FR/MA抑制PG-HUVEC细胞黏附及黏附分子表达的研究

目的:观察金荞麦抗肿瘤提取物(FR)、苦参抗肿瘤提取物(MA)对肺癌PG细胞-血管内皮(HU-VEC)黏附作用的影响,并探讨其抗肿瘤转移机制。方法:运用MTT检测FR/MA单药及联合用药对高转移肺癌PG细胞增殖的作用,以荧光标记PG-HUVEC黏附模型考察FR/MA单药及联合用药抗肿瘤细胞的黏附能力,用Western blotting、流式细胞仪检测FR/MA单药及联合用药对黏附分子表达的影响。结果:FR/MA单药及联合用药均剂量依赖性抑制PG细胞增殖(P<0.05);在一定浓度范围内,FR/MA单药及联合用药显著抑制PG-HU-VEC相互黏附能力并有剂量依赖性(P<0.01);FR/MA联合用药显著抑制黏附分子CD44、CD49、ICAM-1及E-selectin的表达(P<0.01)。结论:FR/MA具有抗PG-HUVEC相互黏附作用;降低细胞表面黏附分子的表达,抑制肿瘤细胞在血管壁着床可能是其抗肿瘤转移的作用机制之一。

FR/MA对HepG2肝癌细胞侵袭能力的影响

目的探讨金荞麦抗肿瘤提取物(FR)、苦参抗肿瘤提取物(MA)对肝癌细胞HepG2侵袭能力的影响及其可能作用机制。方法MTT法检测FR/MA单药及联合用药对HepG2细胞增殖的影响;Transwell侵袭小室测定法检测经FR/MA单药及联合用药处理过的细胞其侵袭能力的改变;RT-PCR分析侵袭转移相关基因nm23-H1、Tiam-1表达的变化。结果FR/MA单药及联合用药均能明显抑制HepG2的增殖,明显降低细胞侵袭能力。同时细胞内nm23-H1基因mRNA水平有不同程度的升高,而Tiam-1基因mRNA水平有不同程度的降低。结论FR和MA能够抑制HepG2侵袭,可能通过上调nm23-H1基因和下调Tiam-1基因的表达而发挥抗肿瘤侵袭作用。

金荞麦提取物改善肠易激综合征大鼠内脏痛觉过敏的效果及其机制

目的观察金荞麦提取物(Fag)对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏痛觉过敏的影响及其机制。方法采用腹壁撤退反射(AWR)评分观察Fag(6、24 g·kg-1)口服给药两周后的IBS大鼠模型的内脏痛觉过敏的变化,并用免疫荧光法观察腰骶段脊髓背根神经(DRG)的辣椒素受体亚型TRPV1表达水平;采用细胞膜片钳记录Fag(0.1、0.3、1、3 g·L-1)对辣椒素(CAP)激活大鼠的DRG细胞TRPV1电流(ITRPV1)的影响。结果 Fag 24 g·kg-1在体内可显著降低升高的IBS大鼠AWR评分,IBS大鼠腰骶段DRG的TRPV1表达增高;Fag 6、24 g·kg-1干预后DRG的TRPV1表达下降;体外0.1、0.3、1、3 g·L-1Fag可浓度依赖地抑制CAP激活的分离DRG神经元ITRPV1,IC50为0.83 g·L-1。结论 Fag可通过下调IBS大鼠TRPV1受体表达改善大鼠痛觉过敏,可抑制DRG神经元ITRPV1峰值,调节痛觉信号传递。

金荞麦提取物对D-IBS大鼠排便功能及离体结肠的作用和机制

目的探讨金荞麦醇提取物(FAE)干预腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠及离体结肠肠管运动功能作用及机制。方法用新生期乳大鼠母源性分离(NMS)联合醋酸(AA)灌肠法制作D-IBS模型,动物随机分为干预前对照组(10只,不灌胃)、对照盐水组(8只,生理盐水灌胃)、干预前模型组(10只,不灌胃)、模型盐水组(8只,生理盐水灌胃)、FAE 6 g/kg组(8只,FAE灌胃)、FAE 24 g/kg组(8只,FAE灌胃),匹维溴铵组(8只,0.02 g/kg灌胃),灌胃每天1次,共2周。用腹壁撤退反射(AWR)评估结肠高敏感性变化,用Bristol大便性状评分评估大鼠粪便稀便级并计算其粪便湿重。同时体外观察了不同浓度FAE和匹维溴铵(0.02μg/m L)对大鼠离体结肠自发收缩、乙酰胆碱(Ach)引发的痉挛性收缩以及对肠内Ca2+通道的作用。结果与干预前对照组比较,干预前模型组痛觉压力阈值及最大耐受压力值明显降低(P<0.05),粪便稀便级及粪便湿重明显增高(P<0.01);与对照盐水组比较,模型盐水组痛觉压力阈值及最大耐受压力值明显降低(P<0.05),粪便稀便级及粪便湿重明显增高(P<0.01);与模型盐水组比较,FAE24 g/kg组及匹维溴铵组痛觉压力阈值均明显升高(P<0.05)。FAE6 g/kg组粪便湿重、FAE24 g/kg组与匹维溴铵组粪便稀便级及粪便湿重均明显下降(P<0.05)。FAE(30、100、300、1 000、3 000μg/m L)及匹维溴铵对肠管自发收缩均有显著的抑制效应(P<0.05,P<0.01),且FAE(30,100,300×10-6g/m L)对Ach引发的痉挛性收缩及Ca Cl2促发的张力性收缩均有剂量依赖地松弛作用(P<0.05,P<0.01),匹维溴铵亦能显著抑制Ach及Ca Cl2引发的收缩作用(P<0.01)。结论 FAE有效成分可能通过Ca2+通道竞争拮抗作用,剂量依赖地抑制结肠运动亢进,进而参与改善IBS模型的排便功能及肠痉挛引起的痛觉过敏。

金荞麦提取物抑制腹泻型肠易激综合征大鼠的肠运动功能

目的探讨金荞麦提取物(Fag)对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠的肠运动功能的影响。方法用新生期乳大鼠母源性分离(NMS)联合醋酸(AA)灌肠法制作D-IBS模型;造模成功后,成年IBS大鼠给予Fag6g/kg和Fag24g/kg灌胃2周;用双歧三联活菌胶囊(Bifico)作为阳性对照药物,以生理盐水灌胃作为正常对照。用腹壁撤退反射(AWR)评分评估结肠敏感性变化,用Bristol大便性状评分评估大鼠粪便稀便级并计算其粪便颗粒数的变化。结果 D-IBS模型大鼠在20、40及60mmHg压力下AWR、Bristol评分及粪便颗粒数均增加(P<0.05或P<0.01),24g/kg的Fag干预后与Bifico同样能明显降低模型大鼠的AWR评分和改善排便异常(P<0.05或P<0.01)。结论 Fag可改善D-IBS大鼠肠功能亢进引发的痛觉过敏和腹泻。