重组玉米f型和m型硫氧还蛋白的功能确定及其靶向蛋白的捕获

RT-PCR从玉米幼叶总RNA中克隆f型和m型硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)的编码基因,分别将两种类型Trx活性中心的第二个保守Cys残基定点突变成Ser残基和Ala残基。在大肠杆菌分别重组表达和纯化了含组氨酸标签的Trx及其突变体蛋白,SDS-PAGE显示纯化的蛋白显示一条主带,蛋白分子量分别估计为f型Trx为18kDa,m型Trx为14kDa;纯化的含有SUMO标签融合Trx,用SUMO专一性SUMO水解酶Ulp除去SUMO,等点聚焦电泳显示m型和f型Trx的等电点分别为4.6和5.9。m型Trx比f型Trx有更强的还原胰岛素能力,而突变体蛋白几乎没有还原能力。用Cys残基专一性标记化合物AMS标记Trx,显示野生型Trx有氧化还原态,而突变体蛋白仅有还原态。SDS-PAGE电泳显示固定化的f型Trx突变体比m型Trx突变体捕获的玉米幼叶靶蛋白更具有多样性。

拟南芥硫氧还蛋白M1型基因(AtTRX m1)与环境逆境之间的关系

硫氧还蛋白家族是约12 kD的小分子蛋白质,含有高度保守的活性反应位点WCG/PPC,催化硫醇—二硫键相互交换,调节细胞内的氧化还原作用。在本研究中,通过RT-PCR法获得目的基因拟南芥硫氧还蛋白M1型基因 (AtTRX m1, GenBank Accession No. At1g03680)。通过Northern杂交分析拟南芥悬浮细胞系在 100 mmol/L NaCl、10mmol/L NaHCO3、50μmol/L ABA、10mmol/L H2O2 等逆境处理下mRNA表达水平的变化和硫氧还蛋白 M1 型转基因植株对NaCl、NaHCO3盐及ABA逆境的抗性分析,表明硫氧还蛋白M1型基因与生物环境胁迫有一定的相关性,尤其是氧化胁迫,能够增强植物对逆境的耐受力。从而为进一步研究硫氧还蛋白基因家族与逆境之间的相关作用奠定了基础。

T2DM患者外周血氧化应激变化及其与合并NAFLD的关系研究

目的检测2型糖尿病(T2DM)患者外周血氧化应激变化,并分析其与合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的关系。方法选取本单位2016年1月至2017年12月收治的133例T2DM患者,随访5年,统计NAFLD发生率。根据是否发生NAFLD记为发生组(n=98)和未发生组(n=35),比较2组患者一般资料和外周血超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)水平;采用Logistic回归分析探讨T2DM患者并发NAFLD的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血SOD、MDA、GSH-PX、TXNIP水平单独与联合对T2DM患者并发NAFLD的预测价值。结果T2DM患者中NAFLD发生率为73.68%(98/133);NAFLD发生患者外周血MDA、TXNIP水平均高于NAFLD未发生患者(P<0.05),SOD、GSH-PX水平低于NAFLD未发生患者(P<0.05);病程>5年,未进行胰岛素降糖,空腹血糖,外周血SOD、MDA、GSH-PX、TXNIP水平均是T2DM并发NAFLD的影响因素(OR=3.062、3.725、4.350、0.649、4.328、0.551、4.697,P<0.05);外周血SOD、MDA、GSH-PX、TXNIP水平联合预测T2DM并发NAFLD的灵敏度均高于单独预测(P<0.01),AUC均高于单独预测(P<0.05),特异度均与单独预测差异无统计学意义(P>0.05)。结论外周血氧化应激水平升高可增加T2DM并发NAFLD的风险,外周血SOD、MDA、GSH-PX、TXNIP水平联合预测并发NAFLD的效能高。

低硒大鼠心肌线粒体型硫氧还蛋白还原酶的活性和表达

目的探讨低硒状态下大鼠心肌线粒体型硫氧还蛋白还原酶(TR2)的活性和表达变化,分析体内硒水平改变对TR2活性的影响及其可能的机制。方法用低硒饲料喂养断乳2周的Wistar大鼠14周,分别采用生物化学方法、Western blot和Northern blot杂交检测心肌组织中TR2的活性改变及TR2蛋白、基因表达变化。结果低硒组大鼠心肌TR2活性降低至对照组的69.3%,差异有非常显著意义。蛋白杂交的峰面积密度扫描结果显示,常硒组为3 538,低硒组为2 167。Northern blot结果显示,低硒组与对照组差异无显著意义。结论低硒能够降低心肌TR2的活性和蛋白表达水平,但并不影响此酶的基因表达。提示低硒导致心肌TR2活性降低可能是由于TR2蛋白合成过程中SeCys插入减少所致。

新诊断2型糖尿病患者血清硫氧还蛋白、硫氧还蛋白相互作用蛋白与颈动脉粥样硬化的相关性

目的探讨新诊断2型糖尿病(T2DM)患者血清硫氧还蛋白(Trx)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)水平与颈动脉粥样硬化(CAS)的相关性。方法选取2014年2月-2015年11月于河北省唐山市工人医院内分泌科就诊的新诊断T2DM患者160例作为病例组。根据颈动脉超声检查结果将患者分为T2DM伴CAS组(CAS组,n=65例)和T2DM不伴CAS组(NCAS组,n=95例)。同时从医院健康体检中心选取非糖尿病健康人群140例作为正常组。记录其年龄、性别、体重指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP),收集其临床检验结果,包括空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(Hb A1C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、同型半胱氨酸(Hcy),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清Trx、TXNIP含量,采用胰岛素还原法检测血清Trx活性。结果与正常组比较,T2DM患者FPG、Hb A1c、HOMA-IR、Trx、TXNIP水平升高,Trx活性下降(均P<0.05);T2DM患者CAS组较NCAS组年龄较大,FPG、Hb A1c、SBP、Trx、TXNIP水平较高,Trx活性下降(均P<0.05);在T2DM患者中,Trx与Hb A1c呈正相关,TXNIP与Hb A1c、HOMA-IR呈正相关,Trx活性与TXNIP呈负相关(均P<0.05);在T2DM患者中,年龄、Hb A1c、Trx、TXNIP及Trx活性为合并CAS的影响因素,其中年龄(OR=1.134,P=0.032)、Hb A1c(OR=1.275,P=0.021)、Trx(OR=1.532,P=0.015)、TXNIP(OR=1.731,P=0.005)为CAS发生的危险因素,而Trx活性(OR=0.507,P=0.002)为CAS发生的保护因素。结论新诊断T2DM患者血清Trx、TXNIP、Trx活性与其CAS相关,提示Trx系统可能参与了CAS的发生及发展。

2型糖尿病患者检测血清硫氧还蛋白相互作用蛋白与唾液酸的临床价值

目的探讨血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin interacting protein,TXNIP)诊断与其他血液学指标联合诊断2型糖尿病的价值及临床意义.方法回顾性分析2型糖尿病患者(270例)与同时期健康体检者(73例)血清TXNIP水平(ELISA法)、一般临床资料和相关血液学指标.结果2型糖尿病组血清TXNIP与唾液酸(SA)水平显著高于健康对照组(P<0.01).ROC曲线分析结果显示:血清TXNIP与SA单独诊断2型糖尿病的线下面积AUC分别为0.606(敏感度0.815,特异性0.438,约登指数0.253,P=0.003)与0.646(敏感度0.632,特异性0.616,约登指数0.248,P=0.000).TXNIP联合SA、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、收缩压等联合诊断2型糖尿病的线下面积AUC=0.749(敏感度0.494,特异性0.903,约登指数0.397),差异具有统计学意义(P=0.000).结论血清TXNIP检测可对2型糖尿病诊断提供一定的参考价值,同时为预防和治疗2型糖尿病的分子生物学靶点提供了方向.

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者血糖、血脂和硫氧还蛋白互作蛋白水平研究及相关性分析

目的研究2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者血糖、血脂、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)水平,并探讨其相关性。方法 102例非酒精性脂肪肝患者分为血糖正常组(空腹血糖<6.1 mmol/L,餐后2 h血糖<7.8 mmol/L)、糖耐量异常组(空腹血糖6.1~6.9 mmol/L,或餐后2 h血糖7.8~11.0 mmol/L)、2型糖尿病组(空腹血糖≥7.0 mmol/L,餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L)。观察3组患者血糖(空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白)、空腹胰岛素、血脂[低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)]、TXNIP水平,并对其进行相关性分析。结果糖耐量异常组和2型糖尿病组空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素水平均高于血糖正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。2型糖尿病组空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白水平均高于糖耐量异常组,差异有统计学意义(P<0.05),2组空腹胰岛素水平比较,差异无统计学意义(P<0.05)。2型糖尿病组LDL-C、TG、TC水平高于糖耐量异常组和血糖正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。糖耐量异常组TG、TC水平高于血糖正常组,差异有统计学意义(P<0.05),糖耐量异常组LDL-C水平高于血糖正常组,但差异无统计学意义(P>0.05)。3组HDL-C水平比较,差异无统计学意义(0P>0.05)。糖耐量异常组、2型糖尿病组TXNIP水平高于血糖正常组,2型糖尿病组TXNIP水平高于糖耐量异常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析表明,TXNIP水平与空腹血糖、糖化血红蛋白、餐后2 h血糖、空腹胰岛素、LDL-C、TG、TC水平呈正相关(r值分别为0.818、0.875、0.202、0.689、0.849、0.674,P<0.05)。以TXNIP为应变量,空腹血糖、糖化血红蛋白、餐后2 h血糖、空腹胰岛素、LDL-C、HDL-C、TG、TC为自变量进行多重线性逐步回归分析,结果显示,在排除多种因素相互影响后,TXNIP与餐后2 h血糖、LDL-C、空腹血糖呈正相关(P<0.05)。结论合并非酒精性脂肪肝糖耐量异常和2型糖尿病患者均有明显的血糖升高和血脂代谢紊乱,TXNIP与血糖、LDL-C有相关性,可能参与了2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的发病过程。

硫氧还蛋白相互作用蛋白在2型糖尿病患者血清中的变化及临床意义

目的本研究拟分析血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)在2型糖尿病(T2DM)患者血清中的变化规律。方法收集2013年11月至2014年7月在解放军总医院内分泌科住院、明确诊断为2型糖尿病患者(270例)与同时期健康体检者(73例)血清,分别检测血清TXNIP(ELISA法)、血清葡萄糖(Glu)、糖化血红蛋白(HbA1c)等指标。结果①2型糖尿病慢性并发症患病率为视网膜病变20.5%、糖尿病肾病20.1%、神经病变34.3%、高血压50.4%、冠心病12.6%。②血清TXNIP水平在年龄与并发症分组中差异具有统计学意义(P<0.05)。在年龄分组中,年龄<45岁组血清TXNIP水平显著高于年龄45~60岁组(P=0.026),年龄>60岁组血清TXNIP水平显著高于年龄45~60岁组(P=0.021),其余无统计学差异。在并发症分组中,D组TXNIP水平显著高于A组(P=0.025),C组TXNIP水平显著高于E组(P=0.025),D组TXNIP水平显著高于E组(P=0.002),D组TXNIP水平显著高于F组(P=0.045),G组TXNIP水平显著高于E组(P=0.028)。③血清TXNIP水平随Glu与HbA1c分层变化趋势呈波动状态。④相关性分析显示,血清TXNIP与身体质量指数(BMI)呈正相关(r=0.160,P=0.009),与血小板(PLT)呈负相关(r=-0.125,P=0.041)。结论血清TXNIP水平改变与2型糖尿病慢性并发症密切相关,在2型糖尿病及其血管并发症中起着重要的作用。控制血清TXNIP水平可能有助于控制2型糖尿病患者血管并发症的发生与发展。

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者炎性因子、氧化应激、硫氧还蛋白互作蛋白水平研究及相关性分析

目的研究2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者炎性因子、氧化应激、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)水平,并探讨其相关性。方法 102例非酒精性脂肪肝患者分为血糖正常组(空腹血糖<6.1 mmol/L,餐后2 h血糖<7.8 mmol/L)、糖耐量异常组(空腹血糖6.1~6.9 mmol/L,或餐后2 h血糖7.8~11.0 mmol/L)、2型糖尿病组(空腹血糖≥7.0 mmol/L,餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L)。观察3组患者炎性因子[C-反应蛋白(CRP)、白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脂联素]、氧化应激[还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶T-SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)]、TXNIP水平,并对其进行相关性分析。结果糖耐量异常组和2型糖尿病组CRP、IL-6、TNF-α水平均高于血糖正常组,脂联素水平低于血糖正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2型糖尿病组CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于血糖正常组和糖耐量异常组,脂联素水平低于血糖正常组和糖耐量异常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。糖耐量异常组IL-1β水平与血糖正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。糖耐量异常组、2型糖尿病组GSH水平高于血糖正常组,T-SOD、GSH-Px、CAT水平低于血糖正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2型糖尿病组T-SOD、GSH-Px、CAT水平低于糖耐量异常组,差异均有统计学意义(P<0.05),2组GSH水平比较,差异无统计学意义(P<0.05)。糖耐量异常组、2型糖尿病组TXNIP水平高于血糖正常组,2型糖尿病组TXNIP水平高于糖耐量异常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析表明,TXNIP水平与CRP、IL-6、TNF-α、GSH水平呈正相关,与脂联素、T-SOD、GSH-Px和CAT呈负相关(P<0.05)。以TXNIP为应变量,CRP、IL-6、TNF-α、GSH、脂联素、T-SOD、GSH-Px和CAT为自变量进行多重线性逐步回归分析,结果显示,在排除多种因素相互影响后,TXNIP与CRP、IL-6和TNF-α呈正相关(P<0.05)。结论合并非酒精性脂肪肝糖耐量异常和2型糖尿病患者均有明显的炎性反应,且有氧化应激损伤,TXNIP可能参与了2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的发病过程。

高体积分数氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞硫氧还蛋白及其还原酶表达的影响

目的探讨高体积分数氧(高氧)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)硫氧还蛋白(Trx)及硫氧还蛋白还原酶(TrxR)表达的影响。方法无菌条件下取孕19 d SD大鼠的胎鼠肺组织,剪碎。采用1 g/L胰酶和1 g/L胶原酶消化19 d胎鼠肺组织块,经差速离心和反复贴壁法,分离、纯化、原代培养胎鼠AECⅡ,待其生长至亚融合状态时,随机分为空气和高氧组。于培养箱内静置30 min后,空气组置于同一室内空气中,高氧组通以1 000 mL/L纯氧(2 L/min)10 min;然后密封培养瓶,置培养箱中培养。二组分别培养12、24、48 h,倒置相差显微镜下观察高氧对其细胞形态及活性的影响;并采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测其Trx mRNA和TrxR mRNA表达。采用SPSS 13.0软件进行组间两样本均数t检验。结果细胞爬片上AECⅡ纯度为(94±2)%,表明所获细胞适合研究使用。与空气组比较,随时间延长,高氧暴露各时间点AECⅡ生长状态明显不良;悬浮细胞增多,但大多数细胞仍具有活力;高氧暴露可促使AECⅡTrx mRNA、TrxR mRNA表达增加,且二者分别于24 h(t=2.471 P=0.033)和48 h(t=2.916 P=0.015)表达最强。结论高氧暴露可促使胎鼠AECⅡTrx mRNA和TrxR mRNA表达上调;Trx和TrxR的表达上调可能是高氧肺损伤的重要保护作用机制之一。

m型硫氧还蛋白对马铃薯Y病毒侵染烟草的影响

为进一步明确病毒与寄主间的相互作用关系,通过同源比对在烟草细胞中克隆到具有m型硫氧还蛋白(m-type thioredoxin)特征的基因,暂命名为Nt Trm。利用原生质体瞬时转化技术、病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)、半定量-PCR以及Northern blot检测技术研究Nt Trm的表达以及Nt Trm表达与PVY积累的关系。结果表明,在PVY接种10 d后红花大金元叶片中Nt Trm表达明显上调;在本氏烟草叶片中Nt Trm下调显著促进了PVY在烟草叶片中的积累;而在烟草原生质体中Nt Trm过量表达则会明显抑制病毒RNA的积累。初步说明烟草细胞内编码m型硫氧还蛋白的基因受PVY侵染而被诱导表达,这类基因的上调表达可能影响PVY在烟草细胞中的侵染。

硫氧还蛋白相互作用蛋白联合瞬时弹性成像技术对2型糖尿病伴NAFLD肝纤维化的诊断价值

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是以肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的代谢性疾病。研究显示,NAFLD与2型糖尿病关系密切,胰岛素抵抗是NAFLD发病的主要危险因素,而绝大多数2型糖尿病的发病机制与胰岛素抵抗相关^([1])。硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)表达增强会导致机体胰岛素抵抗和氧化应激^([2])。鉴于TXNIP可能在2型糖尿病合并NAFLD发生发展中有着重要作用,持续监测其水平可能对于疾病的控制非常重要。瞬时弹性成像技术作为可定量评价肝脏组织硬度的重要方法,在NAFLD肝纤维化的诊断、疗效判定及转归方面都有重要的价值^([3])。基于此,本研究采用TXNIP联合瞬时弹性成像技术作为2型糖尿病伴NAFLD肝纤维化患者诊断指标和方法,研究其对2型糖尿病伴NAFLD肝纤维化患者的临床诊断意义,报道如下。

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者氧化应激、炎性因子和硫氧还蛋白水平的检测价值

目的:探讨2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者氧化应激、炎症因子和硫氧还蛋白水平检测价值。方法:回顾性分析我院患者的临床资料,设2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者40例作为干预组,并将同期非酒精性脂肪肝患者40例作为对照组,比较两组患者氧化应激指标、炎性因子及硫氧还蛋白水平。结果:干预组患者CAT、SOD水平低于常规组,GSH高于常规组(P<0.05)。干预组患者TNF-α、CRP、IL-6水平均高于常规组(P<0.05)。干预组患者硫氧还蛋白水平显著低于常规组(P<0.05)。结论:2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者具有明显氧化应激损伤及炎症反应,同时硫氧还蛋白水平显著升高。

基于TXNIP/NLRP3炎性小体通路研究芪归通络颗粒对2型糖尿病大鼠坐骨神经的保护作用

目的:基于硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3炎性小体通路研究芪归通络颗粒对2型糖尿病大鼠坐骨神经的保护作用及潜在机制。方法:90只雄性SD大鼠随机选取10只为空白组,其余大鼠采取高脂饲料喂养联合STZ腹腔注射方法构建2型糖尿病周围神经病变大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、硫辛酸组(60 mg/kg)、芪归通络颗粒高、中、低剂量组,剂量分别为9、4.5、2.25 g/(kg·d)。各给药组给予相应剂量药物灌胃,持续12周。实验过程中观察大鼠一般状态及血糖水平;处死前检测大鼠机械痛阈值(PWMT)和坐骨神经运动传导速度(MNCV);通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清炎症因子白介素(IL)-1β、IL-18、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察坐骨神经形态,Western blot检测坐骨神经组织TXNIP/NLRP3通路相关蛋白表达水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠血糖、IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α、COX-2、iNOS明显升高(P<0.05),PWMT和MNCV明显下降(P<0.05),坐骨神经TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白相对表达显著上调(P<0.05)。与模型组比较,用药治疗组的PWMT和MNCV明显增加(P<0.05),TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白相对表达显著下调(P<0.05),血清IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α、COX-2、iNOS水平下降(P<0.05),坐骨神经病理形态明显改善。结论:芪归通络颗粒可增强2型糖尿病大鼠的坐骨神经功能,改善糖尿病周围神经病变,其潜在作用机制可能与抑制TXNIP/NLRP3炎性小体通路的激活有关。

血清Pref-1、Trx1与2型糖尿病患者认知功能障碍的关系

目的 探讨血清前脂肪细胞因子1(preadipocyte 1,Pref-1)、硫氧还蛋白1(thioredoxin 1,Trx1)与2型糖尿病患者认知功能障碍的关系。方法 选取2019-08/2022-08月作者医院收治的116例2型糖尿病患者作为研究组,另外选取同时期来作者医院体检的150例健康人作为健康组。根据2型糖尿病患者是否合并认知功能障碍分为非认知障碍组(n=84)和认知障碍组(n=32)。采用酶联免疫吸附法检测血清Pref-1、Trx1水平;采用Pearson相关分析探讨Pref-1、Trx1与认知功能的相关性;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估血清Pref-1、Trx1对2型糖尿病患者认知功能障碍的预测价值;采用多因素Logistic回归分析探讨2型糖尿病患者认知功能障碍的影响因素。结果 健康组血清Pref-1水平高于研究组,Trx1水平低于研究组(P均<0.01)。单因素分析显示,非认知障碍组病程、空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)、糖化血红蛋白、空腹胰岛素、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)与认知障碍组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。非认知障碍组血清Pref-1水平高于认知障碍组,Trx1水平低于认知障碍组(P均<0.01)。相关分析显示,血清Pref-1与蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment, MoCA)评分呈正相关(r=0.416,P<0.001),血清Trx1与MoCA评分呈负相关(r=-0.325,P<0.001)。多因素回归分析显示,病程≥7年(OR=2.261,95%CI:1.552~3.295)、糖化血红蛋白≥7.32%(OR=2.092,95%CI:1.467~2.982)、Pref-1<1.43μg/L(OR=3.031,95%CI:1.943~4.730)、Trx1≥5.62 ng/ml(OR=2.568,95%CI:1.681~3.921)是2型糖尿病患者认知功能障碍的影响因素。血清Pref-1、Trx1预测2型糖尿病患者认知功能障碍的AUC为0.834(95%CI:0.783~0.885)、0.775(95%CI:0.724~0.826),二者联合检测的AUC最高为0.916(95%CI:0.855~0.957)。结论 血清Pref-1降低、Trx1升高与2型糖尿病患者认知功能障碍有关,二者可作为评估2型糖尿病患者认知功能障碍的生物学指标,有临床推广应用的价值。

血清白脂素、CTRP9、TXNIP与2型糖尿病视网膜病变的相关性分析

目的探讨血清白脂素、Clq/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)与2型糖尿病视网膜病变的相关性分析。方法选取2020年7月至2022年8月诊治的150例2型糖尿病视网膜病变作为研究对象,并设立为观察组,同期选取150例单纯2型糖尿病患者设立为对照组,并根据严重程度将观察组分为增生性糖尿病视网膜病变(PDR)组(n=62)和非增生性糖尿病视网膜病变(NPDR)组(n=88),对比血清白脂素、CTRP9、TXNIP水平。结果观察组的白脂素、CTRP9均低于对照组,而TXNIP高于对照组(t=7.431、5.963、10.425,P<0.05)。PDR组的白脂素、CTRP9低于NPDR组,而TXNIP高于NPDR组(t=4.564、8.808、5.549,P<0.05)。Kendall's tau-b相关性分析显示,血清白脂素、CTRP9与视网膜病变严重程度呈正相关,TXNIP与视网膜病变严重程度呈负相关(r=0.289、0.510、0.344,P<0.05)。ROC曲线分析显示,白脂素、CTRP9、TXNIP预测2型糖尿病患者并发视网膜病变的AUC值分别为(0.707、0.711、0.782,P<0.05);敏感度分别为94.00%、62.00%、58.00%;特异度分别为49.30%、871.30%、92.00%。结论血清白脂素、CTRP9、TXNIP在2型糖尿病视网膜病变患者呈异常表达趋势,检测其水平变化对及时发现2型糖尿病患者并发视网膜病变具有重要意义。

猪链球菌2型硫氧还蛋白还原酶介导细菌应激与致病作用

【背景】硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TRR)是硫氧还蛋白系统关键组成部分,对病原菌应对体内外氧化应激、调节细菌稳态和介导致病过程具有重要作用。【目的】探究硫氧还蛋白还原酶TRR在人畜共患猪链球菌2型感染过程中参与的生物学效应。【方法】同源重组法构建猪链球菌2型硫氧还蛋白还原酶trr基因缺失株(Δtrr)及回补株(cΔtrr),通过细菌染色、点板计数、体外细胞和动物感染模型等试验比较分析trr基因对细菌形态、抗应激反应及致病过程的影响。【结果】缺失trr对猪链球菌2型形态与生长特性的影响不大,但可增强细菌抗热应激、氧化应激和酸应激能力,缺失株对上皮细胞黏附力下降,侵袭进入脑血管内皮细胞作用显著降低,易于被吞噬细胞吞噬清除,对小鼠模型致病效应显著减弱。【结论】猪链球菌2型TRR因子参与细菌应激反应,介导细菌黏附、侵袭等致病过程,是猪链球菌2型新的潜在毒力因子。

硫酸锌诱导金属硫蛋白对阿霉素致心脏氧自由基产生的影响

目的:研究硫酸锌诱导金属硫蛋白(MT)对阿霉素(DOX)致氧自由基产生的影响。方法:雄性野生型小鼠(MT+/+)及敲除MT基因的转基因小鼠(MT-/-)随机分成4组,即对照组、DOX组、锌预处理组、锌预处理+DOX组。动物单次腹腔注射DOX(15 mg.kg-1)或生理盐水(NS),此前24 h及48 h分别给予锌(ZnSO4,20 mg.kg-1,s.c.)或NS预处理。给药4 d后测定心脏组织超氧阴离子(O2.-)水平及还原型谷胱甘肽(GSH)含量,Westernblot检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达情况。结果:DOX能显著增加MT+/+小鼠及MT-/-小鼠心脏组织中O2.-的生成,耗竭GSH,上调eNOS的表达水平,而且MT-/-小鼠变化更为明显。Zn预处理能显著降低DOX致MT+/+小鼠O2.-生成增加以及GSH耗竭,抑制DOX诱导的eNOS表达增强,但在MT-/-小鼠中无此效应。结论:MT可抑制DOX致氧自由基产生增加及GSH耗竭,此效应可能与eNOS表达改变有关。

低温处理对家蚕滞育卵还原型与氧化型谷胱甘肽比值的影响

还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值反映出细胞的氧化胁迫状况。利用分光光度法分别测定家蚕滞育卵持续25℃保护和经5℃低温处理后卵内谷胱甘肽代谢的变化,探讨蚕卵的谷胱甘肽代谢与滞育解除的关系。与持续25℃滞育温度条件下的蚕卵相比,5℃低温解除滞育的处理显著提高了蚕卵总谷胱甘肽含量、GSSG含量和硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性,而显著降低了GSH含量以及GSH/GSSG比值。结果表明,低温处理过程中,滞育卵TPX活性显著升高,间接地促进GSH氧化为GSSG,使GSH/GSSG比值显著下降,由此导致蚕卵处于过氧化状态。