMP组小鼠诱导的免疫保护均高于感染对照组和抗原组(P均<0.05),诱导的针对LTB-2xSTN12S血清IgG抗体水平及针对LTB和ST抗原特异性IgG抗体水平均高于其他组(P均<0.05);脾淋巴细胞培养上清中抗LTB-2xSTN12SIgG抗体水平及针对LTB-2xSTN12SLTB抗原特异性IgG抗体水平均显著高于其他组(P均<0.01),诱导的脾淋巴细胞抗原特异性IL-4、IL-6、IL-17和IFNγ细胞因子分泌细胞数量均高于其他组(P均<0.05)。结论经原核表达系统成功表达并纯化了LTB-2xSTN12S融合蛋白,LTB和ST抗原性良好,联合cGAMP和dmLT佐剂对同时表达LT和ST临床分离株的攻击具有保护效果,并检测到显著的特异性体液和细胞免疫反应。
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关键词
lt
B-2x
st
N12S融合蛋白
cGAMP
dm
lt
双佐剂
肠产毒性大肠埃希菌
不耐热肠毒素
耐热肠毒素
免疫保护效果
原文传递
题名
人产肠毒素大肠杆菌ST、LT-B肠毒素基因融合的研究
被引量:
3
1
作者
汪江
陈添弥
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1995年第2期173-178,共6页
文摘
将人产肠毒素大肠杆菌(ETEC),编码耐热肠毒素(ST)的基因片段与编码不耐热肠毒素B亚基(LT-B)的基因进行融合,并在此基础上进行不同数目ST基因的串联,ELISA检测融合基因表达蛋白产物观察到ST与LT-B之间存在着相互影响。ST的检测滴度随基因串联个数增加而逐渐升高,而LT的ELISA滴度则减弱。说明了ST可以通过基因串联提高表达产物抗原活性,这为产肠毒素大肠杆菌多价疫苗的研制提供了重要的研究基础。
关键词
产肠毒素
大肠杆菌
st
lt
-B
基因融合
病原菌
Keywords
enterotoxigenic
escherichia
coli
(
etec
),
heat-labile
enterotoxin
(
lt
).
heat-stable
enterotoxin
(
st
),
gene
fusion
,recombinant vaccine
分类号
R378.21 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
人毒素原性大肠杆菌肠毒素ST、LT-B基因的融合
2
作者
汪江
陈添弥
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
1994年第1期8-12,共5页
文摘
将毒素原性大肠杆菌(ETEC)编码耐热肠毒素(ST)的基因片段与编码热敏肠毒素B亚基(LT—B)的基因进行融合,并在此基础上进行不同数目ST基因的串联。ELISA检测融合基因表达蛋白产物,观察到ST与LT-B之间存在着相互影响。ST的检测滴度随基因串联个数增加而逐渐升高,而LT的ELISA滴度则减弱。本研究说明ST可以通过基因串联提高表达产物抗原活性。这为毒素原性大肠杆菌多价疫苗的研制提供了重要的研究基础。
关键词
毒素原性大肠杆菌
st
lt
-B
基因融合
重组疫苗
Keywords
enterotoxigenic
escherichia
coli
(
etec
)
heat-labile
enterotoxin
(
lt
)
heat-stable
enterotoxin
(
st
)
gene
fusion
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
LTB-2xSTN12S融合蛋白联合cGAMP和dmLT双佐剂对小鼠的免疫保护效果
被引量:
1
3
作者
陈敬
张燕斌
刘钰
王雪薇
钟佑秀
王平
刘梅影
机构
国药中生生物技术研究院有限公司
中国生物技术股份有限公司
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2020年第12期1345-1351,共7页
基金
中国医药集团新产品开发项目(2013SW10)。
文摘
目的在原核系统中表达肠产毒性大肠埃希菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)不耐热肠毒素B亚基(heat labile enterotoxin B subunit,LTB)和耐热肠毒素(heat stable enterotoxin)突变体(STN12S)的融合蛋白,联合环鸟-腺二核苷酸(cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate,cGAMP)和dmLT(double mutant heat-labile enterotoxin)佐剂初步评价其保护效果并进行免疫反应分析。方法构建表达质粒pET28α-LTB-2xSTN12S,转化至E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,镍柱纯化,将纯化的重组LTB-2xSTN12S蛋白联合dmLT和cGAMP佐剂(为抗原+dmLT+cGAMP组;同时设空白对照组、感染对照组、抗原组),均经皮下途径免疫BALB/c小鼠,免疫2针,间隔2周,末次免疫2周后滴鼻攻击ETEC-HN临床分离株(LT+/ST+),2周后称重,取眼眶静脉血及脾淋巴细胞进行体液和细胞免疫分析。结果重组质粒pET28-LTB-2xSTN12S基因测序正确,纯化的重组LTB-2xSTN12S蛋白相对分子质量约20000,纯度为93%,与霍乱毒素(cholera toxin,CT)和ST多抗均能发生特异反应。抗原+dmLT+cGAMP组小鼠诱导的免疫保护均高于感染对照组和抗原组(P均<0.05),诱导的针对LTB-2xSTN12S血清IgG抗体水平及针对LTB和ST抗原特异性IgG抗体水平均高于其他组(P均<0.05);脾淋巴细胞培养上清中抗LTB-2xSTN12SIgG抗体水平及针对LTB-2xSTN12SLTB抗原特异性IgG抗体水平均显著高于其他组(P均<0.01),诱导的脾淋巴细胞抗原特异性IL-4、IL-6、IL-17和IFNγ细胞因子分泌细胞数量均高于其他组(P均<0.05)。结论经原核表达系统成功表达并纯化了LTB-2xSTN12S融合蛋白,LTB和ST抗原性良好,联合cGAMP和dmLT佐剂对同时表达LT和ST临床分离株的攻击具有保护效果,并检测到显著的特异性体液和细胞免疫反应。
关键词
lt
B-2x
st
N12S融合蛋白
cGAMP
dm
lt
双佐剂
肠产毒性大肠埃希菌
不耐热肠毒素
耐热肠毒素
免疫保护效果
Keywords
lt
B-2x
st
N12S
fusion
protein
cGAMP
dm
lt
Double adjuvant
enterotoxigenic
escherichia
coli
(
etec
)
Heat labile
enterotoxin
(
lt
)
Heat
st
able
enterotoxin
(
st
)
Immune protection
分类号
Q93-337 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人产肠毒素大肠杆菌ST、LT-B肠毒素基因融合的研究
汪江
陈添弥
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1995
3
下载PDF
职称材料
2
人毒素原性大肠杆菌肠毒素ST、LT-B基因的融合
汪江
陈添弥
《生物技术通讯》
CAS
1994
0
下载PDF
职称材料
3
LTB-2xSTN12S融合蛋白联合cGAMP和dmLT双佐剂对小鼠的免疫保护效果
陈敬
张燕斌
刘钰
王雪薇
钟佑秀
王平
刘梅影
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2020
1
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