MPEG-PLGA纳米胶囊在真核质粒转染细胞中的应用

目的验证MPEG-PLGA纳米胶囊在真核质粒转染细胞中应用的可行性。方法利用直接溶解法将MPEG-PLGA溶解于4℃双蒸水中,加入绿色荧光载体混匀后静置于37℃恒温箱中30 min制成MPEG-PLGA/pEGFP-C3纳米胶囊复合物,检测复合物粒径大小并转染机体细胞,通过对机体细胞绿色荧光的表达判断复合物的转染效率。结果 MPEG-PLGA/pEGFP-C3粒径为28.3 nm,细胞绿色荧光显示复合物组转染率远大于裸质粒对照组。结论 MPEG-PLGA/pEGFP-C3纳米胶囊复合物可有效提高质粒的转染率,可作为一种新型跨膜载体在临床与研究中应用。

真核质粒在组织细胞内的表达时效

目的观察真核质粒在机体细胞内的表达时效,为临床基因治疗的给药间隔提供理论依据。方法取PCDNA3.1(+)-EGFP,pEGFP-C3,pIRES-GFP 3种绿色荧光真核质粒,利用脂质体2000转染机体细胞,观察绿色荧光蛋白在细胞的表达时间推断质粒在机体内的表达时效。结果 3组绿色荧光均在12 h开始表达,48 h达高峰,持续35 d后衰减。结论在基因治疗中真核质粒连接目的基因能在机体细胞内稳定表达35 d,基因给药间隔可选定为30 d。