正交实验结合AHP和GA-BP神经网络优化益黄散醇提工艺

目的 优化益黄散的醇提工艺。方法 采用回流提取法,以乙醇体积分数、液料比、提取时间为考察因素设计正交实验,以橙皮苷、川陈皮素、橘皮素、没食子酸、诃黎勒酸、诃子酸、甘草苷、甘草酸、丁香酚含量和干浸膏得率为指标,采用层次分析法(AHP)进行赋权并计算综合评分。通过验证正交实验和遗传算法(GA)-反向传播神经网络(BP神经网络)所预测的结果确定益黄散最佳醇提工艺参数。结果 正交实验优选的最佳醇提工艺参数为乙醇体积分数60%、液料比14∶1(mL/g)、提取时间90 min、提取2次,验证所得综合评分为79.19分;GA-BP神经网络优选的最佳醇提工艺参数为乙醇体积分数65%、液料比14∶1(mL/g)、提取时间60 min、提取2次,验证所得综合评分为85.30分,高于正交实验所得结果。结论 采用正交实验结合GA-BP神经网络的寻优方法较传统的正交实验寻优方法效果更佳,其优选出的益黄散最佳醇提工艺稳定可靠。

甘肃产不同品种松针的抗氧化活性研究

以甘肃产白皮松、雪松、油松、落叶松、樟子松和华山松6个树种的松针为研究对象,采用DPPH法、ABTS法和铜离子还原能力测定其不同浓度乙醇提取物的体外抗氧化活性,并采用熵值法综合评价遴选出抗氧化活性强的松针资源,为松针的进一步开发利用提供参考。研究表明:采用不同浓度乙醇提取时,40%乙醇提取物的抗氧化活性最好;不同品种松针中,雪松松针的抗氧化活性最好,其中天水产雪松松针40%乙醇提取物的评分最高达99.52%,表明其可以作为进一步研究松针抗衰老研究的资源。

油茶蒲黄酮的制备及组分鉴定

为促进油茶蒲的高值化开发利用,推动油茶产业高质量发展,以油茶蒲为原料,采用超声辅助醇提法制备油茶蒲粗黄酮,并采用AB-8大孔树脂吸附法纯化。另外,对纯化的油茶蒲黄酮的结构进行了紫外光谱和红外光谱表征,利用UPLC-Q-TOF-MS对其组分进行了鉴定。结果表明:采用超声辅助醇提法制备的油茶蒲粗黄酮中黄酮含量为32.41%,采用AB-8大孔树脂纯化后的黄酮含量为70.14%,黄酮总回收率为60.12%;紫外光谱与红外光谱分析表明,纯化物具有明显的黄酮类紫外、红外特征光谱,证明该纯化物主要成分为黄酮类化合物;UPLC-Q-TOF-MS从该纯化物中共鉴定出44种多酚类和黄酮类化合物,其中14种黄酮类化合物、30种多酚类化合物,油茶蒲黄酮多以黄酮苷类化合物形式存在,且多为山奈酚的糖苷类化合物,油茶蒲黄酮中含有原花青素、儿茶素、表儿茶素及没食子酸等抗氧化活性成分。根据油茶蒲黄酮的组成成分,推测其具有开发成为抗糖尿病食品以及与抗癌药物联用治疗疾病的潜力。

基于层次分析法(AHP)优化葛根乙醇提取物制备工艺及其抗氧化活性检测

基于层次分析法(AHP)计算综合评分,在单因素试验基础上采用正交试验设计,优化回流法制备葛根乙醇提取物的工艺,并测定葛根乙醇提取物的抗氧化能力。结果表明:葛根乙醇提取物的最佳制备工艺条件为乙醇体积分数50%、料液比1:15(g/mL)、提取时间45min、提取次数2次,在此条件下综合评分平均值为19.33。抗氧化试验测得葛根乙醇提取物对DPPH和羟基自由基清除率最大分别为55.56%和78.22%,具有一定的抗氧化活性。

比较3种杨树桑黄提取物体外抗氧化、降血糖和抑菌活性

目的比较不同栽培方式对杨树桑黄(Sanghuangporus vaninii)提取物生物活性的影响。方法采用超声辅助提取法制备了3种不同杨树桑黄[吉林椴木仿野生栽培桑黄(JL)、远安人工袋料栽培桑黄(YA)和武汉人工袋料栽培桑黄(WH)]粗多糖和醇提物,比较了不同提取物体外抗氧化性、降血糖及抑菌活性。结果吉林桑黄粗多糖(JL-P)中总糖含量最高(38.73%);吉林桑黄醇提物(JL-E)中总酚(38.50%)、总黄酮(7.39%)、总三萜(6.42%)和总甾醇(7.07%)含量是最高的。不同提取物都具有较强的抗氧化活性,活性最好的为JL-E。体外降血糖实验表明,JL-E对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制效果最显著;大多数桑黄粗多糖和醇提物对α-葡萄糖苷酶的抑制能力都高于阿卡波糖,但对α-淀粉酶的抑制能力都低于阿卡波糖。抑菌实验结果显示醇提物具有更好的抑菌活性,且远安桑黄醇提物(YA-E)和武汉桑黄醇提物(WH-E)对大肠杆菌的抑制活性较好。结论桑黄醇提物比粗多糖具有更好的抗氧化、降血糖和抑菌活性,其中JL-E的抗氧化和降血糖活性更好。本研究将为桑黄资源的合理利用与相关产品开发奠定基础。

基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路研究当归醇提物对多囊卵巢综合征大鼠的保护作用

目的使用来曲唑联合高脂饮食建立多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型,探讨当归醇提物(ethanol extract of Angelicae Sinensis Radix,EEA)对PCOS大鼠的保护作用及其作用机制。方法来曲唑联合高脂饮食诱导雌性SD大鼠建立PCOS模型,并用EEA干预。阴道涂片染色、HE染色、酶联免疫吸附法(ELISA)和生化指标检测评价EEA对PCOS大鼠的治疗作用,并通过荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测EEA对Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响。结果阴道涂片和HE染色结果表明,EEA改善了PCOS大鼠动情周期紊乱和卵巢组织病变,ELISA和生化指标检测结果表明EEA可以调节激素紊乱,改善血脂异常;且在模型组中Keap1蛋白和mRNA表达明显上调,Nrf2和HO-1蛋白和mRNA表达明显下调而经过EEA治疗后Keap1蛋白和mRNA表达明显下调,Nrf2和HO-1蛋白和mRNA表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论EEA可以减轻大鼠PCOS,其机制可能是通过促进Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,从而抑制氧化应激。

沙葱醇提物对奶牛生产性能、瘤胃发酵参数和瘤胃菌群结构的影响

本试验旨在研究沙葱醇提物对奶牛生产性能、瘤胃发酵参数和瘤胃菌群结构的影响。选取体况、胎次、泌乳期和泌乳量相近的荷斯坦奶牛12头,随机分为对照组(CON组)和沙葱醇提物组(AEE组),每组6个重复,每个重复1头。对照组奶牛饲喂基础饲粮,试验组奶牛饲喂在基础饲粮中添加3 g/kg沙葱醇提物的试验饲粮。预试期14 d,正试期35 d。结果表明:1)与CON组相比,饲粮中添加沙葱醇提物显著提高了奶牛第21天的乳脂率(P<0.05),对产奶量和其他乳成分无显著影响(P>0.05)。2)与CON组相比,饲粮中添加沙葱醇提物显著提高了奶牛瘤胃pH(P<0.05),显著降低了瘤胃总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸和戊酸含量(P<0.05),有降低瘤胃氨态氮含量的趋势(P=0.061)。3)与CON组相比,AEE组奶牛瘤胃厚壁菌门(Firmicutes)和解琥珀酸菌属(Succiniclasticum)相对丰度有所提高,瘤胃琥珀酸弧菌科UCG-001(Succinivibrionaceae_UCG-001)相对丰度有所降低,但差异均不显著(P>0.05);饲粮中添加沙葱醇提物显著降低了瘤胃毛螺菌属(Lachnospira)相对丰度(P<0.05)。相关性分析表明,瘤胃琥珀酸弧菌科UCG-001和广泛乳杆菌(Latilactobacillus)相对丰度与乳脂率呈正相关。综上所述,饲粮中添加沙葱醇提物可提高奶牛乳脂率,提高瘤胃pH,并改善瘤胃菌群结构。

罗布麻秆中纤维素提取及其气凝胶的制备

为实现罗布麻秆的高附加值利用,以罗布麻秆为原料,选用硝酸/乙醇法提取纤维素,通过单因素试验和正交试验优化的提取工艺为:温度85℃、时间1.5 h和固液比1∶25,提取的纤维素纯度可达98.61%。采用TEMPO氧化与超声处理相结合,制备纳米纤维素;再以其为骨架,加入聚乙烯醇和钠基蒙脱土制备纤维素复合气凝胶(NMPC)。结果表明:与纤维素气凝胶(PC)相比,NMPC对亚甲基蓝(MB)的吸附量最高达265.84 mg/g。当应变为60%时,NMPC的应力是PC的2倍。钠基蒙脱土的加入改善了气凝胶的结构,不仅提高了气凝胶的吸附性能,还提升了其压缩力学性能。

田菁纳豆多酚提取工艺优化及其抗氧化活性

以田菁纳豆为原料,采用乙醇溶剂浸提田菁纳豆中的多酚,以田菁纳豆多酚提取量为评价指标,通过响应面试验设计优化提取工艺,并考察田菁纳豆多酚的体外抗氧化能力。经过优化得到4个因素的最佳参数为乙醇浓度30%、提取时间80 min、提取温度61℃、料液比1∶15(g/mL),该条件下田菁纳豆的实际多酚提取量为119.24 mg/g。抗氧化试验结果表明,田菁纳豆多酚对ABTS^(+)自由基、DPPH自由基、羟自由基都具有较好的清除能力,在最佳提取条件下,其最高清除率分别是53.47%、83.70%、62.18%,且对铁离子的最大还原力为3.12,表明田菁纳豆多酚具有较好的抗氧化活性。

基于正交设计优化新鲜川芎中挥发油提取工艺

为优化川芎挥发油提取工艺,建立以新鲜川芎为原料提取制备挥发油的新方法,采用正交试验设计对乙醇回流提取工艺条件进行优化,并进一步考察优选回收浓缩、油水分离等关键工艺参数。以藁本内酯和洋川芎内酯A作为指标成分,应用HPLC一测多评法进行含量测定。以提取量、油收率、油含量为评价指标,最终确定川芎挥发油提取制备新方法为:鲜川芎切片,加8倍量70%乙醇回流提取2次(以干药材计,第一次需测定鲜川芎水分,调节乙醇浓度为70%),每次1.5 h,滤液回收浓缩至2.0~3.0 g生药/mL,静置过夜,弃去水层,上层乳化层加热至60℃离心,分取油层,余下乳化层再加氯化钠至饱和并加热至60℃离心,合并油层,即得川芎挥发油。新方法所得川芎挥发油收率约为3%,藁本内酯和洋川芎内酯A含量达70%。该研究所建立的新方法生产设备要求低、操作简便易行,可实现川芎挥发油的高效制备,且含量高、品质优,为川芎挥发油的工业化生产提供了新思路和新方法。

对神经元氧化应激损伤具有保护活性的灵芝化合物体外筛选及作用机理

【目的】筛选灵芝中具有保护神经元活性的化合物,并探究其相应的作用机理,为研发具有预防和治疗阿尔茨海默病(AD)功效的灵芝功能性食品、保健品和药品提供科学依据。【方法】基于β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的氧化损伤建立细胞模型,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、铁离子还原/抗氧化能力检测法和2,2-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法初步评估得到的抗氧化活性较强的灵芝醇提物进行筛选,并对其神经元保护活性进行评价。进一步利用灵芝醇提物中与抗氧化有关的4种三萜类化合物,验证其活性并通过表面等离子共振技术探究其相关作用机理。【结果】DPPH、ABTS自由基清除及铁离子还原/抗氧化能力等体外理化初筛与细胞水平筛选试验结果表明,6种灵芝醇提物(108、161、106-2、171、173和109)抗氧化保护神经元活性较强,其中108、109和106-2样品对大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化应激损伤的保护效果最好;灵芝醇提物可通过缓解细胞周期紊乱、抑制细胞早期凋亡、提高超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽(GSH)含量,抑制丙二醛(MDA)含量上升来发挥神经元保护作用。灵芝醇提物108、106-2和109中4种三萜类化合物(灵芝醛A、灵芝酸B、灵芝酸C2和灵芝酸LM2)的平均含量占比相对较高。活性验证表明4种化合物对细胞氧化应激损伤均有明显修复效果,其中灵芝醛A与Aβ_(1~42)具有较强的亲和力,其KD值为15.62μmol/L,可通过与Aβ_(1~42)竞争性结合来抑制Aβ_(1~42)与RAGE结合。【结论】灵芝醇提物的抗氧化神经元活性通过灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸LM2和灵芝醛A 4种化合物的协同效应来实现。灵芝醛A能通过与RAGE竞争性结合来减轻或抑制Aβ_(1~42)细胞毒性作用。灵芝具有开发防治AD功能性产品的潜力。

沙葱乙醇提取物对奶牛血浆生化、免疫、抗氧化和激素指标的影响

本试验旨在研究沙葱乙醇提取物对奶牛血浆生化、免疫、抗氧化和激素指标的影响。选取12头体况和产奶量相近、2~3胎次的泌乳中期荷斯坦奶牛,随机分为2组,每组6个重复,每个重复1头。对照组奶牛饲喂基础饲粮,试验组奶牛饲喂基础饲粮+54 g/d沙葱乙醇提取物。预试期14 d,正试期42 d。结果表明:1)2组之间血浆葡萄糖(GLU)、尿素(UREA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、肌酐(CR)、胆固醇(CHOL)含量及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性均无显著差异(P>0.05)。2)试验组的血浆谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃Px)活性显著高于对照组(P<0.05),血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性极显著高于对照组(P<0.01)。2组之间血浆总抗氧化能力(T⁃AOC)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量均无显著差异(P>0.05)。3)试验组的血浆白细胞介素-2(IL⁃2)和白细胞介素-10(IL⁃10)含量显著高于对照组(P<0.05),血浆白细胞介素-6(IL⁃6)含量极显著低于对照组(P<0.01)。2组之间血浆免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、干扰素-γ(IFN⁃γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF⁃α)含量均无显著差异(P>0.05)。4)2组之间血浆生长激素(GH)、催乳素(PRL)、雌二醇(E2)、胰岛素(INS)、皮质醇(HYD)含量均无显著差异(P>0.05)。由此可见,饲粮中添加54 g/d沙葱乙醇提取物能增强泌乳中期奶牛的免疫、抗氧化能力,且对奶牛血浆生化指标无不良影响。

柠檬草乙醇提取物的化学成分研究

通过重结晶、硅胶柱层析、反相柱色谱、制备薄层色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱等方法对柠檬草乙醇提取物的化学成分进行了分离纯化,并通过^(1)HNMR、^(13)CNMR对其结构进行了鉴定。结果表明,从柠檬草乙醇提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、齐墩果酸(2)、乌苏醇(3)、山奈酚(4)、白桦脂酸(5)、坡塻酸(6)、4-O-β-D-吡喃葡萄糖基反式肉桂酸(7)、4-O-β-D-吡喃葡萄糖基顺式肉桂酸(8)。

响应面法优化忍冬桑黄总黄酮提取工艺

为了提高忍冬桑黄总黄酮的提取率,以忍冬桑黄(Sanghuangporus lonicericola)子实体为原料,采用超声波辅助乙醇提取其总黄酮,以料液比、乙醇体积分数、超声时间和超声温度进行单因素试验,通过响应面试验对忍冬桑黄总黄酮提取工艺进行优化。结果表明,忍冬桑黄子实体总黄酮最优提取工艺:料液比1∶60、乙醇体积分数60%、超声时间60 min、超声温度76℃。在最佳工艺条件下,忍冬桑黄子实体总黄酮提取率为0.80%,与模型预测值0.83%接近,表明该提取条件合理可行,可以提高忍冬桑黄总黄酮提取率,利于忍冬桑黄产品精深加工及桑黄资源的综合利用。

莫氏马尾藻多酚提取工艺优化及其抗氧化活性分析

采用乙醇提取法提取莫氏马尾藻多酚。以多酚含量为指标,在单因素试验的基础上,通过正交试验优化提取工艺,并对莫氏马尾藻多酚的抗氧化性活性进行评价。结果表明:最佳提取条件为提取温度60℃、乙醇体积分数40%、料液比1:25(g/mL)、提取时间60min,在此条件下多酚含量为(6.26±0.57)mg/g。体外抗氧化结果表明,莫氏马尾藻多酚对DPPH自由基、羟基自由基的清除率分别为28.1%、32.2%,对Fe3+也具有还原能力,表明莫氏马尾藻多酚具有一定的抗氧化活性。

地涌金莲根乙醇提取物的化学成分

从地涌金莲〔Musella lasiocarpa(Fr.)C.Y.Wu ex H.W.Li〕根乙醇提取物中鉴定到12个化合物,即2-甲氧基-9-(3′,4′-二羟基苯基)-1 H-非那烯-1-酮(1)、2-甲氧基-9-(4′-羟基苯基)-1 H-非那烯-1-酮(2)、2-羟基-9-(4′-羟基苯基)-1 H-非那烯-1-酮(3)、2-羟基-9-苯基-1 H-非那烯-1-酮(4)、2-羟基-4-(4′-甲氧基苯基)-1 H-非那烯-1-酮(5)、2-甲氧基-9-苯基-1 H-非那烯-1-酮(6)、2-甲氧基-4-(4′-羟基苯基)-1 H-非那烯-1-酮(7)、菜油甾醇(8)、2-羟基-4-(3′,4′-二羟基苯基)-1 H-非那烯-1-酮(9)、2-羟基-4-(4′-羟基苯基)-1 H-非那烯-1-酮(10)、3,3′-bis-hydroxyanigorufone(11)和β-谷甾醇(12)。化合物7、8、10和11为首次从该属中得到。

大叶蔷薇乙醇提取物的生物活性及其物质基础

对大叶蔷薇(Rosa macrophylla Lindl.)不同部位(花、枝、叶、果)乙醇提取物的总酚和类黄酮含量进行测定,并对其体外的抗氧化能力、抗肿瘤活性和抗炎活性进行评价;利用UPLC-MS/MS技术分析大叶蔷薇叶和果的次生代谢产物组成差异,并对次生代谢产物与生物活性之间的相关性进行分析。结果显示:大叶蔷薇各部位乙醇提取物的总酚和类黄酮含量均较高,分别为123.96~277.93和80.20~714.73 mg·g^(-1)。叶乙醇提取物的总酚含量最高,DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力和总抗氧化能力最强,对人宫颈癌HeLa细胞、人胃癌MGC-803细胞和人肺癌A549细胞的半数抑制率均最小;在0~60μg·mL^(-1)范围内,果乙醇提取物对小鼠RAW 264.7巨噬细胞表现出较小的细胞毒性,且随着乙醇提取物质量浓度增加,小鼠RAW 264.7巨噬细胞的NO释放量逐渐下降,并具有一定的剂量依赖性。比较代谢组学分析结果显示:叶和果的次生代谢产物组成存在明显差异,共得到175种差异代谢产物。Pearson相关性分析结果显示:叶和果乙醇提取物的生物活性与差异代谢产物存在一定的相关性。综上所述,大叶蔷薇叶乙醇提取物的抗氧化能力最强,抗肿瘤活性最好;而果乙醇提取物具有最佳的抗炎活性;松萝酸和金合欢素等可能是叶抗肿瘤活性的物质基础,表儿茶素没食子酸酯、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、吲哚-3-甲醛、葫芦巴碱和根皮苷等可能是果抗炎活性的物质基础。

钩吻枝叶乙醇提取物的化学成分

从钩吻〔Gelsemium elegans(Gardn.et Champ.)Benth.〕枝叶乙醇提取物中共分离鉴定出6个化合物,分别为熊果酸、27-O-对-(E)-香豆酰基-乌索酸、27-O-对-(Z)-香豆酰基-乌索酸、16-表伏康树卡平碱、(Z)-阿枯米定碱、N(a)-去甲基嘌呤。其中,16-表伏康树卡平碱首次从钩吻中分离获得,其余5个化合物首次从钩吻属(Gelsemium Juss.)中分离获得。

17种中草药体外抗炎作用研究

采用超声提取法利用水和乙醇分别获得17种中草药的水和醇提物,将其作用于脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞模型,通过检测提取物对细胞存活率和炎症介质一氧化氮(NO)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(1L-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,综合评价其抗炎效果,并研究其作用机制。结果表明:黄花蒿、冷蒿、白头翁、龙蒿、白鲜果皮、多叶棘豆、斜茎黄耆种皮、灵芝菌棒、苍术根须、山韭醇提物和黄花蒿、冷蒿、广布野豌豆、东北珍珠梅、苍耳、茜草水提物无细胞毒性;通过评估无细胞毒性醇和水提物抗炎活性,最终证明冷蒿水提物具有更好的抗炎作用,可显著降低IKKβ、p65和IKKα表达量,揭示了其可通过调控NF-κB通路发挥抗炎作用。本试验结果为冷蒿防治畜禽细菌性肠炎的研发及应用提供理论依据。

不同灵芝菌丝体水提物对乙醇诱导LO2肝细胞损伤的保护作用

为了探讨不同灵芝菌丝体水提物对乙醇诱导LO2肝细胞损伤的保护作用,本文分析了7种不同灵芝菌株发酵菌丝体水提物对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用。利用乙醇诱导LO2细胞建立体外肝损伤模型,并以细胞存活率、谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和丙二醛(Malondiadehyde,MDA)水平为指标考察灵芝菌丝体水提物对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护效果。结果表明,7种灵芝菌株的菌丝体水提物均具有不同程度的保护作用。综合比较,G0119与G0154菌丝体的水提物作用效果较优,相较模型组,LO2细胞存活率显著提高(P<0.05),细胞培养液中的ALT、AST活力显著降低(P<0.05),细胞内ROS水平显著降低(P<0.05),SOD活力、GSH含量显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。经相关性分析,发现水提物中多糖组分2的分子量大小与其保肝活性呈正相关,即分子量越大,活性越强。综上,灵芝菌丝体水提物对乙醇诱导的体外肝损伤起到保护作用,并且G0119与G0154菌株的作用效果较优,其保肝作用与提取物中多糖组分的分子量大小相关。