谷精草总黄酮提取及对羟自由基清除作用研究

目的探讨谷精草总黄酮的提取、鉴别及对羟自由基的清除作用。方法利用超声波乙醇浸提法提取谷精草中的黄酮类化合物,采用化学方法对提取物进行定性鉴别,通过分光光度法测定总黄酮含量,并且考察黄酮提取液对羟自由基的清除作用。结果谷精草中总黄酮含量为5.09%,回收率为102.1%。结论该方法简单可靠,能够有效提取谷精草黄酮,而且黄酮提取液对羟自由基有一定的清除作用。该实验结果为进一步开发和利用谷精草提供了理论依据。

谷精草黄酮类化合物的提取工艺研究

以乙醇为浸提溶剂,从谷精草中提取黄酮类化合物,通过单因素实验和正交实验,考察乙醇浓度、料液比、浸提时间、浸提温度对谷精草黄酮提取率的影响。结果表明,各因素的影响程度依次为:乙醇浓度>浸提时间>浸提温度>料液比;提取的最佳工艺条件为:60%乙醇,料液比1:25,提取时间3h,浸提温度70℃,在此条件下,谷精草黄酮提取率为4.95%。

超声波法提取谷精草中总黄酮的条件优化

以提取的总黄酮含量为考察指标,采用UV分光光度法测定其含量,通过正交试验考察乙醇浓度,超声时间及超声温度对提取率的影响,以得到最佳的提取条件。结果表明:各因素的影响程度为乙醇浓度>超声时间>超声温度,其中乙醇浓度和超声时间对提取率的影响最为显著,超声温度的影响不显著;最佳提取条件为:乙醇浓度为60%,超声温度为60℃,超声时间25 min;平均提取率为25.0 mg/g,RSD为0.4%。

谷精草科药学研究综述

目的:针对谷精草科类植物展开研究,了解这类植物的特点,旨在将其更好的应用于临床中。方法:研究谷精草科中包含的几大类别,方便人们辨识并了解其主治功能。针对其药理与临床应用展开研究,引用历代医药家对谷精草科类药物的论述制定有针对性的中药方案。结果:谷精草能够治疗多种病症,自古以来在临床治疗中占有重要地位。结论:谷精草科药物在选取时需注意鉴别,使用时应有针对性的配置药方,方能达到有效治疗效用。

《本草纲目》谷精草的原植物考证

为研究《本草纲目》中谷精草的原植物来源 ,通过古今文献考证和植物学比较研究 ,鉴别《本草纲目》谷精草的植物种。经考证发现《本草纲目》谷精草来源为谷精草科Eriocaulaceae植物赛谷精草EriocaulonsieboldianumS .etZ .exSteud .的带梗花序。提示《本草纲目》谷精草的原植物为赛谷精草 ,而非《中国药典》2 0 0 0版收载之谷精草EriocaulonbuergerianumKoern .。

谷精草抑制α-葡萄糖苷酶活性成分研究

研究谷精草中α-葡萄糖苷酶活性抑制成分。采用色谱技术分离鉴定了26个化合物,对所有分离得到的化合物都进行了抗α-葡萄糖苷酶活性的体外筛选试验。其中化合物决明内酯-9-O-β-D-葡萄糖苷(3)、万寿菊素(7)、1,3,6,8-四羟基-2-甲氧基口山酮(13)、万寿菊素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(19)显示出显著的抑制活性,IC50分别为106.7、8.73、56.6、80.4μM。

谷精草总黄酮抑制亚硝化反应活性研究

目的:观察谷精草总黄酮抑制亚硝化反应活性。方法:采用超声提取法对谷精草总黄酮进行提取,通过分光光度法测定谷精草总黄酮抑制亚硝化反应活性。结果:当谷精草总黄酮浓度达到16.5μg/mL时,对亚硝胺合成的阻断率为80.9%,当谷精草总黄酮浓度达到13.5μg/mL时,对亚硝酸钠清除率最大,达到73.2%。结论:谷精草总黄酮具有较强的抑制亚硝化反应活性。

高效液相色谱-四通道紫外可见检测法测定不同产地谷精草中槲皮素含量

[目的]建立谷精草中槲皮素含量的测定方法,测定8个产地谷精草中槲皮素的含量。[方法]高效液相色谱-四通道紫外可见检测法,C18为色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为无水甲醇-浓度0.6%磷酸(52∶48,V/V)。通过保留时间结合四波长紫外光谱定性,定性检测波长为254、360、365和370 nm。选用灵敏度最高的波长254 nm定量。[结果]槲皮素在5～30μg/ml范围内线性关系良好(R=0.999 8),平均回收率99.56%,RSD为2.30%;不同产地谷精草中槲皮素含量范围为29.5～92.5μg/g。[结论]该方法测定结果可靠,稳定易行,重复性好,可用于谷精草中槲皮素的含量测定;不同产地谷精草中槲皮素含量差异较大。

谷精草有效成分分析及体外抗菌活性测定

采用试管法和圆形滤纸层析法分析鉴定了谷精草的化学成分,结果表明:谷精草含有生物碱、酚性成分、有机酸、黄酮及其甙类、挥发油、植物甾醇、鞣质等化学成分。用纸片法和试管法对谷精草水提取液进行了体外抗菌作用试验,结果表明:谷精草水提取液对金色葡萄球菌、链球菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌等兽医临床常见病原微生物都有较强的抗菌作用,抑菌圈直径分别为12.16±0.33mm,15.36±0.29mm,13.57±0.61mm,8.63±0.26mm,9.88±0.72mm;谷精草水提取液对金色葡萄球菌、链球菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.125g/ml、0.063g/ml、0.125g/ml、0.5g/ml、0.25g/m;最低杀菌浓度(MBC)分别为0.25g/ml、0.125g/ml、0.25g/ml、1g/ml、1g/ml。

谷精草总黄酮纤维素酶提取工艺的研究

目的:研究纤维素酶法提取谷精草中总黄酮的最佳工艺。方法:采用紫外分光光度法分别考察酶用量、提取时间、料液比、提取温度对谷精草总黄酮提取率的影响,并在此基础上设计L9(34)正交试验,优选最佳提取工艺。结果:最佳条件是酶用量0.03 g,提取时间2.5 h,料液比1∶40,提取温度55℃,采用最佳工艺,总黄酮提取率可达0.879%。结论:该方法可以用于谷精草总黄酮的提取。

微波萃取技术提取谷精草中总黄酮的工艺优化

采用微波萃取技术对谷精草中总黄酮类化合物进行提取,并利用紫外分光光度法测定总黄酮的含量,将测得的总黄酮含量作为比较分析的标准。本实验分析了时间、料液比、温度、乙醇浓度对总黄酮提取率的影响,根据单因素实验的分析结果,以L9(34)进行正交实验,以期得到一个最佳的微波萃取工艺。结果表明,各因素作用程度为:料液比>乙醇浓度>温度>时间,其中,料液比对实验结果的影响最为突出,乙醇浓度和温度的影响略轻,时间的影响最小;正交实验结果表明提取时间70min,温度70℃,乙醇浓度40%,料液比1:15为最佳提取工艺。

谷精草多糖的提取工艺及清除DPPH自由基活性的研究

目的:研究谷精草多糖最佳提取工艺及其清除DPPH自由基作用。方法:采用超声辅助纤维素酶法并设计L9(34)正交表优选谷精草多糖的提取工艺,对谷精草多糖进行清除DPPH自由基活性测试。结果:优选的工艺条件为纤维素酶浓度3 mg/m L,时间40 min,温度60℃,超声功率400 W,在此工艺条件下,谷精草多糖的提取率可达4.16%。当谷精草多糖浓度为8.0 mg/m L时,对DPPH自由基的清除率可达77.6%,谷精草多糖对DPPH自由基的EC50为0.119 mg/m L。结论:该工艺可用于谷精草多糖的提取,谷精草多糖具有较强的清除DPPH自由基的能力。

谷精草提取物对6-OHDA所致PC12细胞及斑马鱼神经损伤模型的保护作用

目的探讨谷精草乙醇提取物(Eriocaulon buergerianum extract,EBE)对6-羟基多巴胺(6-hydroxy-dopamine,6-OHDA)在PC12细胞和斑马鱼上引起的神经损伤的保护作用及其机制。方法采用4-甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)和乳酸脱氢酶释放法(LDH法)检测PC12细胞的活力;Hoechst 33324荧光染色观察细胞核形态的改变分析细胞凋亡;DAF-FM diacetate荧光染色检测细胞内一氧化氮(NO)的含量;采用免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS蛋白)的表达水平。免疫染色方法观察斑马鱼脑部多巴胺神经元的变化。结果 EBE能够剂量依赖性的提高6-OHDA损伤的PC12细胞的存活率,减少6-OHDA引起的PC12细胞凋亡。免疫染色的结果表明EBE可以抑制6-OHDA在斑马鱼上所引起的多巴胺神经元的减少。作用机理研究证明EBE能够降低6-OHDA刺激的PC12细胞内NO含量增加。免疫印记杂交的结果显示EBE能够降低iNOS的表达。结论 EBE对6-OHDA诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,能减少6-OHDA引起的细胞凋亡,并且可以抑制6-OHDA在斑马鱼上引起的多巴胺神经元减少,其作用机制可能与降低NO的产生和iNOS的表达量有关。

谷精草与华南谷精草的微性状鉴别

目的:鉴别谷精草及其混伪品华南谷精草。方法:运用微性状鉴别方法对谷精草和华南谷精草进行鉴别。结果:从整体外观性状到细微结构能更准确、快速地对谷精草与华南谷精草进行鉴别。结论:应用微性状鉴别方法,可以对谷精草及其伪品华南谷精草进行更好的鉴别。

ICP-MS法测定谷精草中重金属及有害元素残留

目的:建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定谷精草中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)重金属及有害元素残留量的检测方法。方法:谷精草样品经微波消解后,以锗(72Ge)、铟(115In)、铋(209Bi)为内标,采用ICP-MS法测定上述5种元素的残留量。结果:ICP-MS法测定的谷精草样品中的Pb、As、Cu、Hg 4种重金属及有害元素的残留量均低于植物类中药材中重金属及有害元素的常规限量。Cd残留量在0.43~1.10 mg·kg^(-1),平均值为0.78 mg·kg^(-1),其中有5批谷精草Cd的残留量超过1.0 mg·kg^(-1),超出标准规定要求,存在较为严重的安全风险。各元素的标准曲线的相关系数0.9996~1.0000,精密度RSD为0.9%~2.2%,重现性RSD为1.1%~2.3%,稳定性RSD为1.0%~2.4%,准确度良好。结论:该方法操作准确可靠、干扰小、灵敏度高、结果稳定,适合谷精草中重金属及有害元素残留量的测定。

谷精草总黄酮颗粒剂提取及制备工艺

采用正交试验结合综合评分的方法优选谷精草总黄酮颗粒剂的最佳提取工艺和最佳制备工艺.结果表明,最佳的提取工艺为:乙醇体积分数40%、提取时间2 h、料液比1∶40.颗粒剂的最佳制备工艺为:乳糖∶甘露醇=2∶1,浸膏粉∶混合辅料=1∶1,润湿剂(乙醇)体积分数70%.

谷精草提取物中多酚含量的测定

以没食子酸为标准品。采用福林-酚(Folin-Ciocaheu)法测定多酚含量。结果表明,没食子酸在浓度为1-6/μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.9999).谷精草提取物中多酚含量为5.58%,平均回收率为99.7%,相对标准偏差(RSD)为0.74%。该方法简便、灵敏、准确,可用于谷精草提取物中多酚含量的测定。

谷精草中1个新的黄酮苷类化合物

采用大孔吸附树脂、反相硅胶、葡聚糖凝胶及微孔树脂等多种色谱技术,从谷精草水提取中分离得到10个化合物。通过NMR、ESI-MS、HR-ESI-MS、UV、IR等波谱技术并结合化学方法对其进行了结构鉴定,分别为6-methoxyquercetin-3-O-(2′′′-vanilloyl)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(1)、丁香脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(2)、芦丁(3)、1-O-feruloylglycerol(4)、邻苯二酚(5)、吐叶醇(6)、β-D-(6-O-trans-feruloyl)fructofuranosyl-α-D-O-glucopyranosied(7)、二氢阿魏酸(8)、鸟嘌呤核苷(9)和槲皮素-3-O-β-D-龙胆二糖苷(10),化合物1为新化合物,化合物2、4~10为首次从谷精草属植物中分离得到,化合物3为首次从该植物中分离得到。分子对接结果显示化合物1具有潜在的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)转换酶抑制活性。体外抗炎活性实验证实,化合物1在1、10和100μmol·L能显著抑制脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞中TNF-α的升高,具有较好的体外抗炎活性。

谷精草的生药学鉴别

目的研究完善中国药典收载的谷精草药材的鉴别方法。方法通过实体镜观察谷精草表面形态特征,并借助透射显微镜观察其横切及粉末显微特征。结果谷精草的雄花、雌花外观特征显著,花茎横切面具特殊的气室等显微鉴别特征。结论本方法能够有效准确地鉴定谷精草。

顶空固相微萃取结合气-质联用分析谷精草及其伪品的挥发性成分

目的:比较谷精草及其伪品赛谷精草挥发性成分的异同点,为谷精草的真伪鉴别和临床应用提供科学依据。方法:采用顶空固相微萃取法(HS-SPME)结合气-质联用技术(GC-MS)对谷精草和赛谷精草的挥发性成分进行分析鉴定,用面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:2种药材共检测到63个峰,鉴定出43种成分。从谷精草中检测到30个峰,鉴定出25个成分,占总挥发性成分的79.02%;主要物质有1-石竹烯、右旋大根香叶烯、薄荷脑、月桂酸乙酯、癸酸乙酯、软脂酸乙酯、茴香脑、壬酸乙酯等成分;从赛谷精草中检测到33个峰,鉴定出18个成分,占总挥发性成分的63.94%;主要物质有1-石竹烯、植酮、薄荷脑、壬醛、桉树脑、α-石竹烯、香叶基丙酮等其他成分。结论:谷精草和赛谷精草在挥发性成分上存在一定差异,两者不能混用。