胶原蛋白改性聚氨酯皮革涂饰剂

通过胶原蛋白接枝改性聚氨酯皮革涂饰剂，探讨了接枝改性过程中反应温度、时间、成盐亲水物质量等因素对反应的影响。结果表明，在接枝反应中成盐亲水物质为单体质量分数的5.0％、反应温度80℃、反应时间2．5h为最佳接枝反应条件。通过研究和对比改性前后聚氨酯涂饰剂成膜后试样的吸水性、力学性能及透水汽性能，发现改性后试样的断裂伸长率最高可达1401％，透水汽速率可达454．2mg／10cm^2·24h。获得最佳性能涂饰剂时，胶原蛋白用量为异佛尔酮二异氰酸酯（IPDI）摩尔总量的15％～20％。

胶原蛋白的提取及其可食性膜的研究进展

胶原蛋白作为一种重要的动物蛋白资源,在食品工业中应用非常广泛。文章介绍胶原蛋白的结构组成、提取方法,阐述利用胶原蛋白制备可食性膜的工艺及其应用,并展望可食性胶原蛋白膜的发展方向。

胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ在糖尿病大鼠血管病变中的表达及中药的干预

[目的]对中药干预下的糖尿病大鼠动脉损伤模型的胶原蛋白的表达进行研究,为糖尿病大鼠动脉损伤纤维病变学说和中药干预糖尿病血管并发症的可行性提供实验学依据。[方法]雄性SD大鼠48只,按随机数字表法随机分为A-正常对照组,B-糖尿病对照组,C-中药治疗组,D-二甲双胍治疗组,其中B、C、D 3组为糖尿病模型组,观察各组大鼠股动脉中胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的含量。[结果]糖尿病模型组与正常对照组比较,胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ均明显升高;各治疗组治疗后与糖尿病对照组比较,胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达明显下降;中药治疗组与西药治疗组比较,胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达下降(P<0.05)。[结论]胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ在中、晚期糖尿病大鼠的大血管中显著增加,提示糖尿病大血管病变可能与胶原蛋白有关;中药组方加味桃核承气汤能有效降低致纤维化因子胶原蛋白在实验性糖尿病大血管病变中的表达,对糖尿病大血管病变有改善作用。

IV型胶原在肌性斜颈中的表达及意义

目的研究IV型胶原在先天性肌性斜颈胸锁乳突肌中的增生和表达,探讨肌性斜颈纤维化的发生机制。方法采用Masson三色胶原染色法观察胶原的增生情况,免疫组织化学染色法观察IV型胶原的表达情况。结果IV型胶原在病变组表达明显增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。对照组肌束间极少见IV型胶原纤维,病变组肌束间及肌细胞周围均可见大量的胶原纤维增生,肌细胞及肌束排列不规律,肌细胞有不同程度的萎缩。病变组中纤维型组IV型胶原较肌肉型组有更多的表达,两者比较有显著性差异(P<0.01),纤维型和肌肉型组与对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论先天性肌性斜颈胸锁乳突肌的纤维化程度与IV型胶原增生的量有关。

DNCP诱导面突外胚间充质细胞向成牙本质样细胞分化的浓度优化

目的探讨牙本质非胶原蛋白(DNCP)诱导大鼠面突外胚间充质细胞向成牙本质样细胞分化的最适浓度。方法取妊娠12.5d SD大鼠胎鼠第4代下颌突外胚间充质细胞,DNCP诱导浓度分别为10、50、100、200、500、1 000μg/mL,观察细胞形态变化,诱导6d后采用定量RT-PCR检测牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白1(DMP1)的表达。结果6d后除10μg/mL组和1000μg/mL组外,其他诱导组细胞出现极性改变,部分细胞出现平行排列趋势;细胞表达DSPP和DMP1,以200μg/mL组最强,500μg/mL组和200μg/mL组表达量相当,而1 000μg/mL组细胞死亡。结论在DNCP诱导面突外胚间充质细胞向成牙本质样细胞分化中过低浓度不利于成牙本质细胞的分化,而过高浓度则引起细胞死亡。200μg/mL是较为合适的有效诱导浓度。

来氟米特抑制结缔组织生长因子诱导的肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的研究

目的探讨来氟米特(LEF)对人肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法在体外培养的人肾间质成纤维细胞中,加入不同浓度来氟米特活性代谢产物A771726和重组人结缔组织生长因子(rhCT-GF),MTT法测定两者单独及同时干预下细胞增殖情况;ELISA法测定细胞合成I、IV型胶原的含量。结果经不同浓度的rhCTGF刺激,成纤维细胞增殖和细胞合呈I型、IV型胶原均成剂量依赖性增加(P<0.01);而来氟米特作用细胞后,细胞增殖及胶原合成均呈剂量依赖性减少(P<0.01);在来氟米特与结缔组织生长因子(CTGF)共同作用下,细胞的增殖和胶原的合成较单用同剂量的CTGF时减少(P<0.05)。结论rhCTGF能够促进人肾间质成纤维细胞的增殖及I、IV型胶原合成;来氟米特则抑制细胞的增殖及细胞合成I、IV型胶原;来氟米特对rhCTGF诱导的胶原合成增加有一定的拮抗作用。

青蒿琥酯对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶表达的影响

目的:研究青蒿琥酯对肝纤维化大鼠肝组织中基质金属蛋白酶(MMPs)及Ⅰ型胶原表达的影响,探讨青蒿琥酯对大鼠肝纤维化的治疗作用。方法:Wistar大鼠随机分为6组:正常组、模型对照组、青蒿琥酯低、中、高剂量组(3.2 mg/kg、9.6 mg/kg、28.8mg/kg)及马洛替酯阳性对照组(53.1 mg/kg),每组10只大鼠。牛血清白蛋白(BSA)免疫性大鼠肝纤维化模型制备成功后,各组按相应药物剂量分别开始治疗,正常组和模型组给予同体积蒸馏水,每日1次,连续2个月至实验结束。酶谱法测定肝组织MMP-2,MMP-9的表达;Western blotting检测肝组织Ⅰ型胶原与MMP-13的表达。结果:(1)肝组织Ⅰ型胶原的表达:与正常组比较,模型组大鼠肝组织Ⅰ型胶原含量增高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织Ⅰ型胶原含量均降低(P<0.05)。(2)肝组织基质金属蛋白酶的表达:与正常组比较,模型组大鼠肝组织MMP-2、MMP-9表达增高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织MMP-2、MMP-9表达均降低(P<0.01),MMP-13表达升高(P<0.01)。结论:青蒿琥酯可能通过降低肝组织MMP-2、MMP-9的表达,增加MMP-13的表达,从而发挥抗肝纤维化的作用。

基因重组大肠杆菌生产类人胶原蛋白补氮策略优化研究

优化重组大肠杆菌高密度发酵的调控工艺。利用重组大肠杆菌高密度发酵生产类人胶原蛋白,考察了连续流加和分阶段式两种不同补氮策略对细胞生长和类人胶原蛋白产量的影响。不同补氮方式显著影响类人胶原蛋白的产量。分阶段式补氮方式优于连续流加补氮方式,有利于细胞生长和类人胶原蛋白的表达,最终细胞浓度为76.01 g.L-1(DCW),类人胶原蛋白浓度为16.75 g.L-1,蛋白表达量为22.1%。

体外构建工程化心肌组织的实验研究

目的探索以胶原海绵为支架,新生大鼠原代心肌细胞为种子细胞,于体外构建工程化心肌组织。方法用胰酶消化法分离新生大鼠心肌细胞,经初步纯化,然后接种于长方形片状胶原海绵中,将此细胞/胶原复合物置于细胞培养箱中,培养25 d,采用常规苏木精-伊红(HE)染色、免疫组织化学染色和透射电子显微镜等方法评价该工程化心肌组织片的形态和功能。结果构建的工程化心肌组织片先是出现局部自发收缩,随时间延长,自发收缩区域增多、强度增大,整个心肌片出现同步收缩,此收缩活动可持续25 d。检测结果显示,工程化心肌组织内细胞间连接广泛存在,细胞多呈纵向分布,胞核呈长圆形;多数细胞胞浆内α-肌节肌动蛋白阳性;细胞间连接清晰可辨,细胞内的肌原纤维排列整齐,可见到肌小节结构和Z线。结论用新生大鼠原代心肌细胞作为种子细胞、胶原海绵为支架,于体外可构建组织形态与生理功能类似于成熟大鼠心肌组织的工程化心肌组织。

纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸材料复合自体骨髓基质细胞修复犬下颌骨节段性缺损的实验研究

目的观察多孔块状纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸材料(nHAC/PLA)作为支架与自体骨髓基质细胞(BMSCs)复合对大动物承力骨节段性缺损的修复能力,并探讨合适的术中固定方法,为临床应用提供实验依据。方法将多孔块状nHAC/PLA加工成3.0cm×2.0cm×1.0cm的长方体状。体外培养犬髂骨来源的BMSCs,经过BrdU标记及成骨诱导后,与nHAC/PLA复合,并植入犬下颌骨3.0cm长的节段性缺损处,经过6个月的饲养,通过影像学和组织形态学观察修复骨缺损的能力。并通过免疫组织化学的方法检测种子细胞的归宿。同时设自体髂骨移植组及单纯材料植入组作为对照。结果术后6个月,下颌骨缺损区被nHAC/PLA+BMSCs复合形成的组织工程骨完全修复,形态恢复良好,大量成熟的骨组织充满缺损区的全层,材料大部分被吸收。从免疫组织化学染色结果看,组织工程骨细胞来源于种子细胞BMSCs。用钛重建板和微型钛板联合固定或单纯用钛重建板固定都可行。结论nHAC/PLA作为支架材料与自体BMSCs复合形成的组织工程骨可以修复大动物承力骨较大的节段性缺损,并可直接用钛重建板对其进行固定。

肺染木尘对大鼠肺组织匀浆生化指标影响的实验研究

目的探索木尘对肺组织损伤的机制。方法以0、100、400、800 mg/kg木尘和博来霉素阳性对照通过气管内注入的方式对大鼠进行染尘,于染毒后7、15、30、60 d测定肺组织匀浆的内皮素-1、丙二醛、羟脯氨酸和胶原蛋白的含量。结果实验期间木尘染尘组大鼠羟脯氨酸和胶原蛋白升高不明显,第7天内皮素-1、丙二醛水平与对照组相比显著升高,并呈剂量-反应关系,第15天后与对照组相比差异不显著。结论肺染木尘可引起肺组织内脂质过氧化作用增强,造成结缔组织和上皮、内皮细胞的损伤,但不刺激肺成纤维细胞合成胶原蛋白,致肺纤维化作用不明显。

表面修饰对纳米晶胶原基骨细胞相容性的影响

目的:探索纤维蛋白(fibrin,FB)修饰的纳米晶胶原基骨(nanoHydroxyapatite/collagen,nHAC)支架材料上成骨诱导的骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)黏附、增殖及分化的情况。方法:实验分为两组:实验组,纤维蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FB-nHAC);对照组,单纯的纳米晶胶原基骨(nHAC)。将SD大鼠骨髓间充质干细胞定向诱导为成骨细胞,种植于支架材料上,体外复合培养。通过检测支架材料的细胞黏附率、不同时间点(3,7,10,14 d)支架材料中细胞数、碱性磷酸酶表达量以及扫描电镜观察细胞在支架材料上的生长状况,比较分析不同支架材料与细胞生物相容性差异。结果:大鼠MSCs经诱导培养14 d后,I型胶原免疫荧光染色为阳性;实验组支架材料的细胞黏附率显著高于对照组(P<0.05);且相同时间点实验组支架材料中的细胞数及碱性磷酸酶表达量也明显高于对照组(P<0.05);电镜观察发现两组材料上均有细胞生长,但实验组的细胞生长状况明显好于对照组。结论:表面修饰纤维蛋白后的nHAC支架材料具有更好的细胞黏附、增殖及促成骨分化能力。

Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型胶原对磷酸钙成骨矿化体系的作用

该文以磷酸钙盐的生物矿化作用为着眼点，通过模拟生物体内生物矿化的实际环境，测定不同时间内Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ种不同类型胶原对磷酸钙矿化作用的影响，由以上实验可得出两个结论：1．矿化胶原的最佳原材料应为Ⅲ或I型胶原；2．胶原移植物已失去了成骨矿化活性，可以安全地移植于皮下缺损组织。