缬草不定根组织培养的研究

为了研究不同培养条件对缬草(Valeriana fauriei var.dasycarpa Hara)不定根生长及其有效成分含量的影响,利用组织培养技术结合高效液相色谱,通过改变培养基蔗糖、氮源和磷源浓度,研究其对缬草不定根的生长和缬草三酯类、缬草烯酸类合成的影响。结果表明,当蔗糖浓度为60 g/L时最适合缬草不定根的生长以及总缬草三酯类和总缬草烯酸类的生产。NO3-/NH4+为1∶1时,不定根生长量和缬草三酯类以及缬草烯酸类达到最高。改变培养基Na H2PO4浓度时,缬草不定根生长均比不添加Na H2PO4时旺盛,但高浓度的Na H2PO4抑制了缬草三酯类和缬草烯酸类的合成,Na H2PO4为基本培养基的0.3倍时,不定根生长量最高,达14.89 g/L,增长率也最高,达到16.18倍,缬草烯酸类也达到最高产量为13.88 mg/L。

HPLC法测定不同采集时期的北缬草中生理活性成分含量

[目的]测定不同采集时期的北缬草中生理活性成分含量,以确定北缬草根茎的最佳采集时期。[方法]采用HPLC法测定不同时期采集的北缬草根茎中的主要生理活性成分缬草三酯类成分和缬草烯酸类成分的含量。[结果]9月份采集的北缬草根中缬草烯酸类总含量最高,为13.125 mg/g,其次为7月份采集的;缬草三酯类成分以4月采集的根茎中最高,9月份采集的含量较高。[结论]该方法确定了北缬草根茎的最佳采集时期,为北缬草的开发利用提供了依据。

培养条件对缬草不定根生长及次生代谢产物的影响

[目的]研究不同培养基种类、盐强度对缬草不定根生长及其主要的次生代谢产物缬草三酯和缬草烯酸类合成的影响。[方法]利用组织培养技术结合HPLC分析方法,考察培养基种类、盐强度对缬草不定根生长及其代谢产物缬草三酯和缬草烯酸类合成的影响。[结果]综合考虑不定根的生长速率和有效成分含量,确定B5为基本培养基。通过改变培养基盐强度发现,高盐强度不利于不定根的生长和有效成分的合成。[结论]该试验确定了缬草不定根培养的基本培养基为B5培养基,为缬草的种质资源研究提供了依据。

北缬草不同采集部位中生理活性成分含量的比较

[目的]比较北缬草不同采集部位中生理活性成分的含量。[方法]采用高效液相色谱法,色谱柱为μBondapakTMC18(3.9 mm×300 mm);先由流动相A[水-乙腈-磷酸(80∶20∶0.05,V/V/V)]洗脱40 min后,换成流动相B[水-乙腈-磷酸(20∶80∶0.05,V/V/V)]洗脱,体积流量为1.0 ml/min;缬草素类检测波长为256 nm,缬草烯酸类检测波长为220 nm,进样量为20μl,分析不同采集时期北缬草不同采集部位中生理活性成分的含量。[结果]北缬草不同采收部位间以根及根茎中生理活性成分含量为最高,叶部次之,地上茎部最少。9月为北缬草的最佳采集时期。[结论]不同时间采收的北缬草不同部位中生理活性成分含量差异明显。

傅氏凤尾蕨配子体发育及其无配子生殖的研究

采用光学显微镜对傅氏凤尾蕨(Pteris fauriei Hieron.)的配子体发育进行了研究。傅氏凤尾蕨孢子深褐色,呈四面体形,三裂缝,极面观为钝三角形,赤道面观近半圆形。孢子自播种3～7d左右开始萌发,萌发类型为书带蕨型。18d左右发育为丝状体,大约为6～10个细胞长;25d左右,丝状体可通过顶端细胞或中间细胞分裂产生片状体。播种40～50d左右,在片状体的侧面产生分生组织,发育成原叶体,发育类型为水蕨型。雄配子体形状不规则,其上可产生精子器。大型原叶体形状较规则,顶端为心形,发育2～3个月左右,在生长点下方产生无性胚芽,进行无配子生殖。此后不久,在胚芽和生长点之间产生导管连接孢子体和配子体。经多次培养表明傅氏凤尾蕨不产生颈卵器,为专性无配子生殖。

傅氏凤尾蕨成熟精子超微结构的研究

主要采用透射电镜对无配子生殖蕨类傅氏凤尾蕨（Pteris faurieiHieron.）游动精子的超微结构进行了研究。傅氏凤尾蕨游动精子呈带状,螺旋形旋转约3.5圈。带状游动精子主要由片层带、微管带、顶脊、背冠、环状线粒体等运动细胞器和高度浓缩的细胞核构成。其中微管带是游动精子的基本骨架,微管带上部与片层带和背冠相连,下部包被细胞核,并与核膜形成复合结构。微管带的背面具有鞭毛带,其上共着生约70~80个鞭毛。游动精子的线粒体显著,环状线粒体与片层带相连,附属线粒体衬于微管带内侧。本研究还比较了傅氏凤尾蕨游动精子与其它蕨类成熟精子超微结构的异同。

屋久岛紫薇的引种栽培及繁育技术

报道了南京中山植物园引种屋久岛紫薇概况,介绍了形态特征、生态及生物学习性,对其繁育及栽培技术要点进行了总结,简要介绍了一些值得重点推广的优良品种。

阔叶缬草叶愈伤组织诱导初步研究

本试验以阔叶缬草 (ValerianafaurieiBriq .)为材料 ,就激素对叶外植体愈伤组织诱导和增殖的影响作了初步研究 .结果表明 ,培养基中添加 2 ,4-D能诱导愈伤组织产生 ,BA能促进愈伤组织增殖 .MS + 2 ,4-D 5μmol·L- 1 +BA 2 .5μmol·L- 1 为诱导叶块愈伤组织的最佳组合 .

屋久岛紫薇子叶愈伤组织诱导及植株再生技术初探

以屋久岛紫薇子叶为外植体,通过添加不同种类和质量浓度的生长调节剂,对屋久岛紫薇进行组织培养试验,研究不同植物生长调节剂组合及质量浓度对屋久岛紫薇愈伤组织诱导、增殖及分化的影响,从而筛选出适宜屋久岛紫薇愈伤诱导、增殖和分化的培养条件。结果显示,屋久岛紫薇子叶外植体在组织培养过程中,适宜愈伤诱导培养基组合为1/2MS+1. 0 mg/L 6-BA+0. 5 mg/L 2,4-D,诱导率为46. 5%;愈伤组织增殖的适宜培养基为MS+1. 0 mg/L 6-BA+0. 1mg/L NAA,增殖系数最大,为3. 1;愈伤组织分化的最适培养基为WPM+1. 0 mg/L 6-BA+0. 5 mg/L IBA,分化率为18. 7%;移栽基质适宜为等容积的泥炭土+珍珠岩混合物,成活率为90%。

大兴安岭野生缬草的人工栽植技术

在对大兴安岭地区野生缬草资源全面调查的基础上,对北缬草(Valeriana fauriei)和黑水缬草(Valeriana amurensis)进行了人工栽培试验研究;阐述了从采种、种子处理、育苗及栽植管理等各环节的关键技术。

傅氏凤尾蕨复合群孢子形态的扫描电镜观察

傅氏凤尾蕨复合群(Pteris fauriei complex)包括傅氏凤尾蕨Pteris fauriei、百越凤尾蕨P.fauriei var.chinensis、线裂凤尾蕨P.angustipinnula、硕大凤尾蕨P.majestica、隆林凤尾蕨P.splendida等,此复合群种间界限模糊,难以准确分类,为此笔者利用扫描电镜对此复合群植物的孢子形态进行观察,为理清成员间的亲缘关系提供佐证。观察发现,脊类纹饰是此复合群孢子的重要特征,根据脊类纹饰的有无和分布情况,该复合群可划分为4个类群。此外,孢子形态可作为此凤尾蕨复合群区分种的特征,但傅氏凤尾蕨和百越凤尾蕨的孢子形态较相近,难以区别。本研究还首次发现隆林凤尾蕨具有"连体孢子"。

基于rps4-trnS区序列的证据分析傅氏凤尾蕨和狭眼凤尾蕨的关系

对傅氏凤尾蕨(Pteris fauriei)和狭眼凤尾蕨(Pteris biaurita)的叶绿体rps4-trnS区序列进行PCR扩增和序列分析,再结合NCBI基因数据库中已发表的凤尾蕨科及其邻近类群的rps4-trnS区序列构建系统发育树来分析两者的亲缘关系。结果显示:傅氏凤尾蕨和狭眼凤尾蕨的rps4-trnS区序列未表现出明显差异。结合两者孢子体和配子体形态发育特征以及rps4-trnS区序列的证据,认为傅氏凤尾蕨和狭眼凤尾蕨为同种或为变种关系。

傅氏凤尾蕨复合群的分子系统学研究

杂交和多倍化是蕨类植物物种形成的主要机制,往往导致多倍体复合群的出现。同一复合群的成员在形态上具有明显的连续性与过渡性,复合群内部往往存在复杂的亲缘关系,给分类带来很大困难。傅氏凤尾蕨复合群是凤尾蕨属中分类学问题最为突出的复合群之一,成员间仅以植株的高度、羽片的大小、裂片间隙的大小、裂片先端的形状或孢子囊群的长短等细小的特征相区别。为确定该复合群某些成员的分类学位置,并理清成员间的亲缘关系,该研究选取了3个叶绿体DNA片段atp B、mat K和trn L-F构建傅氏凤尾蕨复合群的系统发育树,并结合孢粉学证据,探讨该复合群成员间的亲缘关系。结果表明:百越凤尾蕨和傅氏凤尾蕨的关系最为密切,建议把百越凤尾蕨归并到傅氏凤尾蕨中;硕大凤尾蕨与傅氏凤尾蕨的关系较远,但其孢子形态与傅氏凤尾蕨有一定重叠,两者的亲缘关系待深入研究;线裂凤尾蕨是一独立的种,与该复合群其它成员明显不同;隆林凤尾蕨都较早分化出来,单独作为一支,但其孢子形态多变,暗示其可能是杂种起源。

紫薇新品种‘屋久岛紫薇1号’

‘屋久岛紫薇1号’是从美国引种的屋久岛紫薇(Lagerstroemia fauriei)实生苗木中选育的新品种。树形优美,8～9月时树皮呈亮丽的鲜红色,秋季树叶呈现红、黄、橙、紫等颜色变化,极具观赏价值。抗白粉病,耐热抗寒,生长快,适应性广,扦插易成活。

傅氏凤尾蕨精子发生超微结构的研究

超微结构研究显示傅氏凤尾蕨(Pteris fauriei Hieron)精子发生过程包括生毛体、多层结构和鞭毛等运动细胞器重新发生,环状线粒体形成,核塑形等过程,最后形成一个螺旋形的游动精子,这与其他真蕨类精子发生过程相似。本研究观察到的一些新现象包括:精细胞在分化早期呈极性,细胞核位于精细胞的近极端,生毛体、线粒体和质体等细胞器主要分布远极端;在生毛体分化早期,可见大量微管从其发出,其周围线粒体丰富;基体分化经历了前中心粒、中心粒和基体3个阶段,它们的内部结构不同;研究表明生毛体内的不定形物质是微管组织者,多层结构、附属微管带及鞭毛等细胞器均由不定形物质分化形成;精细胞在分化过程中产生了丰富的膜结构,它们可能为精核塑形提供原料。本研究报道了傅氏凤尾蕨精细胞分化的一些细节,这有助于进一步揭示蕨类植物精子发生的细胞学机制。