雌二醇诱致大鼠垂体催乳素瘤细胞中催乳素基因第1、2、4外显子的低甲基化

本工作探讨了雌二醇（Ｅ２）诱致的雄性ＳＤ（Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ）大鼠垂体催乳素（ｐｒｏ－ｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）瘤中ＰＲＬ基因含ＣＣＧＧ位点的第１、２、４外显子中ＣＣＧＧ位点甲基化状态的改变。提取基因组ＤＮＡ并分别用对非甲基化ＣＣＧＧ位点不敏感而对甲基化ＣＣＧＧ敏感的ＨｐａⅡ及对甲基化和非甲基化ＣＣＧＧ位点均不敏感的ＭｓｐⅠ进行完全消化后，利用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒｓａｓｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）方法，对含有ＣＣＧＧ位点的ＰＲＬ基因第１、第２和第４外显子的部分序列进行扩增。结果：用ＨｐａⅡ消化后，正常大鼠基因组ＤＮＡ用三对不同引物经ＰＣＲ扩增，均得到预期的含ＣＣＧＧ位点的特异片段（分别为１６３９ｂｐ、２６８ｂｐ和１３３ｂｐ），而Ｅ２致瘤组则均未能扩增出相应的片段，提示正常大鼠ＰＲＬ基因第１、２、４外显子ＣＣＧＧ位点均成甲基化状态，而Ｅ２致瘤后，则均成非甲基化状态。不管是正常对照组，还是Ｅ２致瘤组，经ＭｓｐⅠ消化后，均未能扩增出预期的ＰＲＬ基因片段，而未经ＭｓｐⅠ、ＨｐａⅡ消化组，均扩增出了预期的片段。以上结果表明，Ｅ２所致的大鼠垂体ＰＲＬ瘤，其ＰＲＬ基因外显子中的ＣＣＧＧ位点均呈低甲基?