SULT1E1蛋白表达和性激素含量与子宫肌瘤发病的相关性研究

目的:探讨性激素及人雌激素硫酸基转移酶在子宫肌瘤发生、发展中的作用。方法:化学发光分析法测定30例子宫肌瘤患者和30例同年龄段健康女性血清及组织匀浆中E2、P、T含量。免疫组化染色法检测SULT1E1蛋白的表达。结果:肌瘤组血清E2含量明显低于健康女性组(P<0.05),其T含量则明显高于健康女性组(P<0.05),P含量各组无显著差异;肌瘤组织匀浆中E2含量显著高于肌瘤包膜外肌层组织(P<0.01),其P、T含量两组间无显著差异;肌瘤组织中SULT1E1蛋白表达与肌瘤包膜外肌层组织比较差异显著(P<0.05),肌瘤组织与肌瘤包膜外肌层组织中SULT1E1蛋白定量表达与相应组织匀浆中E2含量分别呈负相关(r=-0.533,r=-0.498,P<0.01)。结论:子宫肌瘤的发生、发展与子宫肌瘤组织局部SULT1E1酶活性降低有关。

SULT1E1、ERβ在子宫内膜腺癌组织中的表达及其相关性

目的:探讨SULT1E1及ERβ蛋白与子宫内膜腺癌的发生、发展之间的关系。方法:采用Western blot方法检测正常增生期子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织中SULT1E1和ERβ蛋白的表达含量。结果:SULT1E1和ERβ蛋白在正常增生期子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织中的表达含量逐渐降低,三者比较差异有统计学意义(P<0.05)。不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织与正常增生期子宫内膜组织比较差异均有统计学意义(P<0.05)。SULT1E1和ERβ蛋白与子宫内膜腺癌组织学分级、肌层浸润深度、手术病理分期及淋巴结转移等无关(P>0.05)。在子宫内膜腺癌组织中,SULT1E1蛋白与ERβ蛋白表达呈明显正相关(r=0.66,P<0.01)。在正常增生期和不典型增生子宫内膜组织中,SULT1E1蛋白与ERβ蛋白表达无明显相关性(r=0.035,P>0.05;r=0.466,P>0.05)。结论:在子宫内膜腺癌的渐近演变过程中,SULT1E1、ERβ表达降低或缺失可能与子宫内膜癌的早期形成有一定的关系,ERβ蛋白含量越多,SULT1E1蛋白对雌激素的调节作用越强,但不能作为子宫内膜腺癌病情严重程度和预后进行评价的指标。

酶抑制剂对V79-hCYP2E1-SULT1A1细胞酶依赖性化学诱变的影响

目的:V79-hCYP2E1-hSULT1A1是一个表达人细胞色素P450(CYP)2E1和硫酸基转移酶(Sulfotransferase,SULT)1A1的重组中国地鼠V79[Chinese hamster lung(V79)cells]细胞系,它对于需有关代谢酶活化的间接诱变剂有基因突变反应;为观察单个酶的作用,需要建立对细胞中任一酶特异抑制的模型。方法:以细胞Hprt位点的正向突变为试验终点,N-二甲基亚硝胺(N-Nitrosodimethylamine,NDMA)和2-硝基丙烷(2-Nitropropane,2-NP)为依赖CYP2E1和SULT1A1的间接诱变剂,观察CYP抑制剂反式二氯乙烯(Trans-1,2-dichloroethylene,DCE)和1-氨基苯并三唑(1-Aminobenzotriazole,ABT)、SULT1抑制剂槲皮素和五氯酚(Pentachlorophenol,PCP)对上述间接诱变剂作用的影响。结果:在一定浓度下,ABT抑制NDMA的诱变率达99%而不影响2-NP的作用,DCE对其抑制仅达55%且对2-NP的细胞毒性有明显加强作用。槲皮素和PCP抑制2-NP的诱变率达63%和98%,且都对NDMA的作用无影响。结论:ABT和PCP可完全且特异地抑制该细胞中CYP2E1和SULT1A1依赖的诱变反应,此模型对于探讨遗传毒物的代谢活化有可靠价值。

凯里酸汤对大鼠非酒精性脂肪肝病作用的分子机制

目的探讨凯里酸汤对大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)作用的分子机制。方法结合文献数据库及TCMSP、PubChem、SEA、SwissTargetPrediction、SuperPred等数据库获取凯里酸汤的化合物成分及其潜在靶点,用Genecards及DisGeNet建立疾病靶点数据集,数据通过Venn制作工具、Cytoscape软件、蛋白质相互作用网络数据库(STRING)及注释、可视化和综合发现(DAVID)等数据库进行分析及网络可视化;18只大鼠均分为对照(ND)组(予正常饲料)、模型(HF)组(予高脂饲料)及凯里酸汤干预(HS)组(予高脂饲料加1 mL/100 g酸汤灌胃),连续12周,结束时麻醉处死各组大鼠,取心脏血及肝脏,采用生化分析仪检测各组大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TC)及总胆固醇(TG)水平,采用苏木精-伊红(HE)染色和油红O染色观察各组大鼠肝组织的形态学特征,采用实时荧光定量(RT-qPCR)、Western blot及免疫组织化学(IHC)染色检测各组大鼠肝组织中过氧化物酶增殖物激活受体α(PPARα)、雌激素磺基转移酶1E1(SULT1E1)及雌激素受体α(ERα)的表达。结果网络药理学方法获得凯里酸汤11个主要成分及PPARα、ERα等12个关键靶点,生物信息学分析显示凯里酸汤参与多个生物过程,并可能通过雌激素信号通路在NAFLD防治中起作用;RT-qPCR、Western blot及IHC结果显示,与ND组相比,HF组大鼠肝组织中SULT1E1表达增加(P<0.05),PPARα、ERα相对表达降低(P<0.05),HS组则相反(P<0.05)。结论凯里酸汤对大鼠NAFLD作用的分子机制可能与PPARα/SULT1E1/ERα/雌激素信号转导恢复有关。

17β-雌二醇与1-萘酚对雄性罗非鱼(GIFT Oreochromis niloticus)雌激素效应的比较

在实验室条件下,研究了暴露于不同质量浓度1-萘酚(0.064、0.8、2 mg.L-1)与17β-雌二醇(1、10、100μg.L-1)下,对雄性罗非鱼(GIFT Oreochromis niloticus)性腺系数、血清雌二醇质量浓度的影响及血清中卵黄蛋白原的诱导效应,以期对它们的环境雌激素效应有所了解。研究结果显示:暴露于1-萘酚环境下30 d后,雄性罗非鱼的性腺系数有所降低,当质量浓度为2 mg.L-1时,与对照组相比,差异显著(p<0.05),雄性罗非鱼血清中雌二醇的量,此时亦达到最大值,为209.3 pg.mL-1,与对照组相比,差异显著(p<0.05);但是,血清中卵黄蛋白原并无变化。暴露于17β-雌二醇环境中的雄性罗非鱼,30 d后,其性腺系数有所降低,当质量浓度为10、100μg.L-1时,与对照组相比,差异显著(p<0.05);血清中的雌二醇也随着暴露质量浓度的增多,逐渐增多,当质量浓度为100μg.L-1时,差异极显著(p<0.01);血清中卵黄蛋白原的质量浓度明显高于对照组,与暴露质量浓度之间呈剂量效应关系。结果显示,17β-雌二醇具有很强的雌激素效应,会使罗非鱼性腺系数下降,诱导血清中雌二醇、卵黄蛋白原的生成;而1-萘酚会使罗非鱼性腺系数下降,诱导血清雌二醇的生成,但是并不诱导卵黄蛋白原的生成,所以推测其雌激素效应可能较弱,需要进一步研究。

硫酸基转移酶SULT1E1、SULT1A1基因多态性与子宫平滑肌瘤易感性的关联研究

目的:探讨硫酸基转移酶SULT1E1、SULT1A1基因多态性对子宫平滑肌瘤易感性的影响。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法检测子宫平滑肌瘤组和对照组SULT1E1基因rs3736599位点、SULT1A1基因rs9282861位点的多态性情况。结果:①病例组和对照组SULT1E1 rs3736599位点基因型分布差异有统计学意义(P=0.032),携带突变A等位基因(基因型为A/A和A/G)女性发生子宫平滑肌瘤的风险是野生型纯合子G/G女性的3.497倍(P=0.034,OR=3.497,95%CI:1.12～10.91)。②病例组和对照组SULT1A1 rs9282861位点基因型分布差异无统计学意义。结论:硫酸基转移酶SULT1E1基因rs3736599多态性可能与子宫平滑肌瘤易感性相关,携带突变A等位基因可能是子宫平滑肌瘤的危险因素。

乳腺癌组织SULT1E1蛋白表达与临床病理学特征及预后相关性的研究

目的:探讨乳腺癌组织SULT1E1的表达,并分析其与临床病理学特征及预后因素的相关性。方法:采用免疫组织化学二步法检测129例乳腺癌组织和癌旁正常组织SULT1E1的表达情况,应用Kaplan-Meier法行单因素生存分析SULT1E1的表达与临床病理学特征及预后的关系。结果:乳腺癌组织中SULT1E1的阳性表达率(25.6%)明显低于癌旁组织(45.0%),差异有统计学意义,P<0.05;SULT1E1的表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移和病理类型以及是否有远处转移等无明显相关性,P>0.05。Kaplan-Meier生存分析曲线显示,SULT1E1阳性表达患者的术后无复发生存率较阴性表达患者明显增高,χ2=4.943,P<0.05。结论:乳腺癌组织SULT1E1低表达者提示预后不佳,SULT1E1检测有可能成为判断乳腺癌分期和预后的重要分子标志,并成为重要的预后因素。

SULT1E1基因SNP位点在子宫内膜癌中意义的研究

目的 调查SULT1E1基因rs3736599位点在中国北方汉族健康女性人群及子宫内膜癌患者群体中的频率分布数据,分析SULT1E1基因rs3736599位点多态性与子宫内膜癌发病的相关性。方法 采用PCR-RFLP技术筛选不同分型并将其归类,运用全自动DNA测序技术确定单倍型中的突变位点。结果 SULT1E1基因rs3736599位点基因型分布在病例组和对照组差异有统计学意义,χ~2=9.616,P=0.006,用Fisher确切概率法处理得到确切P值（0.006）仍显示有统计学差异;该位点等位基因分布频率在病例组和对照组差异有统计学意义（χ~2=31.736,P=0.000,OR=2.38,95%CI：1.24~4.56）,携带A等位基因患子宫内膜癌的风险是野生型纯合子的2.38倍。结论 硫酸基转移酶SULT1E1基因的rs3736599位点的多态性可能对子宫内膜癌的发病风险有一定影响,并且A等位基因可能对子宫内膜癌的发生和发展产生重影响。

E-cadherin以及转录因子ZEB1在乳腺癌中的表达及与ER、PR、HER-2及Ki-67表达的相关性

目的 研究E-钙黏蛋白(E-cadherin)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)在乳腺癌组织中的表达水平及与雌激素受体(ER)、 孕激素受体(PR)、 人表皮生长因子受体2(HER-2)及肿瘤细胞增殖核抗原(Ki-67)表达的相关性.方法 采用免疫组化法检测108例乳腺癌患者癌组织及癌旁正常组织中E-cadher-in、ZEB1的表达水平,分析E-cadherin、ZEB1表达水平与乳腺癌临床病理学特征及HER-2、ER、Ki-67、PR表达的相关性.结果 E-cadherin在乳腺癌组织中阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P<0.05);ZEB1在乳腺癌组织中阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.05);E-cadherin在乳腺癌中的表达与TNM分期、 病理组织学分类、 淋巴结转移、 年龄、 肿块直径及ER显著相关(P<0.05);ZEB1在乳腺癌中的表达与病理组织学分类、 淋巴转移、 组织学分级及HER-2、Ki-67显著相关(P<0.05).结论 E-cadherin在乳腺癌组织中呈低表达,且与ER显著相关;ZEB1在乳腺癌组织中呈高表达,且与HER-2、Ki-67显著相关.

硫酸基转移酶代谢功能相关的研究进展

随着药物研究领域对药物代谢酶的密切关注,它们对药物以及内源性化合物的代谢功能越来越被人们熟知。其中Ⅱ相代谢酶(如葡萄糖醛酸转移酶、硫酸基转移酶或谷胱甘肽-S-转移酶等)主要负责催化药物或者Ⅰ相代谢产物与底物进行结合,使其易于从人体排泄从而降低毒性反应。通过查阅国内外相关文献综述了近年来硫酸基转移酶代谢相关的研究进展,期望增强人们对药物代谢过程的认识,对医院临床合理用药提供一定的借鉴和指导。

菟丝子雌激素样作用质量标志物的筛选及含量测定

目的初步筛选黑龙江产小粒菟丝子雌激素样作用的质量标志物,为后续实验研究及质量控制提供参考依据。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOFMS/MS)技术对菟丝子提取物进行定性分析,并建立菟丝子不同极性部位的指纹图谱。以小鼠子宫系数、子宫内膜厚度和血清雌激素水平评价不同极性部位的雌激素样活性,通过双变量相关分析和灰色关联度分析构建化学物质组与雌激素效应的组-效相关性,筛选质量标志物,并建立其中5个质量标志物的含量测定方法。结果在正、负离子扫描模式下共发现10个与菟丝子雌激素样作用相关的指标成分,分别为金丝桃苷、紫云英苷、豆甾醇、新菟丝子苷C、芹菜素、山柰酚、6-O-反式-对香豆酰基-呋喃果糖-(2→1)-吡喃葡萄糖苷、槲皮素、异鼠李素和2,6-十八碳二炔酸。对其中5个质量标志物进行了含量测定,质量分数分别为金丝桃苷(2.753±0.097)mg/g、槲皮素(1.139±0.107)mg/g、芹菜素(1.104±0.047)mg/g、山柰酚(1.144±0.079)mg/g、异鼠李素(0.697±0.074)mg/g。结论基于组-效关联思路可初步发现黑龙江产小粒菟丝子的质量标志物,所建立的质量标志物含量测定方法准确、稳定。