木豆叶HPLC指纹图谱建立及2种成分测定

目的建立木豆Cajanus cajan(L.)Millsp.叶HPLC指纹图谱,并测定荭草苷和木犀草素的含有量。方法木豆叶65%甲醇提取液的分析采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-1%醋酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长260 nm。结果 10批样品(S1~S10)HPLC指纹图谱中有21个共有峰,除S3(0.516)外,其相似度均大于0.950。荭草苷和木犀草素分别在0.089 5~3.960μg和0.015 5~0.408μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.43%(RSD=1.32%)和98.50%(RSD=0.82%),3个产地(广东、云南、海南)样品中2种成分含有量有明显差异。结论该方法简单准确,重复性好,可用于木豆叶的质量控制。

木豆叶对心肌缺血-再灌注损伤大鼠心功能的影响及其作用机制初探

目的:探讨木豆叶对心肌缺血-再灌注损伤大鼠心功能的影响及其可能的作用机制。方法:60只健康成年SD大鼠被随机分成6组,每组10只。结扎大鼠左冠状动脉前降支(LAD)30 min,再灌注90 min,在不同时间点记录大鼠心率(HR)、平均动脉血压(MAP)、左室发展压(LVDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左室内压最大下降速率(-dp/dt_(max));测定大鼠血清中丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GXH-Px)、一氧化氮(NO)和肌酸激酶(CK)的活性。结果:缺血后模型组血流动力学指标开始逐渐下降,除HR外,MAP、LVDP及±dp/dt_(max)较T_0时显著降低(P<0.05);应用木豆叶后,各指标在某些时间点虽仍低于T0时刻,但差异无统计学意义。缺血-再灌注可导致大鼠血清MDA含量和LDH、CK活性显著升高,SOD、NO、GSH-Px活性显著降低(P<0.05),应用木豆叶能显著对抗这种变化。结论:木豆叶能对抗心肌缺血-再灌注引起的大鼠心功能紊乱,作用机制可能与其抗氧化有关。

树豆叶醇提物通过mTOR/S6K1降低T1DM小鼠胰岛素抵抗

目的探究树豆叶醇提物对1型糖尿病(T1DM)小鼠胰岛素抵抗(IR)的影响及相关机制。方法将60只小鼠随机分为对照组、模型组及树豆叶醇提物低、中和高剂量组,每组10只。树豆叶醇提物低、中、高剂量组均用多次小剂量注射脲佐菌霉素(STZ)方法建立小鼠的1型糖尿病(T1DM)模型,T1DM模型建立成功后,分别给予树豆叶醇提物50、100、150 mg·kg^(-1)·d^(-1)及等量羧甲基纤维素钠(CMCNa)灌胃处理,每日1次,连续4周,模型组及对照组于同时间给予等量CMCNa灌胃处理,期间观察各组小鼠一般情况;测定各组小鼠空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(INS)水平;以胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)评估β细胞功能;以稳态评估模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);以定量胰岛素敏感性检测指数(QUICKI)评价胰岛素敏感度;实时荧光定量PCR法检测小鼠胰腺组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体S6激酶1(S6K1)mRNA表达;免疫印迹法检测大鼠胰腺组织中mTOR、S6K1通路蛋白表达。结果模型组小鼠皮毛松散,毛色发黄、无光泽,精神萎靡,嗜睡,时常扎堆,活动减弱,反应迟钝,多饮、多食和多尿,尿色偏黄,体质量增加较快;树豆叶醇提物3组大鼠一般情况比模型组小鼠有不同程度改善,其中高剂量组改善最明显。与对照组比较,模型组大鼠FPG、INS、HOMA-IR水平、胰腺组织中mTOR、S6K1 mRNA及其蛋白水平均升高(P<0.05),HOMA-β和QUICKI水平降低(P<0.05);与模型组比较,树豆叶醇提物3组大鼠FPG、INS、HOMA-IR水平、胰腺组织中mTOR、S6K1 mRNA及其蛋白水平均降低,HOMA-β和QUICKI水平升高(P<0.05),呈剂量依赖性。结论树豆叶醇提物能够降低T1DM小鼠血糖水平,降低胰岛素抵抗进而增加胰岛素敏感性,可能是通过抑制mTOR/S6K1通路活化实现的。

基于RP-HPLC-DAD指纹图谱结合化学计量学评价不同品种木豆叶质量及主要成分含量测定

目的 基于RP-HPLC-DAD指纹图谱结合化学计量学方法,评价不同品种木豆Cajanus cajan叶质量特征的共有性和差异性,为木豆叶的质量评价提供科学依据。方法 通过RP-HPLC-DAD建立13个不同品种木豆叶的RP-HPLC-DAD指纹图谱,进行相似度分析(similarity analysis,SA),结合聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)对木豆叶质量进行综合评价,并对样品中6种主要成分进行含量测定。结果 木豆叶RP-HPLC-DAD指纹图谱共标定13个共有峰,13个品种木豆叶的相似度均在0.90以上,通过HCA可将这13个品种的木豆叶分为5类。PCA与HCA结果基本一致,经过PCA分析发现S8的综合得分最高,质量最好,其次是S9和S12。PLS-DA与PCA结果基本一致,不同品种木豆叶的化学成分差异主要由7、10、6、9、11号5个色谱峰引起的。S8、S9和S12的含量处于前3,与PCA分析的综合得分一致。结论 指纹图谱结合HCA、PCA和PLS-DA可以全面的评价木豆叶质量,为木豆叶的质量控制提供全面的参考。

木豆叶中黄酮微波提取工艺研究

目的选取适合提取木豆叶中黄酮的方法,并优化提取工艺参数。方法以木豆叶中荭草苷、木犀草素和总黄酮的提取率及提取物抗氧化活性为指标,将微波辅助提取与热回流、超声波及浸泡提取方法相比较,并采用中心组合设计对影响荭草苷和木犀草素提取效果的微波辅助提取工艺参数进行了优化。结果通过比较确定微波辅助提取法较为适合木豆叶中黄酮的提取;优化得到荭草苷和木犀草素最佳微波提取工艺参数为:木豆叶粒径为50目,乙醇体积分数为80%,料液比1∶20,提取温度60℃,提取次数4次,提取时间10 min,微波功率500 W;荭草苷和木犀草素的提取率分别为(4.42±0.01)、(0.10±0.01)mg/g。结论采用微波辅助提取木豆叶中的黄酮具有提取时间短、提取率高、产物抗氧化效果好的特点,优化的工艺参数具有可行性和实际应用价值。