Research progress on chemical constituents in Sophora alopecuroides L.and their pharmacological activities

Sophora alopecuroides L.,a perennial plant belonging to Leguminosae family,is used as medicinal materials to treat a variety of skin diseases.Its chemical components are complex and diverse,mainly including alkaloids and flavonoids.Modern pharmacological studies have found that the isolated compounds from S.alopecuroides have a variety of pharmacological activities.In particular,alkaloids represented by matrine,aloperine and oxymatrine have significant anti-inflammatory,anti-viral,anti-tumor,anti-bacterial and immunomodulatory activities.This paper summarized the chemical constituents and pharmacological activities of S.alopecuroides,aiming to provide the basis for further research.

HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量

目的:建立同时测定苦豆子总碱中槐定碱、苦参碱及槐果碱含量的 HPLC 测定法。方法:色谱柱为 Hypersil-NH_2柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸缓冲液(1.0mL 磷酸加入到1000mL 水中,三乙胺调 pH 2.5)-无水乙醇(80:10:10),检测波长为220nm,柱温35℃,流速1.0mL·min^(-1),进样量20μL。结果:槐定碱、苦参碱、槐果碱分别在13.0～108.0mg·L^(-1)、11.4～95.2mg·L^(-1)和4.6～82.1mg·L^(-1)浓度范围内呈良好的线性关系,r 分别为0.9999,0.9996,0.9999。平均回收率(n=9)分别为99.41%,100.0%,100.6%。结论:可通过 HPLC 法同时测定苦豆子总碱中槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量,并可用该方法进行苦豆子药材及含苦豆子的成药的质量控制。

苦豆子种子中生物碱的分离及lehmannine的结构确定

目的 研究苦豆子种子中生物碱的分离及槐果碱转移氢化制备苦参碱的研究。方法 利用离子交换、萃取和柱层 ,并结合转移氢化增大不同生物碱理化性质差异进行分离。结果 从苦豆子种子中分得 5种生物碱 ,其结构经元素分析、IR、MS、1 H NMR和 1 3CNMR光谱鉴定为氧化苦参碱、氧化槐定碱、苦参碱、槐定碱和 lehannine。结论 首次从苦豆子种子中分得 lehm

槐定碱预防小鼠内毒素性肝损伤的作用及对肝脏CD14、TLR4表达的影响

目的研究预防性给予槐定碱对小鼠内毒素血症急性肝损伤的影响及对CD14、TLR4表达的调节。方法观察槐定碱12、6、4mg/kg三个剂量预防性处理的小鼠,在给予内毒素后2、6、12、24h时各组小鼠一般状况、肉眼及光镜下肝组织的病理变化,赖氏法测定血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)浓度,RT-PCR与Western Blot分别检测肝组织CD14及TLR4的mRNA与蛋白表达,放免法检测血清TNF-α含量的变化。结果槐定碱三个剂量预防性给予,各个时间点结果均表明改善了内毒素血症模型小鼠的一般状况,减轻了肝组织病理改变;槐定碱三个剂量组的ALT值均低于同时间点的LPS模型组(P<0.01或P<0.05);槐定碱三个剂量组与同时间点LPS模型组比较,均下调肝组织CD14、TLR4 mRNA和蛋白的表达(P<0.01或P<0.05);槐定碱三个剂量组血清TNF-α水平均较同时间点LPS模型组降低(P<0.01或P<0.05),并在24h时均降至正常对照组水平。结论槐定碱12、6、4mg/kg三个剂量预防性给予,可抑制内毒素血症小鼠肝脏炎症反应,其机制可能与下调LPS识别受体CD14、TLR4表达,并进而抑制下游炎症因子分泌有关。

TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的体系优化

采用薄层层析法（TLC）,展开剂为氯仿-甲醇-氨水=8∶2∶0.1;同时采用高效液相色谱法（HPLC）,色谱柱为Ultra II^TM C18（5μm×250mm×4.6mm）、流动相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇（45∶55）、检测波长为216nm、流速为1.0mL/min、柱温为30℃、进样量为10μL;建立TLC和HPLC同时分离测定苦豆子生物碱体系的优化方法。结果表明：槐定碱和苦参碱在200-900μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,R2分别为0.9994和0.9996。平均回收率（n=9）分别为99.47%和99.82%;试验表明可通过TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的含量,并可用该方法进行苦豆子药材及含苦豆子药用成分的质量控制。

HPLC法分离测定苦豆子愈伤组织喹诺里西啶生物碱含量及体系优化

以苦豆子愈伤组织为试材,采用高效液相色谱法,分离并测定苦豆子愈伤组织中氧化槐果碱、氧化苦参碱、槐定碱、槐果碱和苦参碱,建立了这5种单碱分离、测定的色谱方法。结果表明:色谱条件为UltimateAQ-C18(4.6μm×250mm×5mm);流动相为0.01mol·L^(-1)磷酸缓冲液(K2HPO4=5.59g·L^(-1),KH2PO4=0.41g·L^(-1),pH 7.5)-甲醇(50∶50,V/V);检测波长为216nm;柱温为35℃;流速为1.0mL·min-1,检测苦豆子愈伤组织中含有5种生物单碱,其中氧化槐果碱和槐定碱在苦豆子愈伤组织继代培养第4代时含量相对较高,分别为1.205 6mg·g-1和0.116 5mg·g-1,氧化苦参碱、槐果碱、苦参碱的含量略有波动,大致呈下降趋势。

槐果碱对感染CVB_3小鼠NK细胞活性和IL-2水平的影响

目的 :研究槐果碱对感染CVB3 小鼠NK细胞和IL - 2活性的影响。方法 :病毒接种法制备CVB3 病毒性心肌炎小鼠模型 ,用MTT比色分析法与ELISA法分别检测小鼠脾脏中NK细胞活性与IL - 2的诱生量。结果 :病毒模型组NK活性明显升高 ,IL - 2活性降低。槐果碱 5 0mg .kg-1.d-1和 2 5mg .kg-1.d-1两个剂量ig可明显升高正常小鼠NK活性。但槐果碱各治疗剂量对CVB3 心肌炎小鼠NK细胞活性无明显影响。槐果碱 5 0mg .kg-1.d-1ig治疗组可明显增加脾脏IL - 2诱生量。结论 :槐果碱升高CVB3 感染小鼠的IL - 2活性 ,这可能是其抗CVB3 免疫机理之一。

苦豆籽HPLC指纹图谱的建立及产区相关性分析

目的研究苦豆籽的HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供依据。方法采用HPLCDAD方法,对不同主产区的21批苦豆籽进行指纹图谱研究,采用相似度评价分析所得图谱,同时运用聚类分析及主成分分析对其进行模式识别。结果确定苦豆籽指纹图谱有15个共有峰,并指认了6个色谱峰,不同批次间的相似度大于0.900。通过聚类分析和主成分分析将21批药材按不同产地分为3类。结论苦豆籽的指纹图谱特征性及专属性良好,可用于全面控制苦豆籽的质量,保证每批苦豆籽均一性。

Plackett-Burman与Box-Behnken试验设计优化苦豆子中氧化苦参碱提取工艺

目的:优选苦豆子中氧化苦参碱的最佳提取工艺。方法:通过单因素试验和Plackett-Burman试验设计确定各因素的最佳水平并筛选出关键因素,采用Box-Behnken响应面法优选氧化苦参碱的最佳提取工艺。结果:氧化苦参碱的最佳提取工艺为:料液比1∶25,提取时间60 min,浸提温度60℃,乙醇浓度60%,提取3次,氧化苦参碱的提取率可达80.83%。结论:利用该方法优化出的苦豆子氧化苦参碱的提取工艺稳定可靠,可为氧化苦参碱的开发利用提供参考。

苦豆子SaLDC密码子偏好性分析、优化及原核表达

目的研究苦豆子SaLDC密码子偏好性、优化及原核表达。方法运用EMBOSS在线程序中的CHIPS、CUSP和CodonW软件分析SaLDC密码子的偏好性,根据大肠杆菌密码子的偏好性对SaLDC密码子进行优化,并将优化后的基因命名为optSaLDC;构建重组表达载体pET⁃28a(+)⁃optSaLDC,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导SaLDC蛋白表达,并对表达蛋白进行质谱分析。结果SaLDC有28个密码子的RSCU值>1.00,偏好使用以A/T结尾的密码子;SaLDC的密码子使用偏好性与拟南芥最接近,与大肠杆菌差别最大。优化后的optSaLDC在大肠杆菌中最佳表达条件为IPTG浓度1.0 mmol/L,诱导温度15℃,诱导时间16 h。LC⁃MS/MS鉴定诱导得到的SaLDC蛋白分子质量为48990.51 Da。结论诱导获得的optSaLDC纯化蛋白可用于后续体外SaLDC酶活性分析,为深入研究该基因的功能提供依据。

宁夏产苦豆子不同器官HPLC指纹图谱的分析研究

目的用HPLC指纹图谱的方式研究苦豆子不同器官中各生物碱的变化。方法采用HPLC检测方法,色谱柱Waters X-Brige C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05 mol/L的磷酸二氢钾溶液(2.0ml/L三乙胺),进行梯度洗脱;检测波长为205 nm,进样量10μl,流速1.0 ml/min。结果 10批不同器官的苦豆子样品得到7个共有峰,通过与对照品比较,2、3、5、6、7号峰确定为野靛碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱。结论该指纹图谱的分析体现了不同器官的苦豆子样品所含各成分及各成分的含量变化较大。

不同比例苦豆子替代苜蓿对伊拉肉兔生长性能、血清生化指标和免疫指标的影响

试验旨在研究不同比例苦豆子替代苜蓿对伊拉肉兔生长性能、屠宰性能、血清生化指标和免疫能力的影响。选取35日龄健康、体重相近的伊拉肉兔120只随机分为4组,每组5个重复,每个重复6只。对照组饲喂基础饲粮,各试验组分别添加4%、8%和12%的苦豆子替换基础饲粮中的苜蓿。预试期14 d,正式试验期56 d。结果表明,与对照组相比,4%组肉兔试验全期的平均日增重及试验第28 d、56 d的体重显著增加(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);宰前活重、半净膛率和全净膛率显著增加(P<0.05)。与对照组相比,各试验组肉兔血清球蛋白(GLB)含量显著降低(P<0.05),γ-谷氨转肽酶(GGT)、谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性均显著提高(P<0.05);8%组、12%组肉兔血清葡萄糖(GLU)、总胆固醇(TG)含量显著降低(P<0.05)。与对照组相比,8%组肉兔胸腺重量及胸腺指数显著降低(P<0.05),肝脏指数显著提高(P<0.05);4%组肉兔血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量显著增加(P<0.05)。研究表明,伊拉肉兔饲粮中苦豆子的添加上限为8%,苦豆子添加量为4%时,肉兔的养殖效果最优。

苦豆子提取物指纹图谱建立及其抗炎作用谱效关系研究

目的:建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,研究不同配伍的化学成分与细胞活力以及抗炎之间的关联性,明确不同配伍对细胞活力的影响以及抗炎作用的物质基础。方法:采用高效液相色谱(HPLC)建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,以LPS刺激RAW264.7建立炎症细胞模型,对不同配伍组合对炎症细胞模型肿瘤坏死因子(TNF-α)水平以及以细胞活力进行检测,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究苦豆子化学成分与抗炎作用的谱效关系,筛选苦豆子抗炎作用的物质基础。结果:苦豆子生物碱类成分HPLC指纹图谱共有峰有8个,指认出5个共有峰,分别是槐果碱、槐定碱、苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱;黄酮类成分HPLC指纹图谱共有峰有15个,指认出3个共有峰,分别为槲皮素、紫铆因和芹菜素。相关性分析结果表明,槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱与脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)细胞释放的炎症因子TNF-α水平呈显著负相关,槲皮素与细胞活力呈负相关,紫铆因、芹菜素与细胞活力呈正相关,槐定碱、氧化苦参碱与细胞活力呈负相关,苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱与细胞活力呈正相关。结论:槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱可能是苦豆子抗炎的物质基础,可为挖掘苦豆子的质量标志物以及药材质量控制提供参考。

以丙酮为溶剂提取纯化槐米中芦丁的工艺研究

以丙酮作为有机溶剂,采用加热回流的方法对槐米中的芦丁进行提取纯化。并对工艺条件如水浴温度、水浴时间、丙酮浓度以及料液比四个因素进行单因素试验和四因素三水平响应面试验设计的优化。通过碱溶酸沉和丙酮挥发两次重结晶析出的方法进行粗芦丁的纯化,进而采用高效液相色谱和核磁氢谱检测纯化后的芦丁样品。结果表明,响应面优化试验结果极显著,提取工艺的最佳条件为水浴时间29 min、丙酮浓度54%、料液比8.6 g/L、水浴温度70.4℃,芦丁提取率为(79.17±0.91)%。芦丁样品和标品核磁氢谱图基本一致,芦丁纯化结果为纯度为(96±0.81)%,纯品得率为(71±2.49)%。

苦豆子总碱GC-MS分析及幽门螺杆菌抑菌活性实验研究

目的基于气相色谱-质谱联用技术(gaschromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析对苦豆子中的生物碱进行定性、定量分析,获得含量较高的5种苦豆子生物碱探究其与苦豆子总碱对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床耐药株的体外抑菌功效。方法采用732强酸性阳离子交换树脂法、Hydromatrix为基质的固相萃取法和有机溶剂液液萃取法制备新疆苦豆子总碱,并用GC-MS法分析总碱中生物碱的组分及相对含量。收集上消化道疾病患者胃黏膜标本,分离、鉴定出52株Hp临床菌株,应用E-试验方法检测对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林的耐药性,对32株临床耐药株进行筛选;应用液体倍比稀释法检测经GC-MS法分析中含量较高的5种苦豆子生物碱与苦豆子总碱对32株临床耐药株的体外抑菌效果。结果GC-MS法检测苦豆子含有13种已知生物碱,其中槐定碱、槐果碱、苦参碱、异槐果碱、野啶碱、lamprolobine和槐胺碱为主要生物碱,占所检出13种生物碱中的相对百分含量分别为25.82%、5.81%、13.28%、8.02%、7.34%、4.88%和3.15%。药敏实验显示,Hp对甲硝唑、克拉霉素耐药率高,对阿莫西林敏感。GC-MS法分析含量较高的5种苦豆子生物碱与苦豆子总碱对临床耐药株体外抑菌效果显著,以苦豆子总碱最为显著,其抗Hp作用较强;苦参碱与槐果碱也存在一定的抗Hp作用;槐定碱、异槐果碱、野啶碱的抑菌效果相对较弱。结论GC-MS法可快速分析苦参碱、槐定碱等生物碱,在苦豆子、苦参及其生物碱相关药物的质量控制方面具有一定的应用价值。Hp菌株对甲硝唑耐药率高,因此不选择甲硝唑作为根除Hp感染的一线药物。在多种有效成分中苦豆子总碱在体外抗Hp效果较好,可研发成为治疗Hp感染的中药单剂或复方制剂。

苦豆子化学成分及其生物活性研究进展

综述了苦豆子的生物碱、黄酮等几类植物化学成分研究进展,描述了其活性成分的医药药理活性和杀虫、杀菌作用等农用活性等多方面的研究应用概况;简要讨论了苦豆子农用杀菌活性研究中存在的成分分离和机理研究等问题,对其广泛的应用前景和对量子农药学发展的促进作用进行了展望。

苦豆子提取物对黄瓜和番茄病原菌的抑制作用(英文)

苦豆子主要分布在我国西北沙漠地区,是一种抗逆性极强的豆科多年生药用植物。本实验采用带毒平板菌丝生长法和琼脂打孔药剂扩散法测定了苦豆子地上部分乙醇粗提物及其石油醚、氯仿、正丁醇和水层的不同极性溶剂萃取物对瓜果腐霉、黄瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、番茄早疫病菌、黄瓜角斑病菌和番茄疮痂病菌的抗菌活性。结果表明,正丁醇萃取部分和氯仿萃取部分对真菌生长有较强的抑制活性,正丁醇萃取部分对细菌亦有较强的抑制活性,推测苦豆子中的生物碱是主要的抗真菌成分,存在于正丁醇萃取部分的黄酮和三萜类配糖体等成分同时具有抗真菌和抗细菌活性。

苦豆子胶的流变性研究

本文通过浓度、温度、剪切力、pH等对苦豆子胶溶液粘度的影响及苦豆子胶与黄原胶的协效性等对其流变性进行了研究,研究表明,苦豆子胶是一种良好的增稠剂,为“非牛顿流体”,在酸和碱中非常稳定,且与黄原胶有较强的协效性,值得大力开发利用。

苦豆子浸出液对高羊茅种子萌发及幼苗生长的影响

【目的】研究苦豆子种子浸出液对高羊茅种子及幼苗的化感作用。【方法】以苦豆子种子浸出液为处理液,对高羊茅种子进行处理,测定种子发芽势、发芽率、幼苗和根系生长情况。【结果】苦豆子种子浸提液浓度对高羊茅种子的萌发有一定的抑止作用。并且随着浓度的增加,抑止作用增强;高羊茅苗期的株高、根系长随着苦豆子种子浸提液浓度的增加也呈现出逐渐降低的变化趋势;苦豆子种子浸提液浓度为0.05 g/mL时对高羊茅幼苗的高度与生长速度影响最为显著,且主要表现为对根的伸长的抑制。【结论】为伊犁河谷地区草原生态系统中苦豆子种群与禾本科植物种间关系研究奠定基础。

苦豆子种子多糖与黄原胶的协效性研究

对苦豆子(SophoraalopecuroidesL )种子多糖(苦豆子胶)与黄原胶的协效性进行了研究.结果表明,不同配比的苦豆子胶与黄原胶混合后,其协效性不同,其中苦豆子胶与黄原胶的重量比为7∶3时,二者的协效性最高,混合液的粘度为黄原胶单溶液粘度的2倍左右,混合溶液为非牛顿流体,具有良好的触变性.研究结论是:苦豆子胶可作为黄原胶的复配胶应用于食品等工业领域.