尘螨主要变应原Der f1融合基因真核表达载体的构建

目的:构建尘螨主要变应原Derf1融合基因真核表达载体,为进一步转染真核细胞表达融合蛋白奠定基础。方法:根据Genebank中Derf1基因的核酸序列(AB034946),设计引物,采用PCR法,从保存的JM109工程菌中扩增Derf1编码基因,将其连接到小鼠IL-12(mIL-12)基因3′端,组成融合基因mIL-12/Derf1,再克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/myc-hisA上。结果:经测序、比对,内切酶酶切,证实融合基因片段成功连接并亚克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/myc-hisA。结论:成功构建了尘螨变应原Derf1和小鼠IL-12融合基因的真核表达载体,为尘螨变应原Derf1融合蛋白的表达奠定了基础。