Exploring the anti-hepatoma effect and potential targets of the active components from Gentiana rhodantha Franch ex Hemsl

The screening of lead compounds in plants is an important way to develop new drugs.Gentiana rhodantha Franch ex Hemsl,belonging to genus Gentiana of Gentianaceae family,has the functions of clearing heat and drying dampness,detoxifying and purging fire,relieving cough and so on.Previous studies have shown that many compounds in G.rhodantha have antitumor activities,but the mechanism is still unclear.The purpose of this study was to investigate the anti-hepatoma activity of the compounds in G.rhodantha by using the knowledge of network pharmacology.A compound-cancer target network with 57 candidate molecules and 38 potential targets was constructed.Analysis of the models showed that the most effective compound in this plant might be compound 47(rhyncoside D)ether,and the most potential target might be GMP synthase(2vxo).We believe that the present study can provide important clues for the study of anti-hepatoma activity.

A review of phytochemistry and pharmacology perspectives of Gentiana rhodantha Franch.ex Hemsl.

Gentiana rhodantha Franch.ex Hemsl.(G.rhodantha)is a perennial herb distributed in southwest China,belonging to the Gentiana genus of Gentianaceae family.Previous research indicated that G.rhodantha contains flavonoids,anthraquinones,terpenes and other compounds,which possess the effects of antioxidant,antibacterial,and antitumor.Besides,its dry herb is used as antiphlogistic and antitussive remedy for the treatment of lung,liver,and gallbladder diseases.This review outlines the chemical constituents and biological activities of G.rhodantha,which will be useful for the further research on this plant.

青荚叶〔Helwingia japonica(Thunb.)Dietr.〕种下新组合

Helwingia japonica (Thunb.) Dietr. var. papillosa Fang et Soong was reduced as a new synonym of H. japonica (Thunb.) Dietr. var. hypoleuca Hemsl. ex Rehd. Helwingia zhejiangensis Fang et Soong was combined into H. japonica (Thunb.) Dietr. and renamed H. japonica (Thunb.) Dietr. var. zhejiangensis (Fang et Soong) M. B. Deng et Y. Zhang.

国家一级重点保护野生植物伯乐树的迁地保护技术研究

伯乐树(Bretschneidera sinensis Hemsl.),是我国特有的单种科植物和国家一级重点保护野生植物。作为第三纪孑遗植物在研究被子植物的系统发育和古地理、古气候等方面具有重要科学价值。本研究根据广东省的气候、土壤和地理等资料,在中国科学院华南植物园、从化种植基地和东莞市大岭山森林公园等地分别建立了伯乐树的引种栽培和迁地保护基地,通过分配种苗、定期监测和精心管理,为长期监测和保育伯乐树提供了必要的技术支撑和研究平台。研究结果表明迁地保护的基地应选在伯乐树的分布区附近,与原生境物候相似;合理的水肥管理可显著提高更新幼苗对胁迫环境的抗性和成活率。至2014年,华南植物园的植株株龄已达17年,共计9株,东莞市大岭山森林公园的植株株龄已达6年,约计2 000余株,均已经发展到幼树阶段,说明伯乐树的迁地保护获得初步进展。

唇冠芒毛苣苔——中国芒毛苣苔属一新记录种

Aeschynanthus hildebrandii Hemsl. ex Hook. f. is reported as a new record for China.

不同种植模式对滇龙胆草总裂环烯醚萜苷含量的影响

滇龙胆草（Gentiana rigescens Franch. ex Hemsl.）为龙胆科（Gentianaceae）龙胆属（Gentiana Linn.）多年生草本植物，主要分布于云南、四川、贵州、湖南和广西等地，生长于山坡、草地、灌丛、林下及山谷中。该种为传统中药龙胆的基源植物，其干燥根及根茎均可入药，具有清热燥湿和泻肝胆火的功效。因其资源需求量逐年增加，滇龙胆草的人工种植越来越普遍，并出现了多种种植模式。目前滇龙胆草主要种植模式有单一种植和林药复合种植，常见的有滇龙胆草与茶树也Camellia sinensis （Linn.） Kuntze页、桉树（Eucalyptus robusta Smith）、木瓜也Chaenomeles sinensis （ Thouin ） Koehne 页和旱冬瓜（ Alnus nepalensis D. Don）的复合种植模式。与传统林业系统相比，林药复合系统具有良好的生态效益、社会效益和经济效益。周幸的研究结果表明：在太行山山地林药复合种植模式中，分布于土壤表层的药用植物浅根系对表层土有加筋固着作用，可减少水土流失。 Sujatha 等认为：在槟榔（Areca catechu Linn.）园间作芳香药用植物有助于提高其产量并增加单位面积收入。目前有关林药复合种植的研究主要集中于其生态效益和经济效益，对复合种植模式下药用植物有效成分变化的研究尚不多见。

林药复合种植的滇龙胆中元素的化学计量特征研究

药用植物复合种植是对传统中药材种植模式的优化,在一定程度上可缓解中药材与作物争地的矛盾,对中药资源的保护与可持续发展具有重要意义。试验通过采集单一种植模式的滇龙胆（Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.）样品以及滇龙胆与茶树[Camellia sinensis（L.）O.Ktze]、大叶桉（Eucalyptus robusta Smith）、木瓜[Chaenomeles sinensis（Thouin）Koehne]、旱冬瓜（Alnus nepalensis D.Don）、核桃（Juglans regia L.）、杉木[Cunninghamia lanceolata（Lamb.）Hook.]、木果石栎[Lithocarpus xylocarpus（Kurz）Markg.]等林药复合种植模式的滇龙胆样品,用微波消解-ICP-AES法测定各滇龙胆样品中的Ca、Mg、Fe、Zn、P、Cu、Mn、Cd、Pb、Ni、Sr、Ti等元素含量,以探明不同种植模式下滇龙胆植株中元素的化学计量特征。结果表明,该方法的加标回收率在95.40%~108.25%,相对标准偏差在0.26%~2.08%。其中滇龙胆根中的元素含量排序为Ca、Fe、Mg、P、Mn、Zn、Ti、Sr、Ni,茎、叶中的为Ca、Mg、P、Fe、Mn、Zn、Sr、Ti、Ni。以滇龙胆-茶树复合种植模式的P元素含量最高,其在根、茎、叶中分别为1 384.73、1 640.12、2 399.04μg/g;滇龙胆-旱冬瓜复合种植模式的Fe和Ti元素含量最高;滇龙胆-大叶桉复合种植模式的Mg元素含量最高,其根、茎、叶中分别为1 486.08、2 770.99、4 673.24μg/g;滇龙胆-核桃复合种植模式的Sr元素含量最高,其根、茎、叶中分别为37.02、52.80、34.63μg/g。重金属元素Cd与Ca、Fe、Ni元素含量之间呈显著或极显著正相关,相关系数分别为0.741、0.929、0.893;Ni与Fe、Ti含量之间呈显著或极显著正相关,与Pb含量之间呈显著负相关;Mg与Cu含量之间呈显著正相关,Mn与Sr含量之间呈极显著正相关。

不同激素组合对诱导滇龙胆顶芽及腋芽产生不定芽的研究

用滇龙胆的顶芽及侧芽为外植体,以MS培养基为基本培养基,以6-BA/NAA和KT/IAA两组不同浓度组合进行对比实验,研究诱导滇龙胆顶芽及侧芽萌发产生不定芽的最佳条件。发现在诱导率、产生的不定芽数、长势及不定芽出现时间等方面上,BA/NAA两种激素的互作用效果明显优于KT/IAA。其中以MS+BA3.0mg/l+NAA1.5—2.0mg/l的培养基上诱导率较高,可达100%,且小植株生长茁壮,叶色浓绿,大部分在10d左右可萌发出不定芽,产生不定芽数达7—9个。

傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术对滇龙胆组织培养的研究

野生药用植物资源的不断减少,使得寻找其原植物的合适替代品显得尤为重要。利用组培材料代替野生药用植物作为药源已取得重大进展,但利用傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)技术筛选合适的组培材料作为野生药用植物替代资源方面的应用鲜有报道。本研究采用FTIR结合偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)对滇龙胆组织培养形成的愈伤组织(肉质部、茎、叶)、增殖苗(肉质部、茎、叶)、生根苗(根、茎、叶)进行比较。结果显示:(1)从原始FTIR光谱图上看,滇龙胆肉质部和根部峰形相似,茎和叶峰形相似;(2)二阶导数光谱图扩大了样品间的差异。在龙胆苦苷的主要吸收峰1612 cm-1附近,吸收峰强度依次为:生根苗叶>增殖苗叶和生根苗茎>增殖苗茎>愈伤组织叶,愈伤组织茎及肉质部、增殖苗肉质部和生根苗根部在该处无吸收峰;(3)PLS-DA得分图表明,同一组培阶段相同组织部位样品聚集在一起,而愈伤组织、增殖苗、生根苗及其各组织部位能够较好的分开。其中:肉质部、根部与茎叶之间距离较远,表明其化学成分和含量可能差异较大;肉质部和根部样品间距离较近,茎和叶样品间距离也较近。二阶导数光谱图显示,组培材料有望代替其原植物满足药用需求;若以龙胆苦苷含量为评价对象,生根苗叶则可能具有更大的开发潜能,有望代替野生滇龙胆以缓解其资源稀缺局面。本研究结果表明,采用傅里叶变换红外光谱法可以简便有效地对药用植物不同组培阶段不同组织部位的替代潜力及开发利用进行初步评估。

濒危植物滇龙胆草的生态学、生物学特性研究

在滇西南地区对滇龙胆草(Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.)在自然状态下的生长环境、生长特性、繁殖特性、开花物候期以及资源状况等进行了考察。结果表明,滇龙胆草的野生种群在自然状态下仅为间断分布且种群内的植株数量较少,自种子萌发至植株开花结实需3年以上时间;开花后授粉方式以自花授粉为主,授粉后5～8 d子房开始膨大,果实成熟期为60 d左右,自然状态下结实率较高(82.4%),但种子萌发率(0.3%)较低;分蘖繁殖能力较低,每丛植株当年仅萌生1～2支茎。野生生境下滇龙胆草群体的更新主要是通过有性繁殖实现,自身繁殖缺陷及人为掠夺性采集是滇龙胆草野生资源濒危的主要原因。

滇龙胆栽培技术研究进展

对滇龙胆近年的种子生理、育苗、组织培养、栽培模式、生态因子影响、生长年限与采收期研究和病虫害等方面的研究情况进行了综述,为滇龙胆的进一步栽培研究提供参考。

滇龙胆1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR的克隆、序列分析与原核表达

目的从滇龙胆Gentiana rigescens幼叶中克隆萜类合成关键酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR,进行序列分析和原核表达。方法根据滇龙胆转录组中GrDXR基因序列,设计引物,通过RT-PCR扩增得到GrDXR开放阅读框(ORF)序列,并进行TA克隆、测序和序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrDXR,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,在IPTG诱导下进行表达。结果 GrDXR ORF全长1 425 bp,编码474个氨基酸。序列分析表明,GrDXR基因是DXR家族成员;蛋白质序列系统发育分析表明,GrDXR与萝芙木RvDXR、橡胶树HbDXR和长春花CrDXR亲缘关系较近。构建pGEX-4T-1-GrDXR重组质粒,获得稳定的原核表达体系。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。结论克隆了GrDXR基因,建立其稳定的原核表达体系,为进一步纯化GrDXR蛋白,研究其结构和功能奠定基础。

滇龙胆丛芽高效诱导与植株再生体系的建立

目的以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体,建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系,筛选出适宜的植株再生途径。方法以MS为基本培养基,在单因素实验的基础上,通过L16(45)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10 d、节上腋芽开始萌发后,基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织,得愈率为97.73%;15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽,分化率100%;30 d后不定芽分化系数达18.65,增殖系数可达63.58。带叶茎尖为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5mg/L中培养30 d后,增殖系数亦可达44.36。2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱,不利于生根培养,试管苗在MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP333 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗。复壮苗生根则在1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。再生苗移栽成活率达95%以上。结论建立的滇龙胆无性快速繁殖体系,为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了实验基础。

白首乌的研究进展

白首乌是传统补益类中药材,具有补益肝肾、养血益精、强筋壮骨、乌须生发、抗衰老之功效,被历代医家奉为延年防老的珍品。近年来,国内学者对不同品种的白首乌进行了药理活性及物质基础的相关研究。现将白首乌近年来的研究新进展进行综述,通过对不同品种白首乌C21甾体总苷、苯酮类化合物结构和含量的差异,不同品种白首乌多糖类成分和营养物质含量的差异,以及不同化学成分的药理活性进行系统归纳,为进一步合理利用白首乌提供科学依据。

正交试验优选血三七总黄酮的提取工艺研究

目的优选血三七Polygonum amplexicaule var.sinense中总黄酮的提取工艺。方法以乙醇体积分数、提取时间、乙醇倍数、提取次数为因素,以总黄酮提取率和浸膏得率为指标,采用正交试验优选提取工艺。结果最佳条件为用10倍70%乙醇,提取3次,每次1.5 h。结论优选的工艺稳定、合理,可用于血三七中总黄酮的提取。

基于ITS2序列的5种鬼臼类中药材DNA条形码鉴定研究

目的通过分析5种鬼臼类中药材八角莲、南方山荷叶、桃儿七、小八角莲和六角莲的ITS2(internal transcribed spacer2)条形码序列,探讨鬼臼类药材鉴定新方法。方法共收集26份样品,以ITS2作为条形码序列,对各鬼臼类中药材提取基因组DNA,PCR扩增ITS2序列并进行双向测序。所得序列经Codon Code Aligner拼接并剪切后,采用MEGA5.1软件进行序列对比分析,计算遗传距离,分析比较种内、种间序列差异,并构建系统邻接树。结果 5种药材种间存在明显差异,各个种的种内最大遗传距离均小于种间最小遗传距离;构建的系统树各个种不同样本均分别聚在一起,表现出单系性。结论ITS2序列作为DNA条形码可较好地用于鬼臼类中药材DNA条形码的鉴定研究。