高通量测序分析阿纳其根醇提取物对咳嗽变异性哮喘大鼠肠道菌群的影响

目的研究阿纳其根醇提取物(EEAP)对咳嗽变异性哮喘大鼠肠道菌群的影响。方法采用卵清蛋白-费氏完全佐剂将6~8周龄雄性SD大鼠建立咳嗽变异性哮喘(Cough variant asthma,CVA)模型,随机分为3组,CVA模型组(等体积的生理盐水)、EEAP组(EEAP,640 mg/kg)、阳性药组(醋酸泼尼松,250 mg/kg),每组8只;取8只未造模的SD大鼠作为对照组(等体积的生理盐水)。EEAP和阳性药组大鼠给予药物连续干预,其余各组给予生理盐水,30 d后收集各组大鼠粪便。采用高通量测序技术分析各组大鼠肠道菌群,基于扩增子序列变异(Amplicon sequence variation,ASV)进行Alpha和Beta多样性分析EEAP对肠道细菌属水平的影响。结果高通量测序得到4771个ASV,Alpha多样性分析发现4组大鼠肠道菌群chao1、dominance、observed、pielou、shannon和simpson指标无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,CVA组大鼠肠道中Prevotellaceae_Ga6A1_group丰度明显升高,而Prevotella、Prevotellaceae_NK3B31_group和Prevotellaceae_UCG_001丰度明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与CVA组相比,EEAP组和阳性药组大鼠肠道中Prevotella和Prevotellaceae_NK3B31_group丰度明显升高,而Prevotellaceae_Ga6A1_group丰度明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EEAP对CVA的改善作用可能与调节肠道菌群结构有关,其机制需进一步研究。

阿那其根醇提取物对咳嗽变异性哮喘模型大鼠的改善作用研究

目的:观察阿那其根醇提取物(EEAP)对咳嗽变异性哮喘(CVA)模型大鼠的改善作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、醋酸泼尼松组(阳性对照,250 mg/kg)和EEAP低、中、高剂量组(160、320、640 mg/kg,按EEAP质量计),每组10只。除对照组外,其余各组大鼠均皮下注射1 mg/mL卵清蛋白(OVA)-费氏完全佐剂溶液致敏,并雾化吸入1%OVA-生理盐水溶液(每日1次、每次20 min,持续15 d)以激发哮喘。末次雾化后,对照组和模型组大鼠均灌胃等体积水,各给药组大鼠均灌胃相应药物,每日1次,连续30 d。观察各组大鼠实验过程中的一般症状;采用辣椒素咳嗽激发实验考察各组大鼠的气道敏感性,记录其咳嗽次数;采用酶联免疫吸附测定法检测其血清超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;采用苏木精-伊红染色法观察其肺组织形态学特征;采用瑞氏染色法记录其肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞及白细胞的数量。结果:对照组大鼠呼吸平稳,反应敏捷,毛色光泽;其余各组大鼠经抗原激发后,均出现躁动不安、咳嗽、呼吸急促等症状。与对照组比较,模型组大鼠肺组织内可见支气管壁充血、水肿,并伴有大量炎症细胞浸润,其咳嗽次数显著增加,血清TNF-α含量以及肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞、白细胞计数均显著升高,血清SOD含量显著降低(P<0.05);经药物处理后,各给药组大鼠上述症状均有不同程度的改善,其咳嗽次数均显著减少,血清TNF-α含量以及肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞、白细胞计数均显著降低,血清SOD含量均显著升高,但EEAP各剂量组大鼠咳嗽次数均显著多于醋酸泼尼松组(P<0.05)。结论:EEAP可能是通过抑制TNF-α分泌、增加SOD含量、抑制炎症细胞浸润等途径来发挥对CVA模型大鼠的平喘、抗炎作用。