独活挥发油成分的GC-MS分析

目的:分析我国中药材GAP基地之一所种植独活挥发油的化学成分,为其质量评价提供科学依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取独活挥发油,用GC毛细管柱进行分析,归一化法测定其相对含量,并用GC-MS法鉴定化学成分。结果:检出229个色谱峰,鉴定出88个化合物,占挥发油总量的78.23%。结论:独活挥发油的单萜类化合物及其衍生物中,3-蒈烯(8.89%)、间-聚伞花素(4.99%)、β-水芹烯(8.35%)等是主要成分,占总挥发油量的22.23%;倍半萜类化合物及其衍生物中,桉叶烷-4(14),11-二烯(4.36%)、α-芹子烯(1.36%)、喇叭醇(1.14%)、α-甜没药萜醇(6.03%)和1,8-二甲基-4-异丙基-螺环[4.5]+-8-烯-7-酮(4.37%)等是主要成分,占总挥发油量的17.26%。

乙醇提取新鲜当归油的抗炎镇痛作用

目的 :研究当归油的镇痛、抗炎作用。方法 :应用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、蛋清致大鼠足跖肿胀及大鼠棉球肉芽肿增生4种动物模型进行抗炎药效学实验 ;采用醋酸致小鼠扭体反应 ,进行镇痛实验。结果 :当归油能显著抑制上述各种动物模型的炎症反应及醋酸引起的小鼠扭体反应。结论 :当归油对急、慢性炎症均有明显抑制作用 ,且有一定的镇痛效果。

当归精油对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响

目的 :观察当归精油对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响。方法 :制作离体子宫平滑肌肌条 ,考察催产素、高钾去极化溶液存在条件下当归精油对子宫肌条反应的影响。结果 :当归精油对催产素及高K+去极化液中Ca2 +所致的离体子宫平滑肌收缩均呈剂量依赖性抑制 ;使CaCl2 累积量 效曲线非平行性右移 ,最大效应下降 ,呈非竞争性抑制 ;且对子宫平滑肌依细胞内、外Ca2 +两种收缩成分均呈抑制作用。结论 :当归精油对大鼠离体子宫平滑肌条的抑制作用 ,可能与其拮抗Ca2 +有关。

当归挥发油对实验性哮喘大鼠肺功能及其组织病理学的影响

目的观察当归挥发油对实验性哮喘大鼠肺功能及其组织病理学改变的影响。方法采用注射卵清白蛋白与氢氧化铝致敏、雾化吸入卵清白蛋白激发哮喘模型,每次激发前当归挥发油灌胃,并测定大鼠肺功能、观测肺组织病理变化以及血清中IgE的水平,研究当归挥发油对哮喘大鼠的保护作用。结果当归挥发油能促进大鼠体质量的增加,改善肺功能,降低IgE的水平,抑制哮喘模型大鼠肺组织的炎症反应。结论当归挥发油具有一定的平喘、治疗支气管哮喘的作用。

白芷挥发油镇痛、镇静作用和身体依赖性研究

目的观察白芷挥发油(EssentialoilofRadixAngelicaedahuricae,EOAD)的镇痛、镇静作用和身体依赖性。方法采用扭体法、热板法、辐射热刺激法、大鼠甩尾法观察EOAD的镇痛作用;用小鼠跳跃反应试验、小鼠竖尾反应实验观察EOAD的身体依赖性,并用热板法考察其耐受性;采用程控自主活动箱观察EOAD对小鼠自主活动的影响。结果EOAD对物理、化学等伤害性刺激的镇痛作用确切;小鼠跳跃反应试验表明,吗啡组小鼠出现显著的跳跃反应,而EOAD组则无;小鼠竖尾反应试验表明EOAD组小鼠未出现竖尾反应;EOAD对小鼠的自主活动具有显著的抑制效应。结论EOAD的镇痛、镇静作用明确且对小鼠无身体依赖性作用。

甘肃产独活及牛尾独活挥发油成分的气质联用分析

目的 分析甘肃产独活AngelicapubescensMaxim.f.biserr ataShanetYuan及牛尾独活HeraeleummoellendorffiiHance的挥发油成分。方法 采用GC MS方法分离和鉴定挥发油成分,并用面积归一化法进行定量分析。结果 从独活挥发油中分离出 55个化合物,占挥发油总量的 94. 196%;从牛尾独活挥发油中分离鉴定鉴定出 47个化合物,占挥发油总量的81. 657%。结论 独活挥发油主要成分为α 蒎烯(20. 295% )、1 甲基 4 异丙基苯 ( 15. 568% )、3 甲基 壬烷 ( 5. 904% )等;牛尾独活挥发油主要成分为β 蒎烯(24. 321% )、α 蒎烯(8. 167% )、1 甲基 4 异丙烯基 环己烯(8. 061% )等。关键词:独活;牛尾独活;挥发油;气

当归挥发油分子蒸馏馏分GC-MS分析及抗氧化研究

目的研究当归挥发油分子蒸馏后各馏分的化学组成及抗氧化能力。方法用分子蒸馏设备对当归挥发油进行分馏,采用气相色谱-质谱法(GC-MS)表征各馏分的化学组成,采用主成分分析法(PCA)分析其化学组成的差异,用2,2-二苯基-1-苦基苯肼(DPPH)自由基清除能力评价各馏分的抗氧化能力。结果当归挥发油经分子蒸馏后得到6个馏分。GC-MS结果显示藁本内酯是各馏分的主要成分。PCA结果显示各馏分除了在Z-藁本内酯上的差异外,馏分6中的油酸和馏分5中的Z-氧代环十七碳-8-烯-2-酮与其他馏分有较大差异。抗氧化能力测定结果显示各馏分都有抗氧化能力但有差异,而且对馏分中藁本内酯的含量无依赖性,馏分6和馏分5的抗氧化能力较强,可能与其所含的特异性成分有关。结论本研究可为当归和其他中药挥发油的进一步开发利用提供参考。

白芷挥发油GC指纹图谱研究

目的:建立白芷挥发油成分的 GC 指纹图谱。方法:SE-30毛细管气相色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm),FID 检测器,程序升温为70℃(5 min),以2℃·min^(-1)的速度线性升温至220℃(5 min)。结果:依据21批药材的指纹图谱数据进行聚类分析,将样品分为4类,选定其中10批优质样品建立共有模式。相似度分析结果表明,第Ⅰ类和第Ⅱ类样品为优质药材,第Ⅲ类样品质量一般,第Ⅳ类样品为伪品。结论:本测定方法为白芷药材的质量评价提供了科学依据。

白芷总挥发油对疼痛模型大鼠的神经递质的影响

目的 :探讨白芷总挥发油 (EssentialoilofRadixAngelicaedahuricae ,EOAD)对疼痛模型大鼠神经递质的影响。 方法 :采用多种工具药探讨EOAD的镇痛作用与中枢神经递质的关系 ,并用化学荧光法测定单胺类神经递质含量。结果 :EOAD与烯丙吗啡、氟哌啶醇有协同作用 ,其镇痛作用能被纳洛酮和利血平对抗 ;EOAD在外周能显著降低血中单胺类神经递质的含量 ,在中枢能显著升高多巴胺、5 羟色胺含量 ,降低去甲肾上腺素和 5 羟吲哚乙酸含量。结论 :EOAD调整体内单胺类神经递质含量是其镇痛的机理之一。

白芷总挥发油对疼痛模型大鼠的β-内啡肽、促肾上腺皮质激素、一氧化氮及前阿黑皮素的影响

目的 :探讨白芷总挥发油 (essentialoilofRadixAngelicaeDahuricae ,EOAD)对甲醛所致的伤害性疼痛模型大鼠的β 内啡肽、促肾上腺皮质激素 (ACTH)、一氧化氮 (NO)及前阿黑皮素 (Proopiomelanocortin ,POMC)的影响。方法 :分别采用放射免疫法测定 β 内啡肽、ACTH ,化学法测定NO的含量 ;并用原位杂交方法研究EOAD对前阿黑皮素信使核糖核酸 (POMCmRNA)基因表达的影响。结果 :EOAD能显著升高甲醛所致的伤害性疼痛模型大鼠下丘脑的 β 内啡肽、NO含量 ;使下丘脑、脑干POMCmRNA表达阳性细胞数大幅度增加 ;而对血中的ACTH没有影响。结论 :EOAD可能通过增加中枢POMCmRNA表达阳性细胞数和内源性镇痛物质含量 ,激活内源性镇痛机制而镇痛 ,其作用部位可能在中枢。

基于PLSR分析当归挥发油分子蒸馏馏分中化学成分与抗炎作用的相关性

目的研究当归挥发油分子蒸馏馏分的化学成分与其抗炎作用的相关性。方法用分子蒸馏设备对当归挥发油进行分馏,气质联用色谱(gas chromatography-mass spectroscopy,GC-MS)表征所得馏分的化学组成;用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7细胞作为炎症模型,评价各馏分的细胞毒作用和抗炎作用;用偏最小二乘法回归分析(partial least squares regression,PLSR)分析馏分中化学成分与抗炎作用的相关性。结果当归挥发油经分子蒸馏后得到6个馏分,且各馏分均能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞产生一氧化氮,表现出抗炎作用;PLSR结果显示建立的回归模型合理,馏分中的十九烷、2,2-二甲基-1-苯基-1-丙醇、Z-藁本内酯、E-藁本内酯、十六烷、阿魏酸、十三酸、亚油酸、油酸、5,8,11-十七碳三炔酸甲酯与抗炎作用呈正相关。结论本研究为当归及其他中药挥发油的进一步开发利用及中药挥发油的质量控制提供了实验数据。

当归精油对脓毒症小鼠的治疗作用

目的:观察当归精油对脓毒症小鼠的治疗作用。方法:i.v.给予细菌脂多糖复制小鼠脓毒症模型,i.v.给予不同剂量的当归精油,记录小鼠7 d生存率,ELISA法测定血清中细胞因子TNF-α和IL-6含量。结果:在100 mg/kg剂量下,当归精油可提高内毒素(25 mg/kg)攻击小鼠的生存率(P<0.01);在内毒素(25 mg/kg)攻击前、后2 h内给药能提高小鼠生存率,提前1 h预防性给药生存率最高(P<0.01);25～100 mg/kg当归精油能对抗0.125 mg/kg内毒素引起的TNF-α、IL-6水平增高,降低小鼠血清TNF-α、IL-6水平(P<0.05或P<0.01)。结论:当归精油能拮抗内毒素引起的炎症反应,对脓毒症有一定的治疗作用。

白芷总香豆素联合白芷挥发油对大鼠偏头痛的预防作用及其机制

目的:观察白芷总香豆素联合白芷挥发油对硝酸甘油诱导大鼠偏头痛的预防作用,并探讨其作用机制。方法:56只Wistar大鼠随机分为正常对照组(生理盐水0.1 mL·10g^(-1)),偏头痛模型组(生理盐水0.1mL·10g^(-1)),白芷香豆素组(100mg·kg^(-1)),白芷挥发油组(100 mg·kg^(-1)),低(25 mg·kg^(-1))、中(50mg·kg^(-1))和高剂量(100mg·kg^(-1))白芷总香豆素和挥发油组合物组(组合物组);每组8只。各组大鼠连续灌胃给药7d,皮下注射硝酸甘油(10mg·kg^(-1))诱导大鼠偏头痛模型。观察各组大鼠行为表现,检测各组大鼠血清及脑组织中一氧化氮(NO)、血浆中降钙素基因相关肽(CGRP)和内皮素(ET)水平。结果:与正常对照组比较,偏头痛模型组大鼠甩头、前肢挠头和后腿拍脸次数增加(P<0.05或P<0.01),血清及脑组织中NO水平、血浆中CGRP和ET水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。与偏头痛模型组比较,白芷总香豆素、白芷挥发油、各剂量组合物组大鼠甩头、前肢挠头和后腿拍脸次数减少(P<0.05或P<0.01),血清和脑组织中NO水平降低(P<0.05或P<0.01)。与偏头痛模型组比较,白芷挥发油和中、高剂量组合物组大鼠血浆中CGRP和ET水平降低(P<0.05)。结论:白芷2种活性成分总香豆素和挥发油组合物对硝酸甘油诱导的大鼠偏头痛具有一定的预防作用,且其作用机制可能与调节血管活性物质水平和功能有关联。

独活挥发油成分的快速GC-MS分析

采用气流吹扫微注射器萃取法(GP-MSE)和水蒸气蒸馏法(SD)萃取独活中的挥发油,利用气相色谱-质谱联用技术对挥发油化学成分进行分离、检测和定性分析,并对两种萃取方法进行了比较.结果显示:气流吹扫微注射器萃取法获得106种成分,已定性的有78种,占总组分含量的91.42%,其中主要成分为含氧杂环化合物(63.58%);水蒸气蒸馏法获得59种成分,已定性有42种,占总组分含量的86.99%,其中主要成分为脂肪族化合物(56.90%).与水蒸气蒸馏法对比表明,气流吹扫微注射器萃取技术具有省时、省力、省溶剂,所需样品量少,萃取效率高且重现性好等优点,可以广泛应用于植物挥发油成分的快速分析.

白芷挥发油镇痛、镇静作用实验研究

目的观察白芷挥发油镇痛、镇静作用。方法选择雌雄小鼠各半,随机分成对照组,吗啡组,白芷香豆素低剂量组(0.05 mL/kg)、中剂量组(0.1 mL/kg)、高剂量组(0.2mL/kg),白芷挥发油低剂量组(0.05 mL/kg)、中剂量组(0.1 mL/kg)、高剂量组(0.2 mL/kg),采用热板法、辐射热刺激法、甩尾法、扭体法观察白芷挥发油的镇痛、镇静作用。结果白芷挥发油各组起效时间更快,作用时间更长,扭体次数更少,且中剂量组(0.1 mL/kg)镇痛、镇静效果明显好于低剂量组与高剂量组。结论白芷挥发油镇痛、镇静作用明显,作用机制有待更深入的研究。

基于全二维气相色谱-四极杆飞行时间质谱高通量检测独活挥发油化学成分

利用全二维气相色谱-四极杆飞行时间质谱(GC×GC-QTOF MS)建立了一种适用于独活挥发油化学成分的高通量检测方法,样品经水蒸气蒸馏提取后,直接采用全二维气相色谱进行分离,并根据谱库匹配、保留指数及精确质量数进行定性确认。结果表明,共分离鉴定了独活挥发油中207种化学成分,其中正向、反向匹配因子大于800的化合物占90%以上,分子离子峰的精确质量偏差均小于3 ppm,且80%以上物质的保留指数偏差在20以内。同时,通过半定量分析发现酯类、醇类、酚类、碳氢化合物是独活挥发油中最丰富的化学成分。研究结果对于挖掘独活挥发油的物质基础和药用价值具有重要意义。

独活挥发油低共熔溶剂辅助微波水蒸气蒸馏法提取及质量标志物(Q-Marker)研究

目的建立独活Angelicae Pubescentis Radix挥发油的高效提取方法,并预测其质量标志物(quality markers,QMarker)。方法采用水蒸气蒸馏法(steam distillation,SD)、微波辅助水蒸气蒸馏法(microwave assisted steam distillation,MASD)和低共熔溶剂(deep eutectic solvents,DESs)辅助微波水蒸气蒸馏法(DESs assisted microwave steam distillation,DES-A-MSD)提取独活挥发油,并通过网络药理学和分子对接分析预测独活挥发油的Q-Marker。结果通过对不同体系DESs和提取方法的比较,发现氯化胆碱与乳酸物质的量比为1∶2的DESs体系更有利于提取独活挥发油。通过对SD法和MASD法的比较,发现DES-A-MSD法的挥发油得率最高,约为SD法的2倍。采用单因素法对其提取条件进行优化,得到最佳提取条件为氯化胆碱与乳酸物质的量比1∶2,微波功率500 W,含水量10%。采用气相色谱-质谱法对其挥发油的化学成分进行分析,并将β-瑟林烯、α-蛇床烯、红没药醇、蛇床子素和2-羟基环十五酮5种主要成分作为Q-Marker候选物进行网络药理学分析。搭建了组分-靶点网络、蛋白-蛋白相互作用网络、组分-靶点-通路网络和靶点组织分布网络,从而预测挥发油的Q-Marker可能是红没药醇和α-蛇床烯。经过分子对接分析,从理论上验证了预测的Q-Marker的生物活性。结论建立的DES-A-MSD法能够提高独活挥发油的得率,预测的Q-Marker能够用于独活挥发油的质量评价。

基于“药辅合一”理念的当归精油纳米乳递药系统的构建、表征及评价

目的构建当归精油纳米乳(Angelica Sinensis Radix essential oil-loaded nanoemulsion,AEO-NE)递药系统并对其进行表征及稳定性、毛囊靶向、毛发生长促进作用评价。方法分别应用伪三元相图法和星点设计-响应面法(central composite experiment design-response surface method,CCD-RSM)对纳米乳处方进行筛选和优化。对纳米乳乳剂类型、粒径、ζ电位、多分散指数(polydispersity index,PDI)、微观形态、黏度、pH值进行表征。以粒径、PDI、外观变化及Z-藁本内酯含量为指标,评价最优处方纳米乳离心稳定性、放置稳定性以及稀释稳定性。通过在体给药荧光标记的AEO-NE于小鼠背部皮肤研究制剂毛囊靶向能力。应用C57BL/6小鼠研究AEO-NE体内促进毛发生长的作用。结果AEO-NE最优处方为AEO-辛基酚聚氧乙烯醚10(OP-10)-无水乙醇-水(2.25∶0.75∶1∶96);按最优处方所制AEO-NE外观澄清、透明、微泛蓝光,乳剂类型为O/W型,平均粒径为(15.95±0.33)nm,PDI为0.11±0.02,ζ电位为(-0.14±0.10)m V,pH值为5.89±0.16,黏度为(1.57±0.08)m Pa·s,透射电镜结果表明AEO-NE乳滴呈球形,外观圆整,大小在20 nm内。AEO-NE离心稳定性、稀释稳定性良好,在4℃条件下密封避光放置稳定性良好,粒径及Z-藁本内酯含量无显著变化。AEO-NE局部皮肤给药24 h内均表现出毛囊靶向性,具有促进毛发生长的作用。结论基于“药辅合一”理念,成功构建了以AEO为唯一油相的AEONE,其宏观及微观形态、相关理化性质符合纳米乳制剂要求,稳定性良好,在靶向促进毛发生长方面具有一定潜力。

LC-MS结合网络药理学探讨“片姜黄-当归”挥发油防治膝骨关节炎的作用机制

目的提取“片姜黄-当归”药对挥发油,使用液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)对提取的挥发油进行化学成分定性分析,并运用网络药理学探讨药对挥发油防治膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用机制。方法采用水蒸气蒸馏法提取“片姜黄-当归”药对挥发油,并使用LC-MS对挥发油成分进行分析。借助Pubchem、Swiss Target Prediction、GeneCards、DAVID等数据库预测有效成分防治KOA的作用靶点及通路,对核心基因进行基因本体(Geneontology,GO)分析与京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,并使用Cytoscape软件构建“活性成分-疾病靶点”可视化网络图。运用AutoDock及Pymol对度值靠前的靶点与活性成分进行分子对接验证。结果“片姜黄-当归”药对挥发油中共鉴定出59种化合物,主要成分为莪术酮、异姜黄醇、藁本内酯等;通过网络药理学筛选出挥发油作用于KOA的28个潜在靶点,包括CTSK、PTGS1、PTGS2和ESR1等关键靶点;KEGG富集分析预测“片姜黄-当归”药对挥发油主要通过肿瘤坏死因子信号通路、破骨细胞分化、白介素17信号通路、松弛素信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路来发挥治疗KOA的作用。分子对接结果显示筛选的活性成分与其对应靶蛋白均具有较好的结合活性。结论使用LC-MS结合网络药理学的方法初步探明了“片姜黄-当归”药对挥发油中的主要有效成分及其干预KOA的潜在靶点与作用机制,为“片姜黄-当归”后续的深入研究提供思路。

运用GC-MS结合PCA技术对川白芷与杭白芷挥发油成分的比较分析

目的:运用GC-MS结合主成分分析(PCA)技术对川白芷与杭白芷挥发油成分进行比较分析。方法:采用水蒸气蒸馏法提取川白芷和杭白芷挥发油,运用气相色谱-质谱联用技术,结合计算机检索对其挥发油进行分离鉴定,并结合PCA技术对结果进行验证。结果:共鉴定出川白芷和杭白芷中122个挥发油成分,其中有57个共有成分,两者所含的挥发油在组分和含量上存在一定的差异,PCA分析亦进一步验证了其异同。结论:川白芷与杭白芷挥发油含有大量共有成分,但在组分和含量上存在一定的差异,本研究为川白芷与杭白芷药材的鉴别及质量控制提供了重要依据。