蜡样芽胞杆菌肠毒素FM(CwpFM)流行情况及其作用机制的研究进展

蜡样芽胞杆菌是一种广泛存在于环境和食物中的食源性致病菌,可引起肠胃炎和呕吐等多种疾病。蜡样芽胞杆菌孢子无法被巴氏消毒杀死且具有很强的黏附性,可传播到各种食品中,对食品安全和人类健康造成较大威胁。我国对于牛奶的需求不断增加,蜡样芽胞杆菌在乳中的分离率也呈现上升趋势。蜡样芽胞杆菌可产生多种毒力因子,包括成孔毒素、呕吐毒素、溶血素、肠毒素、蛋白酶和磷脂酶等,引发呕吐或腹泻型食物中毒。其中,蜡样芽胞杆菌分泌的肠毒素FM是一种细胞壁肽酶,也被称作CwpFM,其分离率高,但致病性尚不明确。本文首先对蜡样芽胞杆菌的毒力因子进行综述,其次对蜡样芽胞杆菌及其CwpFM在食物和环境等方面的流行情况进行总结,最后概述了CwpFM作用机制的研究进展。

多重PCR检测蜡样芽孢杆菌毒力基因方法学建立与初步应用

目的 建立且优化一种能同时检测蜡样芽孢杆菌三种毒力基因的多重聚合酶链式反应(PCR)体系,初步应用于医院内环境中蜡样芽孢杆菌毒力基因检测。方法 以蜡样芽孢杆菌的细胞毒素K(cytK)、肠毒素FM(entFM)、非溶血性肠毒素(nhe)三种毒力基因为靶基因,进行多重PCR,优化体系的引物浓度、退火温度、电泳时间和电压,验证该多重PCR体系灵敏度、特异性以及稳定性,并检测医院环境中蜡样芽孢杆菌毒力基因携带情况。结果 成功建立多重PCR体系,nhe、cytK和entFM最佳引物浓度分别为8、20和6μm,退火温度为56℃,电泳条件为80V、30min。该体系灵敏度可达10^(-1)ng/μl,重复性好,特异性良好,可在-20℃稳定保存1个月。医院环境中蜡样芽孢杆菌毒力基因携带情况为:cytK基因携带率为75.00%,entFM基因携带率为66.67%,nhe基因携带率为16.67%。结论 多重PCR可同时检测蜡样芽孢杆菌三种毒力基因,操作简便,重复性好,具有灵敏、特异、稳定的优点;医院环境中蜡样芽孢杆菌的毒力基因携带率高,提示应加强医院环境的清洁与消毒。此文为蜡样芽孢杆菌毒力基因的快速检测和芽孢感染的预防提供依据。