神经发育疾病相关Tenascin C表达的分子调控通路

胞外基质Tenascin C(TNC)是肌腱蛋白Tenascins家族的主要成员之一。TNC转录调控元件多样性,呈现为独特的细胞发育时空表达,进而参与不同神经疾病的发生。本文基于TNC基因表达元件组构与TNC蛋白合成、转运、分泌视角,探析神经发育疾病相关Tenascin C表达的分子调控通路,以期丰富神经发育相关疾病发生机制的新理解,提出以调节型胞外基质蛋白网络重构为靶向的诊疗新策略。

血管紧张素Ⅱ上调人肾小球系膜细胞硬化相关基因的克隆

目的 筛选和鉴定培养的人肾小球系膜细胞（MsC）在血管紧张素Ⅱ（Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ）作用下,产生以纤连蛋白（Fibronectin,FN）为代表的细胞外基质成分的过程中上调表达的基因,寻找Ang Ⅱ致细胞外基质堆积作用的相关基因,为探讨Ang Ⅱ在肾小球硬化发展过程的分子机制奠定基础。方法 人MsC经Ang Ⅱ（10-6mol/L）刺激24h后,采用抑制性消减杂交（suppressionsubtractive hybridization,SSH）获得Ang Ⅱ相关的差异表达的cDNA,经纯化克隆到pGEM-Teasy Vector并转化大肠杆菌;随机选择120个克隆,经反向Northern筛选上调表达的基因cDNA片段,并以Northern杂交验证,然后进行DNA序列测定和同源性比较。采用5＇-和3＇-RACE及长距离PCR的方法获得新基因的全长cDNA。结果 在120个随机选择的克隆中,反向Northern结果表明有55个克隆表达明显上调。挑选其中20个克隆进行DNA序列测定,结果显示18个为独立的基因片段序列（有两个序列为双拷贝）,其中15个为已知基因,包括细胞外基质成分:如血小板反应素Ⅰ、Ⅰ型胶原α2;细胞骨架及结合蛋白:如平滑肌肌动蛋白α、钙调蛋白1、γ-胞浆型肌动蛋白等;合成和代谢相关蛋白:如醛缩酶A、延长因子1-γ、arnesyl pyrophosphate synthetase等;蛋白分解相关蛋白:如组织蛋白酶。