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Isolation of extracellular CaM-binding proteins from transgenic tobacco seedlings with a magnetic method
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作者 GU Xuesong, CHEN Zhangliang and ZHU YuxianThe National Laboratory of Protein Engineering and Plant Genetic Engineering, College of Life Sciences, Peking University, Beijing 100871, China 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1997年第24期2081-2084,共4页
USING a magnetic method which was designed for identification of CaMBPs according to theprinciples of affinity chromatography, we were able to isolate 3 CaMBPs with calmodulin(CaM) binding activity from the cell wall ... USING a magnetic method which was designed for identification of CaMBPs according to theprinciples of affinity chromatography, we were able to isolate 3 CaMBPs with calmodulin(CaM) binding activity from the cell wall fractions of transgenic tobacco. After SDS-PAGEand CaM gel overlay analysis, we found that CaMBPs were retained and the isolation is effi- 展开更多
关键词 extracellular ISOLATION and identincation cam-binding protein.
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Extracellular Calmodulin Induces rbcS-3A Gene Expression in Suspension Culture of Tomato Cells 被引量:2
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作者 张素巧 马力耕 孙大业 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第6期653-655,共3页
利用番茄 (LycopersicumesculentumMill.)悬浮培养细胞为材料 ,以3 2 P标记的寡核苷酸 (40bp)为探针检测了细胞外钙调素对番茄细胞rbcS_3A及rbcS_3C基因表达的影响。当向暗中培养的番茄悬浮细胞 (第 7天 )中加入外源纯化钙调素 (10 -7mo... 利用番茄 (LycopersicumesculentumMill.)悬浮培养细胞为材料 ,以3 2 P标记的寡核苷酸 (40bp)为探针检测了细胞外钙调素对番茄细胞rbcS_3A及rbcS_3C基因表达的影响。当向暗中培养的番茄悬浮细胞 (第 7天 )中加入外源纯化钙调素 (10 -7mol/L)并处理 2 4h后 ,rbcS_3A基因的表达明显增加 ,而相同浓度的S_10 0蛋白和BSA则没有作用。加入外源钙调素 (10 -7mol/L)对rbcS_3C基因的表达没有影响。上述结果表明细胞外钙调素对暗中培养的番茄rbcS基因的表达有调控作用 ,并且这种调控作用具有亚型特异性 ,即对番茄rbcS_3A基因的表达有诱导作用 ,而对番茄rbcS_3C基因的表达没有作用。 展开更多
关键词 extracellular cam rbcS_3A gene TOMATO
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Existence of Extracellular Calmodulin in the Lower Epidermis of the Leaves of Vicia faba and Its Role in Regulating Stomatal Movements
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作者 陈玉玲 张学琴 +1 位作者 陈珈 王学臣 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第1期40-46,共7页
As a possible peptide primary messenger, extracellular calmodulin (CaM) may regulate processes such as cell proliferation, pollen germination and expression of some genes. Stomata open or close quickly in response to ... As a possible peptide primary messenger, extracellular calmodulin (CaM) may regulate processes such as cell proliferation, pollen germination and expression of some genes. Stomata open or close quickly in response to environmental stimuli. CaM was found to be extracellular both in guard cells of broad bean leaves and in epidermal cells by immuno-electron microscopy and immuno-fluorescence microscopy techniques. Exogenous purified CaM enhanced stomatal closure and inhibited stomatal opening with an optimal concentration of 10(-8) mol/L; CaM antagonist W7-agarose and anti-CaM serum, which were membrane-impermeable macromolecules, inhibited stomatal closure and promoted stomatal opening. All these data showed that endogenous extracellular CaM. of guard cells did promote stomatal closure and inhibit stomatal opening, and could he active only outside the cells. Therefore under natural conditions, the endogenous extracellular CaM of guard cells might regulate stomatal movements as a primary messenger together with other signal molecules, and might be an important linkage between environmental stimuli and cell responses. 展开更多
关键词 extracellular cam Vicia faba stomatal movement
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花椰菜胞外钙调素的性质及促进植物生长作用 被引量:6
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作者 刘德龙 杨燕生 孙大业 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期126-127,共2页
花椰菜胞外钙调素的性质及促进植物生长作用刘德龙杨燕生孙大业(中山大学化学系,广州510275)(河北师范大学生物系)关键词花椰菜,胞外钙调素,花粉萌发,花粉管伸长分类号Q942.6钙调素(CaM)是普遍存在于真核细... 花椰菜胞外钙调素的性质及促进植物生长作用刘德龙杨燕生孙大业(中山大学化学系,广州510275)(河北师范大学生物系)关键词花椰菜,胞外钙调素,花粉萌发,花粉管伸长分类号Q942.6钙调素(CaM)是普遍存在于真核细胞中的一种重要的多功能胞内钙受体,... 展开更多
关键词 花椰菜 胞外钙调素 生长调节作用 钙调素
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植物细胞外钙调素的稀土发光探针研究 被引量:12
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作者 刘德龙 孙大业 +3 位作者 杨燕生 张洪杰 王淑彬 龚孟濂 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第6期860-864,共5页
从植物中提纯了细胞外钙调素 ( Ca M) ,并利用 NAD激酶激活作用及拮抗剂的抑制作用进行了 Ca M特性试验 .利用稀土 ( Tb3+ )发光探针测得胞外 Ca M具有 4个金属离子结合位点 .敏化 Tb3+ 激发光谱结果证明其含有 1个 Tyr残基 .胞外 Ca M(... 从植物中提纯了细胞外钙调素 ( Ca M) ,并利用 NAD激酶激活作用及拮抗剂的抑制作用进行了 Ca M特性试验 .利用稀土 ( Tb3+ )发光探针测得胞外 Ca M具有 4个金属离子结合位点 .敏化 Tb3+ 激发光谱结果证明其含有 1个 Tyr残基 .胞外 Ca M( Tyr)能够向 Tb3+传能并使 Tb3+特征发光增强 .根据 Forster能量传递理论测得胞外 Ca M中 Tyr→ , 位之间距离分别为 1 .1 0 4和 1 .0 56nm,它们均小于牛脑 Ca M的相应值 .此外 ,利用敏化 Tb3+ 荧光光谱研究了 Ca M拮抗剂 W7或抗体与胞外 Ca M的相互作用 ,表明 W7或抗体优先与胞外 Ca M的 , 位半分子结合 ,使胞外 Ca M构象发生变化并导致 Tb3+ 发光强度下降 .实验表明 ,稀土发光方法不仅能获得 Ca M的结构信息 ,还可用于研究与 Ca 展开更多
关键词 细胞外钙调素 稀土发光探针 钙调素拮抗剂 植物
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细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞蛋白质磷酸化作用的影响 被引量:1
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作者 张来群 李芳 孙大业 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2001年第3期201-206,共6页
用液体闪烁计数法研究了细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞质蛋白质磷酸化的作用。结果表明 :烟草细胞细胞质蛋白质磷酸化活性在细胞培养过程中逐渐增加 ,达到最高峰后又开始下降。在细胞质蛋白质磷酸化强度高峰时 ,加入抗CaM血清后 ,细... 用液体闪烁计数法研究了细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞质蛋白质磷酸化的作用。结果表明 :烟草细胞细胞质蛋白质磷酸化活性在细胞培养过程中逐渐增加 ,达到最高峰后又开始下降。在细胞质蛋白质磷酸化强度高峰时 ,加入抗CaM血清后 ,细胞质蛋白质磷酸化活性受到了部分抑制。加抗CaM血清后再补加CaM能够部分解除抗CaM血清对细胞质部分与细胞核部分蛋白质磷酸化的抑制作用。外加纯化钙调素可以引起烟草悬浮培养细胞细胞质蛋白质磷酸化的活性增强 ,并且这种增强作用具有时间 (高峰为 70min)与剂量 (最适为CaM 10 -7mmol/L)依赖性。CaM引起的细胞质蛋白质磷酸化变化与红光所引起的细胞质蛋白质磷酸化变化在时间进程上是不相同的。 展开更多
关键词 烟草悬浮培养细胞 细胞外钙调素 蛋白质磷酸化
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