猪葡萄球菌脱落毒素ExhC基因的克隆及原核表达

为研究猪葡萄球菌表皮脱毒素Exh C基因的分子特征及其原核表达产物的免疫学活性,利用PCR技术从猪葡萄球菌广东增城分离株(GDZC株)扩增出表皮脱落毒素Exh C基因,测序与序列比较分析显示,其编码区全长为837bp,编码279个氨基酸,与国内外猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌表皮脱落毒素Exh C基因的核苷酸同源性、氨基酸同源性均为100%。将Exh C基因克隆于pET-28a(+)表达载体中,经测序正确后,重组质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定和Western blot分析。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量大小约为32ku,与预期大小一致。Western blot分析表明,Exh C重组蛋白能与猪葡萄球菌GDZC株的阳性血清发生特异性反应,说明表达的GDZC株Exh C重组蛋白具有良好的免疫学活性。

LC-MS法测定大鼠血浆中EXH-1626的浓度及其药代动力学研究

目的建立大鼠血浆中EXH-1626的LC-MS定量分析方法,并运用于大鼠体内EXH-1626的药代动力学研究。方法色谱柱为汉邦ODS C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-10 mmol/L醋酸铵水溶液（用乙酸调pH至3）70∶30,流速为0.6 mL/min;质谱用ESI离子源及选择性离子监测（SIM）。血浆样品加入内标卡马西平,经蛋白沉淀剂沉淀血浆蛋白,测定EXH-1626的血药浓度,数据经BAPP2.2软件拟合处理,分别考察2个剂量下灌胃和静脉注射给药后,大鼠体内的药代动力学特征。结果血浆中EXH-1626在5~10 000 ng/mL范围内线性关系良好（r=0.999 7）,方法学回收率、精密度、稳定性等均符合要求。大鼠灌胃给药（80 mg/kg）后,其血药浓度-时间过程符合一室模型（W=1）,t1/2为24.14 h、Cmax为222.33 ng/mL、Tmax为5.50 h,当大剂量灌胃给药（250 mg/kg）时,大鼠体内药时曲线呈现多峰曲线,药动学过程呈现明显的非线性特征;大鼠尾静脉注射给药（10和20 mg/kg）后体内药时过程也符合一室模型（W=1）,t1/2分别为2.23和5.48 h、血浆清除率（CL）分别为0.29和0.08 L/（h·kg）。结论 EXH-1626在大鼠体内存在饱和非线性动力学,所建立的方法快速、准确、灵敏度高,适用于EXH-1626血药浓度测定及其非临床药代动力学研究。

LC-MS法测定大鼠血浆中EXH-1626的浓度

目的：建立测定大鼠血浆中EXH-1626浓度的液相色谱-质谱（LC-MS）方法。方法：大鼠血浆样品中加入内标卡马西平,经蛋白沉淀剂（甲醇∶5%硫酸锌溶液 = 70∶30,V/V）沉淀血浆蛋白后取上清液5 μl进行LC-MS测定。色谱条件：色谱柱为汉邦ODS C18柱（5 μm,150 mm × 4.6 mm）,流动相为乙腈∶10 mmol/L醋酸铵水溶液（用乙酸调pH至3）70∶30,流速为0.6 ml/min,柱温30℃;质谱条件：采用电喷雾离子化（ESI）方式,以选择性离子监测（SIM）方式检测,EXH-1626和内标选择检测离子的质荷比（m/z）分别为453.3（[M＋H]＋）和274.3（[M＋H]＋）。结果：大鼠血浆中EXH-1626在5~10 000 ng/ml内线性关系良好（r = 0.999 7）,最低定量限（LOQ）为5 ng/ml,由低到高（10。100。1 000和10 000 ng/ml）4个浓度的日内和日间精密度RSD均〈 10%,绝对回收率均〉 70%,相对回收率90%~110%。结论：该方法快速。准确,灵敏度高,操作简便,适用于EXH-1626血药浓度测定及其非临床药代动力学研究。

猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的表达与纯化

为了研究猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的生物学活性,试验以猪葡萄球菌的基因组DNA为模板,PCR扩增ExhA全基因序列,连接到pCold TF表达载体上,构建重组质粒pCold TF-ExhA,将重组质粒转入E.coil BL2（DE3）,IPTG低温诱导目的蛋白可溶性表达,重组表达的蛋白用Ni-IDA琼脂糖纯化树脂纯化,Western-blot及攻毒试验验证表达蛋白质的生物学功能。结果表明：成功构建了pCold TF-ExhA重组质粒,并且脱落毒素ExhA主要以可溶性形式表达,表达纯化的脱落毒素ExhA具有完整的生物学活性。说明表达的脱落毒素ExhA具有良好的抗原性。

Chinese and Japanese Calligraphy Exhibition of Bronze Inscriptions——Origin of Ancient Chinese Writing

To commemorate the 35th anniversary of the normalization of diplomatic relations between China and Japan, and carry forward the traditional culture of the Chinese nation, the Chinese and Japanese Calligraphy Exhibition of Bronze Inscriptions-Origin of Ancient Chinese Writing jointly sponsored by the CPAFFC, the Shaanxi Provincial People’s Association

Delegation of“Zhou Enlai and Japan”Exhibition Visits Japan

At the invitation of the Japan-China Friendship Association(JCFA) and the Japan Foundation,the delegation of the"Zhou Enlai and Japan"exhibition with Wang Xiaoxian, Vice President of the China -Japan Friendship Association(CJFA), as its head,and Zhao Wei,Secretary of Zhou Enlai and Deng Yingchao,as its advisor,paid a visit to Japan from October 27 to 30,2009.

西屋型汽轮机OPC频繁动作分析和处理

分析西屋型机组opc试验中,测速表参数设置不合理,造成opc频繁动作和中压缸排汽压力质量判断不合理,造成LDA误动作的原因,并阐述对参数修改和逻辑修改的过程。

面向数字化陈展的自然人机交互技术研究

针对目前博物馆数字化陈展系统交互行为单一不自然,且开发成本高,可重复利用率低的问题,通过在XNA全屏环境下整合Wiimote的高精准度定位技术和WPF中InkCanvas控件的轨迹识别功能,开发了一套基于自然人机交互理念的数字化陈展系统,使用户可以通过不同的手势运动变换来对数字藏品进行相应的陈展操作。详细分析了Wiimote捕捉红外点位置的原理和与计算机的通信机制。实践证明,该系统的操作识别率高,成本低,可扩展性强,具有一定的实用价值。

NOTIONS OF IDENTITY

My limited experience of art in Shanghaicame about when I was recently invitedto exhibit my work as part of the

关于高中压合缸汽轮机过桥汽封漏汽问题的探讨

过桥汽封漏汽量,超过设计值是非常普遍的现象。通过对问题的针对性的分析,提出造成漏汽量大的内在原因;以及由于当前治理方法不当,将造成平衡管内蒸汽倒流,危及到机组的安全运行。

三大机场积极建设空港经济圈

以机场的建设和发展为依托,北京首都机场、上海浦东机场和虹桥机场、广州白云机场在进行建设的同时,周边区域建设也呈现出具有航空港特色的城市功能区,机场航空市场也得到发展。日前在香港举行的“世界空港城会议及展览会”上,来自内地的机场高层管理人士表示,大型机场将成为人流。

Activities of Third China-India Joint Medical Mission

Activities of the third China-India Joint Medical Mission (CIJMM) co-sponsored by the CPAFFC and the China-India Friendship Association (CIFA) were carried out in Beijing and neighboring Hebei Province from June 24 to July 2.

2011 China-ASEAN Youth Dance and Music Interaction & Competition

During the convocation of the 2011 Conference on China- ASEAN People-to-People Friendship Organizations in Thailand, young people from various countries presented a dance performance at the National Theater in Bangkok on August 18 and 19.