响应面法优化七叶莲多酚提取工艺及抗氧化性研究

以七叶莲为试材,采用纤维素酶协同超声辅助提取七叶莲多酚,通过单因素试验和响应面试验优化提取条件,研究了七叶莲多酚对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)和亚硝酸盐(NO_(2)^(-))的清除能力,以期为综合开发利用七叶莲多酚提供参考依据。结果表明:七叶莲多酚最佳提取工艺条件为乙醇体积分数40%,料液比1:35g·mL^(-1),酶解时间35min,超声功率350 W,酶解温度50℃,纤维素酶用量3.0%(以七叶莲干粉质量为基准,下同);在该条件下,七叶莲多酚提取量为(15.52±0.824)mg·g^(-1),与预测值(15.61mg·g^(-1))接近;七叶莲多酚对·OH、DPPH·和NO_(2)^(-)有较强的清除能力,且随多酚质量浓度的增大而逐渐增强;七叶莲多酚质量浓度为0.137mg·mL^(-1)时,对·OH、DPPH·和NO_(2)^(-)的清除率分别为54.33%、91.14%和61.42%。采用响应面法优化的多酚提取工艺参数准确可靠,可用于七叶莲多酚提取;七叶莲多酚具有较强的体外抗氧化能力,可作为食品及医药的天然抗氧化剂资源进行开发利用。

一氧化氮合酶抑制剂对七叶莲花镇痛作用的影响

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂与七叶莲花镇痛作用的关系。方法采用小鼠热板法,将小鼠随机分为等渗盐水组(阴性对照组)、曲马多组(阳性对照组)及各实验组,观察L-精氨酸(L-Arg)和NOS抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对七叶莲花醇提物(SAHF)镇痛作用的影响。结果与等渗盐水组比较,L-NAME可显著增强七叶莲花的镇痛作用(P<0.01);与SAHF组比较,脑组织中NO水平显著降低(P<0.05)。结论七叶莲花的镇痛作用和NOS抑制剂之间存在一定的相互作用,L-NAME可显著增强七叶莲花的镇痛作用,提示SAHF的镇痛作用机制与降低体内过量的NO有关。

汉桃叶抗炎镇痛作用有效部位的筛选

目的分离并筛选汉桃叶抗类风湿性关节炎的有效部位。方法采用系统溶剂提取法对汉桃叶进行提取、分离得到不同部位的提取物。分别采用小鼠二甲苯致耳廓肿胀、大鼠棉球所致肉芽肿、小鼠醋酸扭体法和小鼠热板法评价活性。结果乙酸乙酯提取物对小鼠耳廓肿胀抑制率为50.10%,有显著抗炎作用(P<0.01);对大鼠棉球所致肉芽肿的抑制率为56.05%,有显著抗炎作用(P<0.01);对醋酸致小鼠疼痛的扭体抑制率达50.17%,有明显镇痛作用(P<0.01);对热板所致的小鼠疼痛抑制率为55.01%,有显著镇痛作用(P<0.01)。结论汉桃叶乙酸乙酯提取物可能是其治疗类风湿性关节炎的有效部位。

GC法测定七叶莲提取物中大孔树脂有机残留物

目的建立七叶莲提取物中7种大孔树脂有机溶剂残留物的检测方法。方法采用顶空进样毛细管气相色谱法,色谱柱为HP-INNOWAX毛细管柱;柱温(程序升温):60℃维持16min,再以20℃.min-1的升温速率升至200℃,维持2min;进样口温度:240℃;FID检测器温度:300℃;25%N,N-二甲基乙酰胺为溶解介质,载气为氮气,测定七叶莲提取物中正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、1,2-二乙基苯7种大孔树脂有机溶剂残留量。结果本法线性关系良好,r=0.9983～1.0,精密度RSD均小于7.0%,7种溶剂的平均回收率为93.34%～98.39%,其RSD在0.99%～5.10%。结论该方法操作简便快速,灵敏度高,准确度好,可作为七叶莲提取物中大孔树脂有机溶剂残留量的测定方法。

预给七叶莲花醇提物对大鼠布比卡因毒性影响

目的探讨预先给予3种不同剂量七叶莲花醇提物对布比卡因(BPV)致大鼠中枢和心脏毒性反应的影响。方法 60只雄性10周龄SD大鼠随机均分为4组,所有大鼠禁食不禁水12 h后连续3 d进行灌胃处理,每天1次。对照组(D组)灌胃生理盐水,另外3组分别按大鼠每公斤体质量灌胃七叶莲花醇提物2 g(S1组)、4 g(S2组)和8 g(S3组),连续灌3 d后所有大鼠经股静脉泵注0.5%BPV 2 mg/(kg·min)。分别记录大鼠发生抽搐、室性心律失常和心跳停止时BPV的用量。并对各组大鼠出现抽搐时血气分析、心脏组织HE切片病理检查、qRT-PCR测定各组大鼠海马N-甲基-D天冬氨酸受体(NMDAR)1亚基与2B亚基表达水平变化情况等考察七叶莲花醇提物解救大鼠BPV中枢毒性的效果。结果 S1组、S2组和S3组大鼠出现抽搐、心律失常和心跳停止时,BPV用量大于D组,S2组、S3组的用量也大于S1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血气分析S1组、S2组和S3组大鼠抽搐时动脉二氧化碳分压均高于D组,且S3组与D组相比差异有统计学意义(P<0.05)。心脏组织HE切片病理检查D组大鼠可见炎细胞浸润,间质充血或出血明显,S1组、S2组、S3组大鼠间质炎细胞浸润较D组明显减轻,间质轻微充血或轻微出血。qRT-PCR测定的S1组、S2组、S3组NMDAR1和NMDAR2B,与D组相比表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论七叶莲花醇提物预先给药可减轻BPV所致大鼠中枢和心脏毒性反应。