Ki67 C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的Ki67为细胞增殖的一个重要生物学指标。本文旨在探讨Ki67和C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理因素的相关性。方法用免疫组化方法检测151例乳腺癌组织中Ki67和C-erbB-2的表达,并与临床病理因素进行相关性分析。结果Ki67在乳腺癌组织中的阳性率为74.8%(113/151)。Ki67表达与乳腺癌临床分期有关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移状况无明显关系(P>0.05);Ki67表达与C-erbB-2表达有关(P<0.05)。结论Ki67阳性表达可作为评价乳腺癌发生、发展的生物学指标,联合C-erbB-2检测有助于乳腺癌预后的判断。

抗p185erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器的制备与验证

目的:构建抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体并制备和验证抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器模型。方法:利用PCR法扩增出抗人p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的重链基因H和轻链基因L,然后分别将嵌合抗体重链基因H和嵌合抗体轻链基因L连接到乳腺特异性表达质粒pBC1,从而构建抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体pBC1-H和pBC1-L。分别将抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26乳腺特异表达载体pBC1-H和pBC1-L线性化,然后使用原核显微共注射法获得8只转基因FVB小鼠,通过鼠尾直接PCR鉴定其转基因阳性。通过RT-PCR、荧光定量PCR鉴定转基因小鼠乳腺组织中抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的mRNA表达。使用小鼠乳汁采集器收集其乳汁并通过Western blot和夹心ELISA等实验鉴定抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26是否获得表达。结果:经测序验证,抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的嵌合重链基因H和嵌合轻链基因L分别与乳腺特异表达质粒pBC1正确正向连接。鼠尾直接PCR结果显示所获8只转基因FVB小鼠均为转基因双阳性小鼠,且抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的重链基因H和轻链基因L在它们的后代中稳定遗传,它们的后代中转基因小鼠双阳性率约为30%;RT-PCR和荧光定量PCR的结果显示,转基因双阳性小鼠及其双阳性后代的乳腺组织中存在抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的mRNA表达;Western blot和ELISA等实验结果显示,转基因双阳性小鼠乳汁中存在抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的蛋白质表达,而且抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26与羊抗人κ链抗体和羊抗人IgG Fc-HRP抗体均能特异性结合。结论:成功构建抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体pBC1-H和pBC1-L和制备了抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器模型,为今后抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因牛乳腺生物反应器的研究奠定了理论和技术基础。