远端上游元件结合蛋白1的生物学功能

远端上游元件结合蛋白1(far upstream element binding protein 1,FUBP1)通过特异性结合远端上游元件(upstream element,FUSE)调控原癌基因c-Myc的转录。FUBP家族包括FUBP1、FUBP2、FUBP3及FUBP4,其序列具有高度同源性,但功能各不相同。FUBP1蛋白由3个结构域构成,具有两亲性螺旋结构的N端、富含酪氨酸的C端以及1个DNA结合区域。生理状态下,FUBP1蛋白定位于细胞核。除了调控c-Myc转录外,FUBP1还可结合RNA,参与调控mRNA稳定性、病毒复制及RNA的剪接。

远端上游元件结合蛋白1与消化道肿瘤的研究进展

远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)是一种单链核酸结合蛋白,由有螺旋结构的N端、富含酪氨酸的C端和一个DNA结合区域构成,与远端上游元件(FUSE)结合后可调控原癌基因c-Myc的转录。FUBP1通过调控基因转录、翻译、RNA复制和剪接,影响细胞增殖、迁移、凋亡等过程,在多种肿瘤的发生、发展中扮演重要角色。本文就FUBP1的结构、功能、家族成员及其与消化道肿瘤相关机制的研究作一综述。

远端上游元件结合蛋白1在幽门螺杆菌相关性胃炎中的表达及机制研究

目的研究远端上游元件结合蛋白1(far upstream element-binding protein 1,FUBP1)在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)相关性胃炎中的表达,并初步探讨H. pylori引起FUBP1表达变化的可能机制。方法分别采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-q PCR)、蛋白质印迹法(Western blotting)和免疫组织化学技术检测H. pylori阴性和H. pylori阳性胃炎组织中FUBP1mRNA和蛋白的表达。国际标准测序株H. pylori 26695及其提取的LPS分别刺激AGS、SGC7901细胞,RT-q PCR和Western blotting检测FUBP1 mRNA和蛋白的表达。分别使用H. pylori和H. pylori-LPS灌胃,构建小鼠感染模型,于灌胃结束后4周、8周取小鼠胃黏膜组织,RT-q PCR和Western blotting检测FUBP1 mRNA和蛋白表达。结果 H. pylori阳性组织中FUBP1 mRNA及蛋白表达水平均低于H. pylori阴性组织,FUBP1蛋白水平的表达差异有统计学意义(P <0. 05)。H. pylori刺激AGS和SGC7901细胞后FUBP1mRNA和蛋白水平降低,且呈时间依赖性,H. pylori-LPS刺激细胞后,FUBP1 mRNA和蛋白水平表达降低,但无时间及浓度依赖性。动物模型中,与对照组相比,H. pylori组和H. pylori-LPS组的FUBP1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 FUBP1在H. pylori相关性胃炎中表达下降,H. pylori和H. pylori毒力因子LPS均能诱导FUBP1下调,FUBP1可能成为评价慢性胃炎患者H. pylori感染的一个潜在指标。

敲低远端上游元件结合蛋白1的表达对胰腺癌细胞侵袭迁移能力的影响

目的:研究敲低远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)的表达对胰腺癌细胞增殖和侵袭迁移能力的影响。方法:细胞转染干扰序列siFUBP1降低胰腺癌细胞PaTu8988中FUBP1的表达,FUBP1-nc作为阴性对照。CCK-8实验检测细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力。结果:敲低胰腺癌细胞PaTu8988中FUBP1的表达能明显抑制细胞增殖,细胞侵袭迁移数目减少,降低细胞侵袭迁移能力。结论:敲低FUBP1的表达能显著抑制胰腺癌细胞增殖及侵袭迁移能力。

FUBP1在宫颈癌中的表达水平及其与预后的相关性

目的探讨人远端上游原件结合蛋白(FUBP1)在宫颈癌中的表达水平及其与预后的相关性。方法回顾性选取2016年1月至2021年5月在同济大学附属第一妇婴保健院妇科肿瘤病房接受治疗的宫颈癌患者,获取宫颈癌组织和癌旁组织86例。采用免疫组织化学方法检测FUBP1的表达,按照中位数法进行分组,FUBP1蛋白>0.83为FUBP1高表达组,FUBP1蛋白≤0.83为FUBP1低表达组。分析FUBP1表达与临床病理的相关性,采用受试者工作特性(ROC)曲线分析FUBP1在宫颈癌中的诊断价值,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,对比FUBP1高表达组和低表达组患者的总生存率,采用Cox比例风险模型进行单因素和多因素分析。结果FUBP1在癌旁组织和宫颈癌组织中表达分别为0.27±0.03和1.48±0.11,FUBP1在宫颈癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001)。FUBP1诊断宫颈癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.921(95%CI:0.882~0.962,P<0.001),最佳截断值为1.305,敏感度为79.40%,特异度为68.78%。FUBP1高表达组的总生存率显著低于FUBP1低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);FIGO分期、淋巴结转移、宫颈浸润深度、FUBP1的表达与宫颈癌患者预后有关(P<0.05);FIGO分期Ⅲ-Ⅳ期、有淋巴结转移、宫颈浸润深度≥2/3、FUBP1高表达是宫颈癌预后独立危险因素(HR=6.396,95%CI:4.116~15.279,P<0.001;HR=5.173,95%CI:1.936~12.187,P<0.001;HR=4.518,95%CI:1.163~11.729,P<0.001;HR=5.149,95%CI:2.073~13.272,P<0.001)。结论FUBP1在宫颈癌中呈现高表达,检测宫颈癌组织中FUBP1的表达水平对宫颈癌的诊断及预后判断有重要的临床价值。

远端上游元件结合蛋白1调节肝癌细胞中长链非编码RNA表达的实验研究

目的筛选肝癌细胞中受远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)调节的长链非编码RNA(lncRNAs)。方法通过慢病毒介导不同肝癌细胞株中(MHCC97H、MHCC97L和Huh7)过表达FUBP1,利用定量PCR的方法鉴定过表达效率。利用芯片的方法筛选过表达FUBP1后肝癌细胞株中差异表达的lncRNAs,并利用定量PCR验证结果。利用生物信息学的方法确定差异表达的lncRNAs与mRNAs的共表达网络。结果以对照组中FUBP1的表达量为1,慢病毒感染的MHCC97H、MHCC97L和Huh7肝癌细胞株中FUBP1的mRNA水平分别为3.28±0.15、2.75±0.26和4.25±0.35,明显高于对照组(均P<0.01)。芯片结果显示,共有12个lncRNA在3种细胞株中具有一致的表达变化,包括3个上调和9个下调。定量PCR验证结果与芯片结果一致,其中lnc-ARF6-3下调最明显,lnc-BCAS2-1上调最明显。lnc-BCAS2-1、lnc-USP9X-3、lncLYZ-2和lnc-C14orf135-3与FUBP1具有共表达网络。结论 FUBP1诱导肝癌细胞中lncRNAs的表达紊乱,FUBP1-lncRNAs的表达网络可能与肝癌的发展和转移密切相关。

FUBP1表达沉默对A549细胞生长和化疗敏感性影响研究

目的:探讨人远端上游元件结合蛋白1(far upstream element binding protein 1,FUBP1)基因在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌A549细胞化疗敏感性的影响。方法:选取43例来源于201-03-17-2012-05-09沈阳军区总医院胸外科,手术患者的肺腺癌及相应距肿瘤>1cm的癌旁组织标本为研究对象。Real-time PCR检测FUBP1mRNA在肺腺癌组织中的表达;RNA干扰技术沉默A549细胞中FUBP1基因的表达,蛋白质印迹法检测抑制效果;MTT法和流式细胞术测定FUBP1基因表达沉默对细胞生长抑制率和凋亡率的影响。不同浓度顺铂(DDP)处理FUBP1基因表达沉默的A549细胞,检测细胞生长抑制率和凋亡率。结果:FUBP1基因在肺腺癌组织中的表达显著上调,为癌旁正常组织中FUBP1的177.65%,t=2.858,P=0.006。FUBP1随着分化程度的降低和分期的升高呈逐渐增高趋势,且与淋巴结及远处转移相关,P<0.01。siRNA-FUBP1能够显著抑制A549细胞中FUBP1蛋白的表达,F=14.726,P<0.001;而FUBP1基因表达沉默的A549细胞的生长抑制率由1.4%升高至29.5%,F=16.302,P<0.001;凋亡率由2.68%升高至5.84%,F=19.497,P<0.001。FUBP1基因表达沉默的A549细胞分别经1、3和5μg/mL DDP处理后,生长抑制率由14.418%、17.460%和23.545%分别升高至21.693%、27.513%和37.566%,相同DDP浓度的2组间比较的t值分别为21.074、25.835和29.473,P值均<0.001;DDP的IC50由(5.12±0.31)μg/mL降至(3.93±0.24)μg/mL,t=3.487,P=0.001;而凋亡率由8.85%、14.37%和18.21%分别升高至13.25%、18.46%和26.52%,相同DDP浓度组间比较的t值分别为7.279、15.878和23.111,P值均<0.001。结论:FUBP1的表达上调与肺腺癌相关,FUBP1表达沉默能够增加A549细胞的生长抑制率和凋亡率,并且可以提高A549细胞对化疗药物DDP的敏感性。