灌服碱性髓鞘蛋白对实验性变态反应性脑脊髓炎的抑制作用

从牛脊髓白质中提取碱性髓鞘蛋白（ＭＢＰ）免疫豚鼠建立实验性变态反应性脑脊髓炎（ＥＡＥ）模型，并观察灌服ＭＢＰ对ＥＡＥ发病、临床症状、病理改变以及淋巴细胞体外增殖应答的影响。结果表明：用ＭＢＰ免疫豚鼠可产生典型的ＥＡＥ临床及病理表现；灌服ＭＢＰ组动物在发病、临床分级、病理改变等方面较对照组均有明显减轻，Ｔ－淋巴细胞对ＭＢＰ的反应受到明显的抑制。说明灌服ＭＢＰ可通过使Ｔ－淋巴细胞对ＭＢＰ产生特异性耐受而抑制ＥＡＥ的发生，提示灌服抗原诱导产生耐受的方法有可能作为免疫治疗自身免疫性疾病的途径之一。

不同磷脂肽段诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎模型病理特征多样性的研究

目的:探索是否不同磷脂肽段可以诱导Lewis大鼠产生不同的病理学表现。方法:采用髓鞘碱性蛋白82-99(MBP82-99)、MBP68-86、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫Lewis大鼠,每天进行神经功能评分。免疫后取各组大鼠大脑、小脑、脑干和脊髓组织,观察炎性细胞浸润部位和浸润程度、有无脱髓鞘和轴索损害。结果:MBP68-86和MBP82-99两组大鼠的大脑、脑干、小脑和脊髓组织均有炎性细胞浸润,脊髓炎症程度重于其他部位;MBP68-86和MBP82-99诱导的脊髓炎症程度无统计学差异;MOG35-55组大鼠仅脊髓组织受累,且炎症程度明显低于MBP组,其余各组未见炎性细胞浸润。各组大鼠神经组织均未见脱髓鞘和轴索受累。结论:不同磷脂肽段诱导Lewis大鼠神经组织炎性细胞浸润的分布和程度不同。

口服髓鞘素对EAE的防治作用

目的:研究口服髓鞘素对EAE的防治作用。方法:在建立Wistar大鼠EAE动物模型的基础上,观察灌服髓鞘素对其临床表现及病理改变的影响。结果:口服组发病延迟,症状及病理改变均明显轻于对照组。结论:口服髓鞘素可诱导免疫耐受,对EAE的发生、发展具有一定的缓解作用。

口服髓磷脂碱性蛋白治疗实验性自身免疫性神经炎的临床及神经病理观察

摘 要：目的 探讨口服髓磷脂碱性蛋白（MBP）治疗实验性自身免疫性神经炎（EAN）的效果。方法 应用牛周围神经 MBP免疫豚鼠建立 EAN动物模型。应用国际分级标准和临床评分对发病豚鼠进行临床评定；对 EAN豚鼠坐骨神经进行常规病理、免疫组化、半薄切片的光镜及电镜观察；剥离单神经纤维，评定其脱髓复髓情况。结果用 MBP建立豚鼠 EAN模型其发病率为 87．5％，免疫诱导的 12～16d出现典型瘫痪症状，高峰期在 14～21d，以后进入恢复阶段。发病高峰期坐骨神经病理为小血管周围大量的淋巴细胞、巨噬细胞浸润，神经纤维肿胀、变性，髓鞘脱失；恢复期神经组织内浸润的细胞明显减少，神经纤维肿胀、脱髓的现象明显减轻，施万细胞明显增生。在发病高峰时开始治疗，口服MBP和腹腔注射静脉用丙种球蛋白（IVIG）治疗均促使豚鼠临床得分提前下降，坐骨神经病理在21d时表现为浸润的淋巴细胞减少，肌髓鞘纤维减少，复髓纤维增多。结论 MBP口服治疗EAN，明显地促进其临床和病理提前恢复，其机制可能是大剂量MBP口服诱导机体免疫耐受的结果。

经腹腔诱导免疫耐受抑制EAE的实验研究

目的 通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)动物模型 ,研究经腹腔诱导免疫耐受的方法及机制。 方法 腹腔内注射可溶性髓鞘碱性蛋白 (MBP)或转输可溶性 MBP致敏的腹腔抗原提呈细胞 (MBP-APC) ,观察各组动物 EAE的发病情况 ,检测各组动物迟发型超敏反应 (DTH)和淋巴细胞体外增殖应答。结果 腹腔内注射 MBP及 MBP-APC的动物发病率明显低于 EAE组 ,临床症状减轻 ,由 MBP引起的 DTH和体外特异的MBP淋巴细胞增殖反应也明显降低。结论 腹腔注射 MBP或 MBP-APC可引起黏膜耐受 ,抑制 EAE的发生。目的 通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)动物模型 ,研究经腹腔诱导免疫耐受的方法及机制。 方法 腹腔内注射可溶性髓鞘碱性蛋白 (MBP)或转输可溶性 MBP致敏的腹腔抗原提呈细胞 (MBP-APC) ,观察各组动物 EAE的发病情况 ,检测各组动物迟发型超敏反应 (DTH)和淋巴细胞体外增殖应答。结果 腹腔内注射 MBP及 MBP-APC的动物发病率明显低于 EAE组 ,临床症状减轻 ,由 MBP引起的 DTH和体外特异的MBP淋巴细胞增殖反应也明显降低。结论 腹腔注射 MBP或 MBP-APC可引起黏膜耐受 ,抑制 EAE的发生。

可溶性髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠免疫耐受的机制

目的探讨可溶性髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠免疫耐受的机制。方法将EAE小鼠随机分为MOG肽治疗组、卵清蛋白(OVA)处理组和对照组,分别于EAE诱导的第6～16天腹腔注射MOG肽、OVA肽和同等剂量的PBS,通过比较各组小鼠临床评分,脾脏(SP)大小,脾脏和中枢神经系统(CNS)的脑和脊髓浸润淋巴细胞数,流式细胞术分析T细胞表型及其功能,探讨T细胞迁移在可溶性MOG肽诱导的EAE免疫耐受中的作用;流式细胞术分析脾脏、CNS浸润CD11b+抗原提呈细胞(APC)的成熟,免疫荧光技术分析成熟APC与效应性CD4+T细胞的相互作用,研究成熟APC在T细胞迁移中的作用。结果腹腔注射可溶性MOG肽可抑制脾脏内的效应性T细胞向CNS迁移,并诱导脾脏APC成熟,抑制CNS浸润APC成熟;MOG肽诱导的成熟APC可与MOG反应性CD4+T细胞相互作用并聚集在一起,进而抑制效应性T细胞的迁移。结论可溶性MOG肽通过诱导脾脏APC成熟,成熟APC与MOG-T细胞相互作用,抑制脾脏MOG-T细胞向CNS迁移,诱导EAE免疫耐受。

过表达BTLA的树突状细胞对小鼠EAE免疫耐受作用的初步研究

目的探讨过表达B和T淋巴细胞衰减子(BTLA)的树突状细胞(DC)对C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)免疫反应的调节作用。方法构建携带目的基因BTLA的重组慢病毒载体,以感染复数15转染原代分离培养的C57BL/6小鼠骨髓源性的DC从而在DC上过表达BTLA。构建C57BL/6小鼠EAE模型,发病高峰时分离脾细胞并从中磁珠分选出CD4^+T淋巴细胞并与过表达BTLA的DC共培养,以ELISA法检测共培养体系中辅助性T淋巴细胞Th1类细胞因子干扰素-γ和Th2类细胞因子IL-10的含量。结果成功构建携带BTLA基因的重组慢病毒LPP-Mm26645-Lv203-400,以感染复数15转染培养5 d后的DC,96 h后DC上有BTLA过表达。采用MOG35-55多肽免疫C57BL/6小鼠后,21~24 d出现发病高峰,分选出的CD4^+T淋巴细胞与过表达BTLA的DC共培养72 h,ELISA法检测共培养体系中干扰素-γ分泌明显减少,IL-10分泌明显增多(P均<0.05)。结论过表达BTLA可以增强DC的耐受性,通过逆转Th1/Th2失衡,对EAE产生特异性抗原免疫耐受,负性调节EAE的免疫反应。

PM2.5短期暴露诱导免疫耐受缓解实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用研究

目的:建立PM2.5短期暴露自身免疫性疾病动物模型,探讨PM2.5的“暴露时间窗”对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发生发展的作用机制。方法:完全弗氏佐剂混合MOG35-55免疫6周龄雌性C57BL/6小鼠构建EAE模型。对EAE小鼠进行PM2.5短期暴露,每天观察小鼠临床发病情况。组织学分析结合流式细胞术评估PM2.5短期暴露影响疾病发展的作用机制。结果:EAE小鼠临床评分显示,PM2.5短期暴露可显著延迟疾病发生发展。与对照组相比,PM2.5短期暴露组小鼠中枢神经系统(CNS)中观察到炎症和脱髓鞘显著减少。PM2.5短期暴露小鼠中枢及外周中激活的树突状细胞、巨噬细胞及致病性Th17细胞比例显著降低,有效抑制了CNS及外周炎症。结论:短期暴露于PM2.5环境对EAE小鼠病情具有一定缓解作用,可能通过抑制免疫细胞过度活化、诱导免疫耐受实现,阐明其机制可为自免疫疾病发病机制研究提供依据。

口服髓鞘碱性蛋白诱导免疫耐受治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究

目的建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（ＥＡＥ）动物模型，探讨口服自身抗原诱导免疫耐受对大鼠ＥＡＥ的防治作用。方法在普通Ｗｉｓｔａｒ大鼠经１次足跖真皮内注射完全弗氏佐剂－豚鼠全脊髓匀浆或完全弗氏佐剂－髓鞘碱性蛋白乳剂加百日咳疫苗诱发ＥＡＥ疾病；另在大鼠致炎前及发病后口服髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ），观察其对ＥＡＥ的防治作用。结果在Ｗｉｓｔａｒ大鼠成功地诱发了ＥＡＥ，发病率将近９０％。大鼠在致炎前口服ＭＢＰ，可明显推迟ＥＡＥ发病时间，降低ＥＡＥ发病率，使神经组织病理改变明显改善。大鼠发生ＥＡＥ后给予ＭＢＰ，可明显控制发病动物的病情，使病程缩短及减轻患鼠神经组织的炎症程度。另外，在耐受鼠由ＭＢＰ引起的迟发型超敏反应（ＤＴＨ）以及体外针对ＭＢＰ的淋巴细胞增殖反应也明显受到抑制。结论口服ＭＢＰ可引起特异性的免疫耐受。

小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的病理变化

目的用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽(MOG35-55)诱发实验性自身免疫性脑脊髓炎(experi-m ental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型。方法应用MOG35-55抗原加完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠,利用光镜、电镜观察小鼠组织学改变。结果光镜下可见小血管周围炎细胞浸润,呈袖套状改变、血管周围明显脱髓鞘及神经元变性,B ieschowsky银染显示大量轴索肿胀和轴索卵形体的形成,电镜下可见髓鞘结构松散、断裂或融合,包括不同程度的髓鞘重建,脊髓病变广泛,程度重于脑部。结论EAE的病理改变为血管周围炎性细胞浸润、白质脱髓鞘及髓鞘重建。

可溶性MOG35-55对实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用分析

目的探讨可溶性髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG35-55）预防和治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的机制。方法通过临床评分、免疫组化、细胞计数等方法，评价腹腔注射可溶性MOG35-55的治疗效果，卵清白蛋白（OVA）作为对照；运用过继转移试验、Transwell试验、流式细胞术，分析体内、体外MOG35-55、OVA对MOG-T细胞迁移、脾脏抗原提呈细胞（APCs）活化的作用。结果MOG35-55抑制中枢神经系统（CNS）淋巴细胞浸润，预防EAE；MOG35-55抑制MOG-T细胞向CNS迁移，抑制外周淋巴器官萎缩；MOG35-55诱导脾脏APCs活化，活化APCs可招募MOG-T细胞、影响MOG-T细胞迁移。结论MOG35-55通过诱导脾脏APCs活化、APC-T相互作用，抑制MOG-T细胞向CNS迁移，预防EAE。

经腹腔诱导免疫耐受抑制EAE的实验研究(英文)

目的通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)动物模型,研究经腹腔诱导免疫耐受的方法及机理。方法腹腔内注射可溶性髓鞘碱性蛋白(MBP)或转输可溶性MBP致敏的腹腔抗原提呈细胞(MBP-APC),观察各组动物EAE的发病情况,检测各组动物迟发型超敏反应(DTH)和淋巴细胞体外增殖应答。结果腹腔内注射MBP及MBP-APC的动物发病率明显低于EAE组,临床症状减轻,由MBP引起的DTH和体外特异的MBP淋巴细胞增殖反应也明显降低。结论腹腔注射MBP或MBP-APC可引起粘膜耐受,抑制EAE的发生。