基于UPLC-Q-TRAP-MS分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后10个指标成分含量变化

目的分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后主要指标成分差异变化,并建立含量测定方法。方法采用Welch Ultimate XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,流速0.4 mL/min柱温40℃,梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测离子扫描模式(MRM)。分别对该药对单煎液、单煎合并液与合煎液中主要指标成分酸枣仁皂苷A、斯皮诺素、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、芦丁、槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-O-云香糖苷进行含量测定,并分析药对配伍前后主要指标成分的含量变化差异。结果以上10种成分在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系;精密度、重复性和稳定性RSD均良好;平均加样回收率在95.0%~102.1%,RSD为0.03%~3.7%。本次实验结果与前期试验认为酸枣仁与五味子在合煎后,主要指标成分降低保持一致性。结论多指标成分同时测定为该药对配伍质量全面控制提供新的方法并为其药效物质基础的深入研究提供依据。

酸枣仁治疗卒中后失眠药理机制及研究进展

卒中是常见的脑血管疾病之一,卒中后失眠是卒中后发病率较高的并发症,主要临床表现为卒中后出现的入睡困难、易醒、早醒等症状,其发病机制复杂且尚不完全明确,现有研究显示其与解剖部位、神经生物学因素及机体整体功能状态和社会心理学等因素有关。神经生物学因素中包含炎症介质、神经递质、脑血流量、血容量、下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能等的变化,长期的卒中后失眠严重时会引起脑血管疾病的复发,对患者的基本日常生活产生了很大的影响,中医认为卒中后失眠是中风与不寐的合病,归属于“不寐”范畴。营卫失衡、阴阳失交、气血失调、神失所司均可导致卒中后失眠。而酸枣仁作为临床中常用的中药,具有养心补肝、宁心安神、敛汗、生津止渴之功用。通过对唐宋时期医家及李济仁国医大师、闫咏梅教授等医家的临床用药规律总结,发现酸枣仁是临床上治疗卒中、卒中后睡眠障碍用药频率最高的单味中药之一,通过大量的临床及实验研究发现酸枣仁的养心安神功效确切,现代研究发现,酸枣仁的主要成分有三萜皂苷类、黄酮类、生物碱类及脂肪酸类等,其具有镇静催眠、抗抑郁、抗氧化、抗肿瘤、抗心律失常、抗心肌缺血等作用。临床上经常用于治疗失眠、焦虑、抑郁等情感障碍类精神疾病以及心血管疾病,该文对酸枣仁有效成分的药理作用及其治疗卒中后失眠的药理机制进行综述,并对酸枣仁的炮制及药对进行归纳梳理,明确酸枣仁对卒中后失眠的重要作用,以提供卒中后失眠的最佳用药选择。

白术、酸枣仁提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果研究

试验旨在研究菊科植物白术干燥根茎切片提取物(白术提取物)、鼠李科植物酸枣的种子提取物(酸枣仁提取物)单独和联合作用对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。通过微量肉汤法测定抑菌浓度和抑制率;用酶标仪测定相应OD值以检测核酸和蛋白质含量、乳酸脱氢酶(LDH)活力及碱性磷酸酶(AKP)活力,以确定对细菌细胞膜和细胞壁的影响,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDSPAGE)凝胶电泳检测金黄色葡萄球菌菌体总蛋白含量变化;用结晶紫染色法检测对细菌生物膜的抑制作用。结果表明:0.4 mg/mL白术、酸枣仁提取物单独及0.1 mg/mL二者联合作用对金黄色葡萄球菌均具有显著抑菌效果;与对照组相比,白术、酸枣仁提取物单独和联合作用均使菌液上清液OD_(260)、OD_(280)数值和AKP活力显著增加,菌体LDH活力和总蛋白含量降低,抑制了生物膜的形成。说明白术、酸枣仁提取物单独和联合作用均可显著抑制金黄色葡萄球菌,且联合作用抑菌效果显著强于各药物单独作用。

王济华运用角药治疗类风湿关节炎经验

王济华教授认为,类风湿关节炎早期多因外感风、寒、湿三邪,三者之间相互促进、互相转化,风寒表邪入里日久或郁而化热;病程日久多虚实夹杂,肝肾亏虚、气血不足,同时兼有寒湿痹阻、痰瘀互结。故王教授治疗痹证早期以祛邪散寒为主,兼顾清热利湿、化痰散结,中晚期则偏于滋养气血、补益肝肾。王济华教授运用角药治疗痹证颇有心得,组方精妙、配伍严谨,常用角药川芎-延胡索-白芍行气活血、柔筋止痛;忍冬藤-络石藤-青风藤清热通络、祛风除湿;半夏-陈皮-竹茹燥湿化痰、理气和中;白术-薏苡仁-茯苓益气健脾、利湿消肿;桑寄生-续断-杜仲滋补肝肾、强筋壮骨;酸枣仁-合欢皮-首乌藤宁心安神、解郁除烦。王教授临证时,追求阴阳调和平衡、气机升降有度,临床用药有药简力专、增效减负之功。

基于网络药理学探究“酸枣仁-柏子仁”药对治疗失眠的作用机制

目的:通过网络药理学方法探讨“酸枣仁-柏子仁”药对治疗失眠(insomnia)的作用机制。方法:基于中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)检索酸枣仁、柏子仁的活性成分及相关靶点。在GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man,OMIM)中检索失眠相关靶点。通过在线软件Venn 2.1.0将失眠相关靶点与“酸枣仁-柏子仁”活性成分相关靶点取交集,即为“酸枣仁-柏子仁”治疗失眠的潜在靶点,绘制韦恩图,并利用Cytoscape 3.8.2软件构建“中药-活性成分-疾病靶点”网络。将潜在靶点导入STRING平台,得到潜在靶点蛋白的互作关系,利用Cytoscape 3.8.2软件构建PPI网络图,并使用“Network Analyzer”插件进行拓扑分析筛选核心靶点。将潜在靶点导入David 6.8数据库进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路富集分析。结果:在TCMSP数据库中检索得到酸枣仁活性成分9个、柏子仁活性成分5个,相关靶点53个。在GeneCards数据库和OMIM数据库获得失眠相关靶点2 930个。通过在线软件Venn 2.1.0将失眠相关靶点与“酸枣仁-柏子仁”活性成分相关靶点取交集,得到23个“酸枣仁-柏子仁”治疗失眠的潜在靶点。“中药-活性成分-疾病靶点”网络拓扑分析得到关键活性成分为(S)-衡州乌药碱[(S)-coclaurine]、花生四烯酸(arachidonic acid)及酸李碱(zizyphusine)。PPI网络拓扑分析得到SLC6A4、SLC6A3、CASP3、SLC6A2、ADRA1B、PPARG、NOS3可能为“酸枣仁-柏子仁”治疗失眠的核心靶点基因。GO功能富集分析得到生物学过程57个,细胞组成8个,分子功能16个。KEGG信号通路富集分析得到15条信号通路。结论:“酸枣仁-柏子仁”药对可通过多成分、多靶点、多层次发挥对失眠的治疗作用。

酸枣仁本草考证

通过查阅历代本草医籍文献和现代文献,对酸枣仁的名称、基原、产地、用药部位、炮制及功效进行考证。经考证,酸枣仁原植物最早以“棘”记载于《诗经·凯风》,《尔雅》中开始出现“酸枣”之称,明代及以后均以“酸枣仁”作为独立中药名称记载;酸枣仁的历代主流基原为鼠李科植物酸枣Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chou,药用部位为干燥成熟种子;其产地主要集中在太行山附近,宋明推崇陕西临潼为道地,现主产于河北、陕西、山西等地;酸枣仁的炮制方法多以炒制为主;其功效最早为主心腹寒热、补中益气,唐代以后主治不得眠。酸枣仁作为一种药食同源的中药材,该文的考证结果可以为其开发提供文献支撑。

酸枣仁治疗失眠伴焦虑抑郁药理机制研究进展

失眠伴焦虑抑郁是常见的心理障碍疾病之一,两者关系密切,通常以共病形式出现。近年来,该病的发生率日趋增加,长期失眠会导致一系列的躯体和精神疾病,甚至危害生命。该病的发病机制目前尚不明确,多与下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)功能、神经递质调节、炎症反应等相关。中医认为此病归属“不寐”“郁证”“脏躁”等范畴,涉及五脏六腑,病机总属“气机失调,阴阳、脏腑失衡,心神失于濡养,营卫不和”。酸枣仁有养心补肝、宁心安神、敛汗、生津的功效,临床治疗失眠运用广泛。现代药理学研究表明,酸枣仁中含有黄酮类化合物、皂苷及三萜类化合物、酚酸化合物、维生素C、生物碱、多种氨基酸和微量元素等。并发现其可通过镇静催眠、抗焦虑、抗抑郁、调节神经递质、抑制炎症、保护脑神经等多方面同时发挥作用。该文通过查阅酸枣仁相关药理学研究文献,阐述了其有效成分的药理作用及治疗失眠伴焦虑、抑郁的药理机制,以说明酸枣仁治疗失眠伴焦虑、抑郁的积极疗效及药用价值。以期为临床使用酸枣仁治疗失眠伴焦虑、抑郁提供理论依据。

以酸枣仁、天麻为主的复方口服液改善睡眠作用机制研究

目的评价以酸枣仁、天麻为主的复方口服液改善睡眠的作用及机制。方法以酸枣仁、天麻为主的复方口服液按照低(19.5 mL/kg)、中(39 mL/kg)、高(117 mL/kg)3个剂量每天给予小鼠灌胃,阴性对照物为生理盐水,连续给药30 d后通过直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验和巴比妥钠睡眠潜伏期实验来观察小鼠睡眠相关指标,并采用ELISA法测定脑组织内GABA、5-HT、DA的水平。结果与阴性对照组相比,复方口服液3个剂量组对小鼠体质量无影响,均无直接睡眠作用,可显著延长小鼠在戊巴比妥钠睡眠实验中的睡眠时间(P<0.001或0.01),均能增加戊巴比妥钠阈下剂量诱导的小鼠睡眠发生率,均能显著缩短小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期(P<0.001)。不同剂量组均能提高小鼠脑组织内神经递质GABA(P<0.001或0.01)、5-HT(P<0.001)的水平;低、中剂量虽能提高多巴胺的含量,但差异没有统计学意义,高剂量能显著提高和多巴胺(P<0.001)的水平。结论在实验条件和所设剂量下,实验结果显示该复方口服液对睡眠具有明显的改善作用,其作用机制可能与提高脑组织中GABA、5-HT、DA的水平有关。

3种常见功能因子改善睡眠效果的比较

该文通过直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验以及巴比妥钠睡眠潜伏期实验比较了酸枣仁提取物、龙眼肉提取物和γ-氨基丁酸的改善睡眠效果。结果显示,3种功能因子所有剂量组均对直接睡眠无明显作用,对小鼠体质量也均无显著性影响,但是3种功能因子中γ-氨基丁酸高中低剂量33.3 mg/(kg·d)、16.7 mg/(kg·d)和8.3 mg/(kg·d)、酸枣仁提取物高中剂量110 mg/(kg·d)和55 mg/(kg·d)和龙眼肉低剂量组66.5 mg/(kg·d)均可显著延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间,γ-氨基丁酸对小鼠戊巴比妥钠阈下剂量催眠作用最大,12只小鼠中高中低剂量均有2只入睡,睡眠发生率达到16.67%,酸枣仁提取物高中低剂量组均可缩短巴比妥钠催眠的小鼠的入睡潜伏期,但仅高剂量组和中剂量与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。

酸枣仁中黄酮类成分的研究进展

酸枣仁具有养心补肝、宁心安神的功效,为治虚烦不眠的要药,主要含有黄酮、皂苷、生物碱、脂肪酸等成分,其中黄酮类化合物是主要药效成分之一。本文拟从化学结构、提取方法、分析方法和生物活性四个方面对酸枣仁中黄酮类成分进行归纳。酸枣仁中黄酮类成分的提取方法主要有浸提法、加热回流法、超声波辅助提取法、酶提取法等;酸枣仁已发现黄酮类成分44个,包括31个黄酮、8个黄酮醇、2个二氢黄酮和3个异黄酮;分析方法主要有紫外分光光度法、高效液相色谱法、超临界流体色谱法、色谱-质谱联用等;药理作用研究表明,酸枣仁中黄酮类成分具有镇静安眠抗抑郁、抗氧化、改善记忆、保护心脏、抗肿瘤等生物活性。本文通过对酸枣仁中黄酮类成分的化学结构、提取、分析和生物活性进行总结,以期为酸枣仁中黄酮类成分的深入开发利用提供参考。

酸枣油及酸枣浸膏降血脂和抗血小板聚集作用的实验研究

口服酸枣油或酸枣浸膏53天,可明显降低日本种雄性鹌鹑高脂模型的TC、LDL和TG,肝脂肪变性亦明显减轻。酸枣油灌胃可明显抑制大鼠的血小板聚集反应,而酸枣浸膏则无明显影响。

酸枣仁皂苷提取物的制备与酸枣仁皂苷A和B的含量测定

目的优化酸枣仁总皂苷的大孔吸附树脂纯化工艺;并进一步建立RP-HPLC法同时测定酸枣仁皂苷提取物中酸枣仁皂苷A和B的含量。方法采用单因素方法对纯化工艺条件进行优化,得到酸枣仁皂苷提取物,进而建立RP-HPLC法对酸枣仁提取物中酸枣仁皂苷A和B进行含量测定。结果最佳纯化工艺为:采用AB-8型大孔吸附树脂进行纯化,上样吸附时间为1.5 h,洗脱流速为1.0 mL.min-1,体积分数为70%的乙醇溶液洗脱160 mL。采用此纯化方法得到的酸枣仁皂苷提取物中皂苷的质量分数为52%,测得其酸枣仁皂苷A和B的含量质量分数分别为2.298%和0.789%。酸枣仁皂苷提取物中酸枣仁皂苷A和B的质量浓度分别在14.7～293.0 mg.L-1(r=0.999 7,n=6)、7.2～144.0 mg.L-1(r=0.999 6,n=6)内与峰面积呈良好线性关系;平均回收率(n=9)分别为103.7%、101.9%。结论该工艺稳定可行且提取物中皂苷含量高,具有广泛的应用前景;建立的RP-HPLC法可为酸枣仁皂苷提取物质量标准的建立提供一定依据。

酸枣仁提取物对睡眠剥夺大鼠免疫功能的影响

目的:探讨酸枣仁提取物对睡眠剥夺大鼠免疫功能的影响。方法:30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、实验组,每组各10只。除对照组外,其余两组采用多平台水环境法建立睡眠剥夺动物模型,建模同时实验组给予酸枣仁提取物,模型组与对照组给予等量生理盐水。计算大鼠脾脏指数、胸腺指数,采用MMT法评价脾淋巴细胞活性和NK细胞活性。通过旷场实验测定大鼠行为学。测定外周血CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例、CD4^+/CD8^+。采用ELISA测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-2、IL-6水平。结果:与模型组相比,实验组大鼠旷场实验水平和垂直得分、脾脏指数、胸腺指数、T淋巴细胞活性显著升高;CD4^+T淋巴细胞比例和CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比值显著升高,CD8^+T淋巴细胞比例显著降低,TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6水平均显著下降(P<0.05)。结论:酸枣仁提取物能够缓解睡眠剥夺引起的焦虑行为,通过调节T淋巴细胞亚群平衡,抑制血清TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6炎症因子释放,改善免疫功能。

微波辅助提取酸枣仁油工艺研究

应用微波辅助提取酸枣仁油,采用单因素实验和正交实验法考察了提取时间、提取温度和料液比对提取率的影响,得到了最佳提取工艺条件:提取温度为40℃,提取时间为5min,料液比为1:6。与直接加热提取法比较,微波辅助提取时间明显的缩短,提取温度也比传统方法下降15℃,所用溶剂量也较低。

酸枣仁醇提物中4个活性成分的测定

目的建立HPLC-ELSD法同时检测酸枣仁醇提物中4个活性成分的方法。方法色谱柱为Agilent TC-C18BDS(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,ELSD漂移管温度为110.5℃,气体流量为3.1 mL/min。结果 4个活性成分斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B和白桦脂酸均达到基线分离,其进样量分别在0.110～1.10、0.042～2.12、0.020～1.01、0.078～7.84μg范围内与峰面积分值呈良好线性关系,平均回收率分别为99.98%、97.80%、97.24%、95.04%(RSD≤4.3%)。结论本法灵敏度高、重现性好,可用于酸枣仁醇提物的质量控制。

超临界二氧化碳萃取酸枣仁油的指纹图谱研究

目的:建立酸枣仁有效部位的指纹图谱,为酸枣仁的质量控制提供依据。方法:采用J&W Scientific DB-WAX石英毛细管柱,120℃程序升温到220℃,FID检测器,汽化温度240℃,检测温度250℃,分流比1∶10。结果:确立了酸枣仁有效部位指纹图谱的气相分析条件,建立了酸枣仁有效部位的特征指纹图谱。结论:酸枣仁有效部位中各成分得到较好分离,可作为中药酸枣仁质量控制的依据。

多指标正交试验法优选酸枣仁药材水提取工艺

目的:以浸膏收率、总皂苷含量、斯皮诺素含量为指标,优选酸枣仁药材水提取工艺。方法:采用正交试验,考察煎煮时间、提取次数和加水倍量3个因素,对酸枣仁药材水提取工艺条件进行优化。结果:酸枣仁药材最佳水提取工艺条件为加10倍量水浸泡过夜,加热煎煮3次,每次1h。结论:该提取工艺稳定可行,重现性好,适于酸枣仁药材水提取。

基于古今医家论著对酸枣仁汤中“酸枣仁”实质的思考

本研究从《金匮要略》酸枣仁汤主治病证的病机特征,历代本草和方书中记载的酸枣仁药用的历史沿革,和酸枣仁、酸枣果肉的现代药理研究出发,对酸枣仁汤中"酸枣仁"的实质进行探讨,提出《金匮要略》酸枣仁汤中"酸枣仁"可能为"酸枣实",即酸枣的果实,这不仅对深入认识酸枣仁汤有积极意义,而且对该方的临床应用具有重要的参考价值。

酸枣仁-五味子药对提取工艺研究

目的优选酸枣仁-五味子药对的最佳提取工艺。方法采用正交试验法,以酸枣仁-五味子药对中五味子醇甲含量和水提浸膏得率为指标,采用超高液相色谱法测定五味子醇甲含量,考察加水量、提取时间、提取次数对水提取工艺的影响。结果最佳提取工艺为加10倍药材量的水,煎煮3次,每次1.5 h。结论优选的提取工艺稳定、可行。

酸枣仁总黄酮提取工艺及其预测模型研究

【目的】研究优化酸枣仁总黄酮的提取工艺。【方法】采用星点设计-效应面法,对酸枣仁总黄酮的超声提取工艺进行优化。以乙醇体积分数、液(体积,mL)料(质量,g)比、提取时间为自变量,以总黄酮提取量为因变量建立预测模型,并进行了验证。【结果】总黄酮提取量与3个影响因素不能用线性关系进行描述,采用二次多项式的拟合效果较好,复相关系数R2=0.887 9,具有较高的可信度。优选的最佳工艺为:乙醇体积分数84%,液料比40mL/g,提取时间35 min;最佳工艺验证结果与模型预测值相差2.30%,总黄酮提取率达到95.05%。【结论】星点设计-效应面法可以快速、简便地优化酸枣仁总黄酮的超声提取工艺,所建模型预测性良好,工艺稳定可行。