潜阳育阴颗粒含药血清对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及fas/fasL蛋白表达的影响

目的研究潜阳育阴颗粒(鬼针草、何首乌、山茱萸、玄参、泽泻、川牛膝)含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及fas/fasL蛋白表达水平的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、缬沙坦组、潜阳育阴颗粒组,每组4只,灌胃给药,制备含药血清。人脐静脉内皮细胞分为5组,每组3个样本。除正常组外,其余组均采用10-6mol/L AngⅡ诱导处于对数生长期的人脐静脉内皮细胞建立细胞凋亡损伤模型。造模后,分别给予相应含药血清DMEM培养液干预:正常组(16%空白血清培养液)、模型组(16%空白血清培养液)、缬沙坦组(16%缬沙坦血清培养液)、潜阳育阴颗粒低剂量组(8%潜阳育阴颗粒血清培养液+8%空白血清培养液)、潜阳育阴颗粒高剂量组(16%潜阳育阴颗粒血清培养液)。采用流式细胞术检测人脐静脉内皮细胞凋亡率,Western Blot检测fas/fasL蛋白表达。结果与正常组比,模型组人脐静脉内皮细胞凋亡率及fas、fasL蛋白表达明显升高;与模型组比,缬沙坦组和潜阳育阴颗粒组均可显著降低人脐静脉内皮细胞凋亡率及fas、fasL蛋白表达。结论潜阳育阴颗粒可以拮抗AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡效应,其机制可能与调节fas和fasL蛋白表达有关。

FasL和Caspase-8蛋白表达及Caspase-8基因甲基化在非小细胞肺癌中的应用价值研究

目的探讨Fas L和Caspase-8蛋白表达及Caspase-8基因甲基化在非小细胞肺癌中的应用价值。方法选取手术切除的非小细胞肺癌患者100例,均分别切除癌组织和癌旁组织(以肿瘤为中心6 cm为半径的肺组织),其中肺鳞癌55例,肺腺癌30例,肺腺鳞癌15例;低分化癌50例,中分化癌30例,高分化癌20例;伴有淋巴转移65例,无淋巴转移35例。另取正常肺内组织100例进行对照。采用免疫组化S-P染色法检测非小细胞肺癌标本Fas L和Caspase-8蛋白表达;采用甲基化特异性聚合酶链式反应检测非小细胞肺癌组患者的Caspase-8基因甲基化状态。结果 Fas L蛋白主要散布在肿瘤细胞浆液中,少数排列在细胞膜上;Caspase-8蛋白散布于细胞浆液中。在非小细胞肺癌中,Fas L蛋白及Caspase-8蛋白存在不同程度的阳性表达,Fas L蛋白阳性表达率明显大于癌旁组织和正常组织,在肺腺癌的阳性表达率明显大于鳞癌及腺鳞癌(P<0.05),在低分化癌中的阳性表达率明显大于中分化癌及高分化癌,伴淋巴转移Fas L蛋白阳性率大于非淋巴转移,差异均有统计学意义(P<0.05);而Caspase-8蛋白阳性表达率明显小于癌旁组织和正常组织,在肺腺癌的阳性表达率明显小于鳞癌及腺鳞癌,在高分化癌中的阳性表达率明显大于中分化癌及低分化癌,伴淋巴转移Caspase-8蛋白阳性率低于非淋巴转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。癌组织Caspase-8基因甲基化率明显大于癌旁组织和正常组织,在肺腺癌的阳性表达率明显大于在鳞癌及腺鳞癌的阳性表达率,在低分化癌中的阳性表达率明显大于中分化癌及高分化癌,伴淋巴转移Caspase-8基因甲基化阳性率高于非淋巴转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论非小细胞肺癌中出现Fas L蛋白高表达和Caspase-8基因高甲基化的变化,加快肺癌细胞与免疫细胞联合的速率,抑制免疫细胞的活性,致使肿瘤内部形成无免疫区域而促进肿瘤细胞的分裂和滋长,成为腺癌较易发生早期转移的重要原因。Caspase-8蛋白在鳞癌中表达增高,这是鳞癌预后较好的主要因素,也是判断非小细胞肺癌预后的重要指标之一。Caspase-8参与了非小细胞肺癌的演变,与非小细胞肺癌的发生、发展及转移有密切关系,作为非小细胞肺癌预后的重要指标,为临床对非小细胞肺癌进行综合性、针对性的治疗提供了重要理论依据。

康脑液对脑缺血大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响

目的观察康脑液对脑缺血再灌注损伤大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响。方法线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(2.7 mg·kg-1)、康脑液高、中、低(24,12,6 g·kg-1.d-1)剂量组;于缺血后2 h再灌注3,6,12,24,48 h后处死,用免疫组化法观察Fas、FasL蛋白的表达。结果与模型组比较,康脑液高、中、低剂量组均能明显下调Fas、FasL蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论康脑液可通过抑制Fas、FasL蛋白的表达,减轻脑缺血后神经功能损伤,从而保护脑组织。