UPLC-Q-TOF/MS技术结合诊断离子方法快速分析连钱草中黄酮类化合物

建立了超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术结合诊断离子法快速分析连钱草中黄酮类化合物。采用信息依赖型的扫描(IDA)模式,在电喷雾负离子模式下分析黄酮标准化合物的裂解规律及特征碎片离子信息,并以标准物质的特征碎片离子作为诊断离子,全面鉴别连钱草中的黄酮类成分。在连钱草中共鉴别出35个黄酮类化合物,其中有25个化合物为在该植物中首次发现;除白杨素、芹菜素、毛蕊异黄酮、木犀草素、山奈酚、槲皮素外,其他化合物均以黄酮苷的形式存在。该方法可为连钱草的质量控制及药效学研究提供技术支持。

连钱草中的黄酮类化学成分

目的:对连钱草全草进行化学成分研究。方法:采用工业酒精提取、硅胶柱层析、ODS柱层析和重结晶等方法。结果:从连钱草全草中分离并鉴定了10个黄酮类化合物,其结构分别为:芹菜素(1)、木犀草素(2)、芹菜素7O葡萄糖醛酸乙酯苷(3)、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸乙酯苷(4)、大波斯菊苷(5)、木犀草素-7-O-葡萄糖苷(6)、山奈酚3O芸香糖苷(7)、芦丁(8)、6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖芹菜素(9)和6-C-葡萄糖-8-C-葡萄糖-芹菜素(10)。结论:化合物1～10均为首次从该植物中分离得到。

响应面试验优化超声辅助提取连钱草多糖工艺及其体外抗氧化活性

通过中心复合试验优化超声辅助提取连钱草多糖的工艺,以1,1-二苯基-2-苦肼基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)自由基(2,2’--azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)radical,ABTS^+·)清除能力、Fe^(2+)螯合力、铁离子还原抗氧化力(ferric reducing antioxidant power,FRAP)和N,N-二甲基-对苯二胺(N,N-dimethyl-p-phenylenediamine,DMPD)自由基清除能力为指标,研究连钱草多糖的体外抗氧化活性。结果表明,超声辅助提取连钱草多糖的最优工艺为pH 7.2、液固比32∶1(mL/g)、超声功率270 W、超声时间8 min,此条件下多糖提取率在4.95%~5.12%范围内。体外抗氧化活性结果显示,连钱草多糖DPPH自由基清除能力为(0.51±0.04)μmol Trolox/mg,ABTS^+·清除能力为(0.69±0.04)μmol Trolox/mg,Fe^(2+)螯合力为(0.51±0.29)μmol EDTA/mg,FRAP值为(3.45±0.03)μmol Trolox/mg,DMPD自由基清除能力为(0.17±0.01)μmol Trolox/mg。

连钱草乙醇提取物对豚鼠离体肠平滑肌和小鼠肠运动功能的影响

目的 :观察连钱草乙醇提取物对小鼠小肠推进运动、药物性腹泻小鼠模型和豚鼠离体回肠平滑肌收缩的影响 ,探讨其作用机理。方法 :采用在体方法观察连钱草乙醇提取物对小鼠小肠推进功能的影响 ,采用离体方法观察连钱草乙醇提取物对豚鼠回肠平滑肌运动功能的影响。结果 :连钱草乙醇提取物能够显著抑制小鼠小肠炭末推进率 (P <0 .0 1 ) ,缓解大黄所致小鼠腹泻 (P <0 .0 1 ) ,对抗新斯的明所致的肠蠕动亢进 (P <0 .0 1 )。抑制豚鼠离体回肠平滑肌收缩 (P <0 .0 1 ) ,拮抗乙酰胆碱、组胺、氯化钡对离体豚鼠回肠平滑肌的激动作用 (P <0 .0 1 )。结论 :连钱草乙醇提取物具有抑制肠蠕动作用 ,这种作用可能由胃肠道的胆碱能受体和组胺受体介导 ,或直接作用于回肠平滑肌细胞。

外源水杨酸处理对活血丹中次生代谢产物积累的影响

[目的]研究外源水杨酸（SA）处理对活血丹中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸等次生代谢产物含量的影响,进一步优化其施用方法,以完善活血丹规范化种植技术,保障药材品质。[方法]以野生活血丹扦插苗为试验材料,研究SA处理前后活血丹中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量的变化,从而探讨SA处理与活血丹中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量变化是否具有相关性,并在此基础上,比较不同外源SA施用浓度（0、7、14、21和28 mg·L-1）、不同处理时间（4、7、10、13、16和19 d）及施用次数（0、1、2、3和4次）下,活血丹生长及其中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量的变化。总黄酮采用超声提取法提取,分光光度法测定含量,齐墩果酸与熊果酸采用超声法提取,HPLC法测定含量。[结果]外源SA喷施处理后,活血丹中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸的含量随SA质量浓度升高呈现先升后降的趋势,当外源SA质量浓度为14 mg·L-1时,三者的含量达到最大值。当外源SA浓度相同时,活血丹中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸的含量总体上呈现先升后降的趋势,但均较同期对照组显著增加,并多在处理13 d达峰值。相同浓度下喷施1~4次SA溶液,均可使活血丹中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量增加。[结论]外源水杨酸处理可显著提高活血丹中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量。最优的处理条件为：质量浓度为14 mg·L-1的水杨酸溶液每4 d喷施1次,共喷施4次,最后一次喷施在采收前12~14 d。

连钱草提取物对炎症递质的影响

目的研究连钱草提取物对炎症递质(PGE2、组胺、5-羟色胺等)的影响,探讨连钱草提取物的抗炎作用机制。方法分别制作二甲苯所致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致小鼠足肿胀、蛋清致小鼠足组织炎症等模型,考察连钱草水提物(1 g.mL-1)和醇提物(1 g.mL-1)对模型小鼠组织中炎症递质的影响,测定炎症组织中PGE2、5-羟色胺和组胺相对含量。结果连钱草水提物与醇提物对二甲苯致小鼠耳肿胀均有显著的抑制效果;对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亦有显著抑制效果;连钱草醇提取物对角叉菜胶所致小鼠肿胀足组织中PGE2释放无抑制作用,而水提物则有明显的抑制作用;连钱草水提物对蛋清所致小鼠肿胀足组织中组胺的释放有明显抑制作用,但连钱草醇提物无该作用;连钱草水提物对蛋清所致小鼠肿胀足组织中5-羟色胺的释放有明显抑制作用(P<0.05),连钱草醇提物作用较水提物小。结论连钱草提取物通过抑制内源性炎症递质5-羟色胺和组胺的释放而发挥抗炎作用,水提物抗炎作用较醇提物明显。

排石合剂质量标准研究

排石合剂为我院新开发的一种制剂，以金钱草为君药辅以怀牛 膝和车前子等组成。可用于治疗尿路感染、血尿和泌尿系统结石等疾病。建立本品的质量标 准为质控提供依据。处方中的黄酮和皂苷用定性方法鉴别，金钱草和怀牛膝用TLC进行鉴别 ，其中的总黄酮按《中华人民共和国药典》1995年版所载比色法测定实验表明在0.008 ～0.048 mg/mL范围内浓度与吸收度呈良好的线形关系，其低、中、高浓度的加样回收率分 别为100.39%、102.36%和101.17%，本方法简便、快速且重现性好。

金钱草化学成分的分析(Ⅰ)

报道了用水蒸汽蒸馏 萃取法提取金钱草中挥发性物质 ,测得金钱草挥发油的含量为 1.4 5 % ;用GC/MS法从金钱草挥发油中 ,分离并确定出 2 2种化学成分 ;用峰面积归一化法通过化学工作站数据处理系统 ,得出各化学成分在挥发油中的相对百分含量 ,其中主要成分为α 蒎烯 (19.6 % )、樟脑 (5 .0 7% )、乙酸冰片酯 (3.5 3% )、石竹烯氧化物 (7.82 % )、桉油烯醇 (2 .2 6 % )、山奈素 (3.6 7% )、山奈酚 (6 .2 2 % )等 .

基于体外抑菌活性的研究探讨活血丹民间用药的合理性

目的探究活血丹民间用药习惯的合理性。方法采用水煎煮提取法、乙醇回流提取法以及乙醇超声醇提水沉提取活血丹的有效成分。采用细菌纸片法和混合药剂法探究不同提取物的抑菌活性。结果得到活血丹的水提物、醇提物以及超声醇提水沉提取物。活血丹不同提取物均对绿脓杆菌的生长有较好的抑制作用,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定的抑菌活性,活性顺序依次为绿脓杆菌抑制活性>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌。故活血丹对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌抑制活性优于对大肠杆菌。结论从体外抑菌实验说明民间外用活血丹治疗痈疖疔疮有一定的科学性与合理性,治疗腹泻并不合理。外用醇制剂为最佳选择。

连钱草总黄酮缓释片的制备及体外释放度研究

目的:研究连钱草总黄酮缓释片的制备工艺及体外释放特性。方法:采用三因素三水平正交试验设计,以释放度综合评分为评价指标,确定连钱草总黄酮缓释片的最佳制备工艺条件。并对优化的试验结果进行体外释放效果考察。结果:最优处方为羟丙基甲基纤维素(HPMC-K4M)和卡波姆934p二元骨架系统用量占片重30%,二者用量比为2∶1,乳糖为填充剂,用量为20%,5%PVP乙醇为黏合剂,湿法制备连钱草总黄酮缓释片。其体外释药机理符合零级释放。结论:制备的连钱草总黄酮缓释片缓释效果良好,制备工艺简单易行,值得广泛推广。

活血丹提取物舒张血管作用的初步研究

目的探究活血丹提取物对大鼠血管内皮的舒张作用。方法通过四通道微血管张力测定系统记录活血丹各提取物对高钾和苯肾上腺素(PE)预收缩的血管张力及活性。结果活血丹乙酸乙酯部分、水相部分对完整内皮和去内皮的肠系膜上动脉血管环均有舒张作用。结论活血丹在心脑血管及代谢综合征方面具有良好的临床应用前景,应加大对该植物的开发研究与利用。

连钱草挥发油的最佳提取工艺研究

[目的]优选采用压力共沸精馏装置提取连钱草挥发油的最佳工艺。[方法]采用正交试验对连钱草挥发油的提取工艺条件进行优选,以挥发油得率为指标,选用L9(34)正交试验表;考察影响挥发油收率的浸泡时间(A)、料液比(B)、提取时间(C)、NaCl浓度(D)4个因素,每个因素取3个水平。[结果]连钱草挥发油的最佳提取工艺为浸泡时间6 h,料液比1∶16(g/ml),提取时间4 h,NaCl浓度为0;在此条件下连钱草精油的得率为0.03%。[结论]该方法可靠、快捷,准确度高,可用于连钱草挥发油的提取。

陕西地区活血丹属植物分布与民间应用情况

目的:研究活血丹属植物在陕西地区的分布和民间应用情况,为陕西地区该属植物资源保护、开发及种植栽培提供依据。方法:对《中国植物志》《秦岭植物志》及药材标准与古代典籍等文献进行综述,在陕西多个采样点进行实地调查。结果:活血丹属植物在陕西分布4个种,其中活血丹与白透骨消分布较广。活血丹属植物有较强的药用与经济价值,主要外用治疗痈疖疔疮,内服有利胆排石等功效。可做食用蔬菜、花卉和地被植物。结论:活血丹属植物药用、经济价值较高,其药理作用与应用价值前景可观。

活血丹属植物化学成分与药效物质基础研究进展

活血丹Glechoma longituba(Nakai)Kupr是唇形科活血丹属植物,为我国资源分布较广的民间用药。活血丹中主要含有黄酮、萜类、有机酸及其他类成分,其中黄酮及其苷类和五环三萜类化合物、挥发油中的萜类可能是其抗菌抗炎的主成分,苯乙基类等成分可能为利胆的主成分。但该属植物俗名多、品种混乱。对2005—2019年文献报道的活血丹属植物化学成分及主要活性进行分类整理,并综述其主要临床用途与民间用法,为下一步规范该植物的品种与基原、开展该属植物的系统研究与开发利用提供依据。

响应面法优化连钱草三萜酸类成分的超声辅助提取工艺

目的:采用响应面法优化超声辅助提取连钱草三萜酸类成分的工艺条件,提高连钱草中三萜酸类成分的得率。方法:以超声时间、液料比及乙醇浓度为主要因素,以齐墩果酸和熊果酸类成分得率为响应值,根据Box-Behnken原理,采用三因素三水平响应面试验设计进行优化。结果:液料比对连钱草中齐墩果酸和熊果酸的提取效果影响最大,其次是超声时间和乙醇浓度。响应面法优化超声辅助提取连钱草中三萜酸类成分的最佳工艺条件为:以88%乙醇为提取溶剂,超声时间为60 min,液料比为78 mL/g,在此条件下齐墩果酸和熊果酸的含量实测值分别为0.8504和1.7367 mg/g。经验证,并与同参数下热浸法、回流法的提取效果相比,超声提取效果最好,提取更为完全。结论:响应面法优化所得的连钱草三萜酸类成分提取工艺稳定可行,可用于连钱草的开发、利用及质量评价。

活血丹的化学成分研究

目的:研究活血丹的化学成分。方法:活血丹的干燥全草经95%乙醇提取后,提取物依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。乙酸乙酯部分采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱、ODS柱色谱、制备型高效液相色谱等多种色谱技术分离纯化,并通过波谱数据和理化性质鉴定所得化合物的化学结构。结果:从活血丹中分离得到13个化合物,分别鉴定为:芹菜素-7-O-葡萄糖苷(1)、芫花素(2)、齐墩果酸(3)、4-hydroxy-2-methyl-phenyl-acetonitrile(4)、刺槐素(5)、银桦酸(6)、咖啡酸(7)、阿魏酸(8)、芹菜素(9)、槲皮素(10)、5-羟甲基糠醛(11)、绿原酸(12)、芒柄花素(13)。结论:其中,化合物4、6、11~13为首次从该植物中分离得到。

连钱草正丁醇部位化学成分研究

目的:研究连钱草的化学成分。方法:利用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、MPLC等柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质、波谱方法进行结构鉴定。结果:从连钱草正丁醇部位分离得到12个化合物,分别鉴定为:2-(3′,4′-二羟苯基)-1,3-胡椒环-5-醛(1)、β-蜕皮甾酮(2)、(6R,9R)-3-oxo-α-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside(3)、(E)-6-[9-(β-D-glucopyranosyloxy)butylidene]-1,1,5-trimethyl-4-cyclohexen-3-one(4)、丁香酚-O-β-芹糖-(1→6)-O-β-葡萄糖苷(5)、鹅掌楸碱(6)、丁香脂素(7)、杜仲树脂酚(8)、迷迭香酸正丁酯(9)、3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)]-β-D-fucopyranosyl-3β,16α,23,28,29-pentahydroxyoleana-11,13(18)-diene(10)、lucihirtin A(11)、毛冬青三萜B1(12)。结论:以上化合物均为首次从该植物中分离得到。

甘肃省活血丹属一新分布种及其分种(变种)检索表

本文报道了甘肃省唇形科(Labiatae)活血丹属(Glechoma Linn.)一新分布种——活血丹(Glechoma longituba(Nakai)Kupr),编制了甘肃省活血丹属植物分种(变种)检索表。

连钱草挥发油化学成分的研究

目的分析中草药连钱草的挥发性成分。方法通过水蒸气蒸馏方法提获连钱草中的挥发油。随后使用气相色谱-质谱联用方法分析其化学成分。结果从连钱草挥发油分离出71种化合物,鉴定出其中的47种,其相对含量占总含量的92.29%。最主要的几种化合物为solavetivone(17.52%),pinoeamphone(16.32%),(+)-ledene(8.23%),β-humulene(7.92%)等。结论研究明确了连钱草挥发油含有的成分,为其进一步的开发利用提供理论依据。

连钱草中1个具有13α,27-环丙烷结构的新六环三萜

为研究连钱草Glechoma longituba(Nakai)Kupr.中的化学成分,探讨其活血化瘀物质基础,采用MCI、硅胶、凝胶、ODS柱色谱及制备薄层等色谱技术对连钱草醇提物进行系统分离,通过MS、1D NMR、2D NMR等波谱数据分析鉴定化合物结构。从连钱草醇提物的二氯甲烷萃取部位分离得到8个三萜类化合物,分别鉴定为2α,3α,16β-trihydroxy-13α,27-cyclours-11-en-28-oic acid(1)、28-norurs-12-ene-3β,17β-diol(2)、28-norolean-12-ene-3β,17β-diol(3)、齐墩果酮酸(4)、3β,13β-dihydroxyurs-11-en-28-oic acid(5)、熊果醇(6)、齐墩果酸(7)和熊果酸(8)。化合物1为罕见的具有13α,27-环丙烷结构的新六环三萜,命名为euscaphic acid H,化合物2、3为首次从唇形科中分离得到,化合物4、5为首次从活血丹属中分离得到。以凝血四项指标(APTT、PT、TT、FIB)对三萜类成分进行体外抗凝血活性评价,化合物1~7均显示一定的抗凝血趋势,其中化合物1和6表现出较明显的体外抗凝活性。