雌激素受体2基因多态性与绝经后女性骨密度的相关性研究

目的探讨雌激素受体2(estrogen receptor beta,ESR2)基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与绝经后女性的骨密度(bone mineral density,BMD)是否相关。方法使用双能X线骨密度仪测量重庆市140例绝经后女性第2～4腰椎(L2～L4)及左股骨颈BMD值。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析ESR2基因第5外显子T1057G和G1082A及第8外显子G1730A SNPs。结果在全部受试者中,ESR2基因第5外显子1057T位点仅检测到VV1种基因型;G1082A基因型RR、Rr及rr频率分别为81.43%、17.14%及1.43%;G1730A基因型AA及Aa频率分别为87.86%及12.14%,aa基因型缺失;G1082A和G1730A SNPs的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。校正年龄、体质量、绝经年限等BMD影响因素后,G1082A SNP与L2和L4BMD显著相关(P<0.05),而与L3及股骨颈BMD无明显关联(P>0.05);G1730ASNP与股骨颈BMD显著相关(P<0.01),而与腰椎BMD无明显关联(P>0.05)。结论绝经后女性ESR2基因第5外显子G1082ASNP的r等位基因可能是腰椎低BMD的独立危险因素;第8外显子G1730A SNP的a等位基因可能是股骨颈低BMD的独立危险因素。

ESR、FSHβ及OPN基因多态性与母猪繁殖性状的关联分析

采用PCR-RFLP法对大白猪和长白猪猪群进行了雌激素受体基因(ESR)、卵泡促激素β亚基基因(FSHβ)和骨桥蛋白基因(OPN)等3个与繁殖性能相关的基因多态性检测,并对不同基因型的总产仔数、产活仔数及出生窝重进行了相关分析。结果表明:①在长白猪中,ESR和OPN基因的优势基因是A等位基因,FSHβ基因的优势基因是B等位基因;在初产母猪中,ESR基因BB型个体比AA型个体总产仔数、产活仔数及出生窝重高,FSHβ基因AA型个体比BB型个体总产仔数、产活仔数及出生窝重上高,OPN基因BB基因型个体比AA基因型个体总产仔数少1.20头,差异显著(P<0.05);在经产母猪中,OPN和FSHβ基因AA型个体比BB型个体总产仔数和产活仔数高,ESR基因总产仔数、产活仔数规律与初产母猪相反。②在大白猪群体中,ESR基因的优势基因是A等位基因,FSHβ和OPN基因的优势基因是B等位基因;在初产母猪中,ESR基因AA型比BB型个体产活仔数和出生窝重高,OPN和FSHβ基因AA型个体比BB型个体总产仔数和产活仔数高;在经产母猪中,ESR、OPN及FSHβ基因全都表现出BB型比AA型个体总产仔数和产活仔数高的趋势。

子宫内膜息肉组织ERα、ERβ、PR及Bcl-2表达及意义

目的探讨生育期妇女子宫内膜息肉组织中雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、孕激素受体(PR)及Bcl-2的表达及意义。方法用免疫组织化学PV 6000法,检测110例子宫内膜息肉组织ERα、ERβ、PR及Bcl-2的表达,并采用Image Pro Plus 6.0图像分析软件进行分析。以45例正常子宫内膜作对照。结果在增殖期,内膜息肉组织中ERα及ERβ的表达水平与正常子宫内膜比较差异无统计学意义(P>0.05),而PR的表达水平低于正常内膜(t=2.589,P<0.05),Bcl-2的表达水平高于正常内膜(t=2.716,P<0.01)。在分泌期,内膜息肉组织中ER-α及Bcl-2表达水平高于正常子宫内膜,PR的表达水平低于正常子宫内膜,差异均有显著性(t=2.574、2.581、2.579,P<0.05),ERβ的表达水平与正常内膜比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论ERα、Bcl-2的高表达和PR相应的低表达可能是子宫内膜息肉形成的病因,ERα可能是在子宫内膜息肉形成过程中发挥主要作用的雌激素受体亚型。

雌激素受体基因多态性与女孩性早熟关系的研究

目的探讨雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）基因多态性与女孩性早熟的相关性。方法应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）分析技术，分别检测90例性早熟女孩（病例组）和70例健康体检者（对照组）ERα基因PvuⅡ和XbaⅠ酶切位点基因多态性及ERβ基因RsaⅠ和AluⅠ酶切位点基因多态性，并观察基因型对血清雌二醇（E2）的影响。结果病例组ERα基因XbaⅠ、ERβ基因RsaⅠ基因型和等位基因频率分布与对照组相比差异均有统计学意义（均P〈0．05）。等位基因X使女孩性早熟发病风险提高了2．26倍（95％CI：1．35～3．78）；纯合子突变（XX）基因型、杂合子突变（Xx）基因型与野生型（xx）基因型相比，患性早熟的危险度分别为1．32倍（95％CI：0．46～3．81）和2．51倍（95％CI：1．27～4．97）。等位基因R使女孩性早熟发病风险提高了3．12倍（95％CI：1．90～4．79）；纯合子突变（RR）基因型、杂合子突变（Rr）基因型与野生型（rr）基因型相比，患性早熟的危险度分别为7．05倍（95％CI：2．78～7．88）和2．64倍（95％CI：1．09～6．42）。E2增高组ERα基因XbαⅠ和ERa基因AluⅠ基因型分布与E2正常组相比，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；ERα基因RsαⅠ及ERaⅠ基因PvuⅡ基因型和等位基因频率分布在病例组与对照组、E2增高组与E2正常组相比，差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论ERα基因XbaⅠ位点和ERβ基因RsaⅠ多态性与女孩性早熟有关，突变基因增加了女孩性早熟的发病风险，Xx和RR基因型最易患病。

ERβ基因敲除小鼠的繁殖、鉴定及检测

目的繁殖和鉴定出足够数量的ERβ基因敲除雌性小鼠,建立ERβ基因敲除雌性小鼠骨质疏松性骨折实验动物模型基础。方法将引进的3对ERβ基因敲除小鼠饲养于屏障环境中,按遗传学规则进行繁殖3月后,引进2月龄遗传背景为野生型C57BL/6J种系雌鼠14只与纯合子雄性小鼠按2:1配对合笼扩增雌性杂合子小鼠再行分组繁殖,1月后获得较多数量的小鼠后,提取小鼠尾部组织DNA进行聚合酶链式反应(PCR)检测种系基因型,选取10只4月龄ERβ基因敲除纯合子雌性小鼠(βERKO)和10只野生型雌性小鼠(Sham)用MicroCT检测并比较胫骨近端骨小梁结构参数值,进行统计学分析。结果至分组开始繁殖第2个月,计有340只小鼠育出,经鉴定,ERβ+/+小鼠占23.5%、ERβ+/-小鼠占48.2%,ERβ-/-小鼠占28.3%、其中雌性54只,符合研究需要的动物数量较前5月增加近4倍,经过microCT检测4月龄的子代ERβ基因敲除雌性小鼠(βERKO)比较野生型雌性小鼠(Sham)骨小梁矿物质含量的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论本研究引进遗传背景为野生型C57BL/6J种系雌鼠与纯合子雄性小鼠配对,是在短期内成功地大量繁育足够数量ERβ基因敲除雌性小鼠的可行方法,为相关研究提供了实验模型基础。

重要炎症介质基因多态性在不明原因复发性流产患者中的表达及与雌孕激素的相关性研究

目的探讨重要炎症介质基因多态性在不明原因复发性流产患者中的表达及与雌孕激素的相关性。方法前瞻性随机选取2016年8月至2018年8月商洛市商州区人民医院不明原因复发性流产患者170例作为研究组,另随机选取同期健康体检的至少2次成功妊娠且活产的非妊娠妇女170例作为对照组,统计分析两组妇女月经周期2~3 d的激素水平、各雌激素受体β基因SNP位点基因型频率、野生型、杂合型、纯合型血清激素水平,并分析两组妇女各位点的相关性。结果研究组患者月经周期2~3 d的血清LH水平显著高于对照组(P<0.05),但两组妇女月经周期2~3 d的血清FSH、E2水平之间的差异均无显著性(P>0.05)。两组妇女rs1256030、rs1256049、rs4986938位点基因型频率之间的差异均无显著性(P>0.05)。野生型、杂合型、纯合型rs1256030、rs1256049、rs4986938位点的血清FSH、LH、E2水平之间的差异均无显著性(P>0.05)。两组妇女rs1256030和rs4986938位点的多态性呈正相关关系(P<0.05),rs1256049和rs4986938位点的多态性之间呈负相关关系(P<0.05);研究组患者的rs1256049和rs4986938位点的多态性之间呈负相关关系(P<0.05),对照组妇女的rs1256030和rs4986938位点的多态性呈显著的正相关关系(P<0.05)。结论不明原因复发性流产雌激素受体β基因多态性三个位点具有一定的相关性,但三个位点多态性并不会对FSH、LH和E2的表达和分泌水平产生影响。

维吾尔族雌激素β受体基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症的相关性分析

目的探讨维吾尔族雌激素β受体（extrogenreceptorbetagene，ERβ）基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症（intrahepaticcholestasisofpregnancy，ICP）的相关性。方法选择2008年4月至2011年4月在新疆医科大学第一附属医院分娩的维吾尔族ICP患者105例为观察组，105名同期维吾尔族正常孕妇作为对照组。应用限制性片段长度多态性方法分析rs1256049（RsaⅠ）和rs4986938（AluⅠ）两个功能位点，观察两组孕妇ERβ基因型的分布。结果RsaⅠ和AluⅠ的限制性片段长度多态性在两组中均呈多态性分布。ICP组R等位基因频率为35．71％，对照组为50．95％，OR值为0．535（95％可信区间为0．3619-0．7910，P〈0．01）；ICP组A等位基因频率为21．43％，对照组为10．95％，0R值为2．2174（95％可信区间为1．2866-3．8215，P〈0．05）。结论维吾尔族孕妇ERβ基因多态性与ICP存在相关性，R等位基因可能是其保护因素，A等位基因则可能是风险因素。

雌激素受体β基因多态性与帕金森病的相关性

目的探讨中国汉族人群雌激素受体（ER）β基因AluⅠ、RsaⅠ酶切多态性与帕金森病（PD）和帕金森病痴呆（PDD）的相关性。方法采用病例-对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法，对115例PD患者（包括26例PDD）和116名健康对照进行ERβ基因多态性分析，经卡方检验，分析各基因型、等位基因频率与PD、PDD患病的相关性。结果（1）ERβ基因AluⅠ、RsaⅠ的酶切多态性在PD组和对照组间差异无统计学意义（均P〉0．05）。（2）PDD组与对照组相比，ERβ基因的AluⅠ、RsaⅠ的酶切多态性差异也无统计学意义（均P〉0．05）。结论ERβ基因AluⅠ、RsaⅠ的酶切多态性不影响PD和PDD的患病风险。

雌激素受体基因多态性与围生期抑郁的相关性研究

目的探讨雌激素受体(ER)基因多态性与围生期抑郁(PND)的相关性。方法选择2014年2月至2015年2月,于广州医科大学附属第三医院妇产科就诊,父母均为广州汉族人的108例广州汉族孕妇为研究对象。对所有受试者分别于早孕期(11~14孕周)、晚孕期(32~36孕周)、产后7d及产后42d时,采用《抑郁自评量表(SDS)》与《汉密尔顿抑郁量表(HAMD)》进行心理测评。其测评结果由本院2名精神医学科专业评定技师进行评分,对于SDS评分>53分、HAMD评分≥8分者,再由本院精神医学科主治医师按照《中国精神障碍分类与诊断标准第3版(CCMD-3)》有关标准,对PND进行诊断。采用回顾性分析方法,根据这108例受试者是否患有PND,将其分为PND组(n=54)与对照组(n=54)。采用PCR限制性片段长度多态性法,对2组受试者ERα基因Pvu-Ⅱ和Xba-Ⅰ多态性及ERβ基因Rsa-Ⅰ和Alu-Ⅰ多态性进行分析。统计学比较2组受试者ERα基因Pvu-Ⅱ、Xba-Ⅰ及ERβ基因Rsa-Ⅰ、Alu-Ⅰ多态性基因型和等位基因频率。本研究通过广州医科大学附属第三医院伦理委员会批准,并且与受试者签署临床研究知情同意书。2组受试者的年龄、孕龄、体重、产次、孕次等基本临床资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果(1)PND组54例PND患者中,于早、晚孕期及产后7、42d确诊为PND者,分别为18.5%(10/54)、29.6%(16/54)、25.9%(14/54)及25.9%(14/54)。(2)2组受试者ERα基因Pvu-Ⅱ多态性基因型pp、Pp、PP频率比较,差异有统计学意义(χ~2=6.10,P=0.047)。PND组P等位基因频率为37.0%(40/108),显著高于对照组的24.1%(26/108),差异亦有统计学意义(χ~2=4.28,P=0.039)。2组受试者ERα基因Xba-Ⅰ多态性基因型xx、Xx、XX频率和X、x等位基因频率分别比较,差异均无统计学意义(χ~2=1.44,P=0.487;χ~2=0.79,P=0.375)。(3)2组受试者ERβ基因Alu-Ⅰ多态性基因型aa、Aa、AA频率比较,差异有统计学意义(χ~2=6.85,P=0.030);PND组A等位基因频率为33.3%(36/108),显著高于对照组的17.6%(19/108),并且差异亦有统计学意义(χ~2=4.62,P=0.032)。2组受试者ERβ基因Rsa-I多态性基因型rr、Rr、RR频率和r、R等位基因频率分别比较,差异均无统计学意义(χ~2=0.20,P=0.910;χ~2=0.08,P=0.785)。结论 ERα基因Pvu-Ⅱ及ERβ基因Alu-Ⅰ多态性,可能与广州地区汉族女性PND的易感性有关,含A、P等位基因的基因型,可能增加PND发病风险。ERα基因Xba-Ⅰ及ERβ基因Rsa-Ⅰ多态性,与广州地区汉族女性PND发病风险无相关性。

雌激素受体α及β基因多态性与子宫内膜异位症易感性关系的研究

目的:探讨雌激素受体α(estrogin receptorα,ERα)及ERβ基因多态性与子宫内膜异位症易感性间的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析检测58例子宫内膜异位症(EM)患者和107例非EM患者的ERα和ERβ基因型多态性。结果:ERα内切酶PvuⅡ位点的pp、Pp、PP基因型频率在EM组和对照组分别为34.5%和30.8%、48.3%和58.9%、15.5%和9.3%;内切酶XbaⅠ位点的xx、Xx、XX基因型频率在子宫内膜异位症组和对照组分别为56.9%和59.8%、32.8%和37.4%、8.6%和1.9%,2组比较基因分布频率差异无统计学意义(P>0.05)。ERβ内切酶AluⅠ位点的aa、Aa、AA基因型频率在EM组和对照组分别为0%和0%、19.0%和25.2%、81.0%和74.8%,内切酶RsaⅠ位点基因型频率rr、Rr、RR在EM组和对照组分别为20.7%和11.2%、32.8%和42.1%、46.6%和46.7%,2组比较基因分布频率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ERα及ERβ基因多态性与EM的发病易感性间无明显相关性。

雌激素受体β基因多态性与非梗阻性无精子症关系的Meta分析

目的利用Meta分析系统评价雌激素受体β(ERβ)的Rsa I(rs1256049)和Alu I(rs4986938)位点基因多态性与非梗阻性无精子症(NOA)的相关性。方法检索国内外各数据库关于ERβ与NOA的相关文献,其中国外数据库包括PubMed、Medline、Embase、Web of Science、Cochrane Library,国内数据库包括中国知网、万方数据库,检索时间从建库至2020年10月1日。利用STATA 12.0软件计算优势比及95%置信区间(95%CI)评价其相关性,并进行异质性、敏感性和发表偏倚分析。结果共纳入5篇病例对照研究,其中病例组702例,对照组1323例。对于Rsa I(rs1256049)基因位点,G vs.A(OR=0.580,95%CI:0.380~0.900)、GG vs.AG+AA(OR=0.560,95%CI:0.360~0.860)、GG vs.AG(OR=0.569,95%CI:0.374~0.894)三种模型结果均与NOA具有明显的相关性(均P<0.05),提示G等位基因是NOA的保护性因素,A等位基因可增加NOA风险,GG和GA基因型可降低NOA的风险。Alu I(rs4986938)基因多态性与NOA均无相关性(均P>0.05)。结论Rsa I(rs1256049)基因位点多态性与NOA具有明显的相关性,其中A等位基因可增加NOA风险,而Alu I(rs4986938)基因位点多态性与NOA无相关性。