动脉粥样硬化病人雌激素受体基因的甲基化与高同型半胱氨酸血症关系的研究

目的探讨动脉粥样硬化(AS)患者雌激素受体(ER-α)基因启动子区CpG岛的甲基化改变,及其与血总同型半胱氨酸(tHcy)水平的关系。方法82例研究对象分为AS组(54例),对照组(28例),所有入选对象均行颈部血管彩超检查。巢式甲基化特异性PCR(nMSP)法检测研究对象ER-α启动子区CpG岛的甲基化状态,荧光生化法检测血tHcy水平,spearman等级相关分析甲基化程度与tHcy的相关关系。结果54例AS患者中有38例ER-α基因启动子区CpG岛甲基化,甲基化率为70.4%;28例健康对照者中有8例ER-α基因启动子区CpG岛甲基化,甲基化率为28.6%;两组甲基化率差异有显著性(P<0.05)。同时,AS组tHcy水平显著高于对照组(P<0.05),经spearman等级相关分析,ER-α基因启动子区甲基化程度与tHcy相关系数为r=0.809(P<0.05)。且随tHcy升高,AS病损程度亦递次加重。结论AS患者ER-α基因启动子区CpG岛高度甲基化,且甲基化程度与血tHcy浓度呈正相关,提示高Hcy血症很可能通过干扰ER-α基因的甲基化而促进AS的发生、发展。

高同型半胱氨酸血症致血管平滑肌细胞增殖的机制初探

目的探讨高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia,HHcy)致血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)增殖在动脉粥样硬化发病中的机制。方法整体水平实验:82例研究对象分为动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)组54例,对照组28例。荧光生化法检测血浆总同型半胱氨酸(total homocysteine,tHcy)水平,甲基化特异的PCR(Methy-specificPCR,MSP)法检测雌激素受体α(estrogen receptor-α,ER-α)启动子区CpG岛的甲基化状态。细胞水平实验:体外培养的人脐动脉VSMC,用不同浓度同型半胱氨酸(homocy steioe,Hcy)处理,MTT法观察Hcy对平滑肌细胞生长的影响,MS-PCR法和Rt-PCR法检测ER-α基因启动子区甲基化程度及mRNA的表达。结果整体水平实验中,AS患者中甲基化率为70.4%,对照组甲基化率为28.6%,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞水平实验中,MTT结果显示Hcy对VSMC具有明显促增殖效应。Hcy显著增加ER-α基因启动区的甲基化修饰,并使ER-αmRNA的表达进行性减少。结论 Hcy通过干扰DNA的甲基化修饰,使ER-a基因高甲基化可能是高同型半胱氨酸血症促使VSMC增殖,并引起动脉粥样硬化的重要机制。