驴FBXL3基因在发情期和乏情期各组织表达谱差异及氨基酸特征分析

为了探究FBXL3基因在驴卵巢、卵泡液和乳腺的表达水平与驴发情期和乏情期之间的关系,试验以德州毛驴为研究对象,利用qPCR方法分析FBXL3基因在发情期和乏情期不同组织中的表达情况,利用生物信息学方法预测FBXL3蛋白质的理化性质、跨膜结构域、亚细胞定位、蛋白质相互作用情况、二级结构和三级结构。结果表明:FBXL3基因在发情期卵巢和卵泡液中的相对表达量极显著高于乏情期(P<0.01),乳腺中的相对表达量显著高于乏情期(P<0.05)。FBXL3蛋白有37个酶解位点,属于亲水性蛋白,无跨膜结构域,主要分布在线粒体上,为酸性、不稳定蛋白质;FBXL3蛋白中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲和延伸链分别占49.30%、2.57%、35.98%和12.15%,与三级结构预测结果一致;SKP1、FBXL13、CRY1、CRY2、PER1、PER2等蛋白与FBXL3蛋白存在相互作用。说明FBXL3基因在发情期和乏情期的表达具有组织特异性。

驴FBXL蛋白家族的氨基酸特征分析

FBXL蛋白家族的重要性在于其作为E3泛素连接酶的关键组分,在调控细胞周期、蛋白降解、信号传导等关键生物过程中发挥核心作用,对维持生物体的正常生理功能和健康状态至关重要。该研究通过梳理FBXL蛋白家族18个成员,搜集驴FBXL蛋白家族序列,寻找已知的结构域,分析蛋白质的理化性质、酶解位点、初级结构和三级结构,预测蛋白质的翻译后修饰,为探讨FBXL家族参与的泛素化蛋白降解途径及其在动物繁殖和发育中的生物学功能提供理论基础。通过分析发现:FBXL3、FBXL13、FBXL21等蛋白都与节律钟基因有关,因此,可以进一步对这些基因展开研究,其很有可能影响驴的繁殖周期调控。

E3泛素连接酶FBXL8对A亚群禽白血病病毒复制的影响

【目的】制备鸡E3泛素连接酶FBXL8多克隆抗体,探究鸡源FBXL8对A亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup A,ALV-A)在鸡胚成纤维细胞(DF-1)内复制的影响。【方法】以DF-1细胞cDNA为模板,通过PCR扩增FBXL 8基因,构建鸡源FBXL8原核表达重组质粒pET-28a-FBXL8,将其转化大肠杆菌表达菌株RIL进行诱导表达及纯化,将表达产物His-FBXL8免疫10月龄新西兰大白兔制备多克隆抗体,利用Western blotting和间接ELISA分别检测抗体特异性及效价;针对已公布的FBXL 8基因序列设计过表达引物及靶向FBXL 8基因的干扰序列,构建过表达质粒psi-flag-FBXL8及干扰质粒pLKO.1-FBXL8-shRNA,使用Western blotting检测其表达效果。将构建成功的过表达质粒和干扰质粒转染DF-1细胞,24 h后感染ALV-A,通过半定量PCR、Western blotting分别检测ALV-A的结构蛋白P27、GP85表达水平。【结果】PCR成功扩增出大小为1182 bp的FBXL 8基因片段,并成功构建FBXL8原核表达重组质粒pET-28a-FBXL8,诱导表达的融合蛋白His-FBXL8大小为43 ku。Western blotting和间接ELISA结果显示,制备的FBXL8兔多克隆抗体可特异性识别外源蛋白,且抗体效价为1∶64000。成功构建了FBXL8过表达质粒和干扰质粒,其在DF-1细胞中能够实现对FBXL8的过表达和敲低。半定量PCR和Western blotting检测结果显示,过表达FBXL8可抑制ALV-A复制,而敲低FBXL8则促进其复制。【结论】本研究制备的FBXL8多克隆抗体具有良好特异性及反应性;在DF-1细胞中,FBXL8负向调控ALV-A复制,研究结果为进一步深入探究FBXL8生物学特性提供了重要参考,并为揭示FBXL8抗ALV-A感染分子机制奠定了基础。

肿瘤相关成纤维细胞上调hsa-miR-18b-5p靶向FBXL3促进前列腺癌的增殖及转移

目的探讨受肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)调控的hsa-miR-18b-5p在前列腺癌(PCa)中的表达水平及作用,并研究对其在PCa发生发展过程中的分子机制。方法利用生物信息学技术分析在PCa中高表达的miRNA,构建肿瘤相关成纤维细胞并与PCa细胞系共培养,验证CAFs对PCa细胞增殖和迁移的影响及对hsa-miR-18b-5p的调控作用;RT-qPCR验证20例患者癌组织及癌旁正常组织、前列腺正常上皮增生细胞及PCa各细胞系中hsa-miR-18b-5p的表达水平;通过脂质体法将阴性对照及hsamiR-18b-5p抑制物分别转染入PCa细胞C4-2、LNCAP中,分为NC inhibitor组和hsa-miR-18b-5p inhibitor组;采用细胞集落形成、CCK-8实验、划痕愈合、Transwell、IC_(50)实验、流式细胞术分别检测C4-2、LNCAP细胞增殖、迁移、侵袭、耐药能力、凋亡和周期;建立PCa裸鼠移植瘤模型,定期测量移植瘤的质量和体积,Kaplan-Meier生存曲线分析裸鼠生存情况;利用靶基因预测分析网站(Targetscan、Mirtarbase、miRDB、miRDIP)预测has-miR-18b-5p的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因分析验证hsa-miR-18b-5p与靶基因的靶向关系,RT-qPCR、Western blotting检测各组细胞靶基因的表达水平。结果生物信息学分析结果显示,在PCa中高表达的miRNA有17个,结合差异表达程度以及相关文献筛选出拟研究的基因:miR-148a、miR-17、miR-18b-5p、miR-770、miR-297-3p。CAFs与PCa细胞系共培养后hsa-miR-18b-5p的表达水平升高(P<0.01),且促进PCa细胞的增殖与迁移(P<0.01),敲除has-miR-18b-5p可抵消CAFs对PCa细胞增殖及迁移的影响,确定has-miR-18b-5p为研究基因。与正常前列腺上皮细胞或肿瘤旁组织相比,PCa细胞或肿瘤组织中hsa-miR-18b-5p的表达升高(P<0.05);敲除hsa-miR-18b-5p可抑制C4-2、LNCAP细胞的增殖、迁移、侵袭以及耐药(P<0.05);敲除hsa-miR-18b-5p可抑制裸鼠移植瘤质量和体积的增长,增加裸鼠的生存时间(P<0.05)。靶基因预测分析网站显示,FBXL3是hsa-miR-18b-5p的一个潜在作用靶点,双荧光素酶报告基因证实has-miR-18b-5p与FBXL3基因间存在结合位点,且敲除hsa-miR-18b-5p可增加C4-2、LNCAP细胞中FBXL3的蛋白表达(P<0.05)。结论CAFs上调前列腺癌细胞hsa-miR-18b-5p的表达水平,后者可能通过靶向调控FBXL3基因的表达促进PCa细胞的增殖和转移。

FBXL3和FBXL21基因表达与苏尼特羊季节性发情关系初探

为探究下丘脑中FBXL3和FBXL21基因的表达水平与绵羊季节性发情之间的关系,本研究以季节性发情的苏尼特羊为实验动物,通过实时荧光定量PCR(qPCR)研究苏尼特羊由短光照(发情期,SP)转长光照(非发情期,LP)这个过程中下丘脑FBXL3和FBXL21基因表达情况,以及短光照转长光照不同时间点(SP21、LP3、LP15、LP21、LP42和LP49)对FBXL3和FBXL21基因表达的影响。结果表明:由短光照转长光照过程后,苏尼特羊下丘脑中FBXL3基因的表达量显著升高;且由短光照SP21转长光照LP21时,FBXL3基因表达量从LP3、LP15、LP21依次显著增高,LP21时达到峰值,LP21到LP49时又显著降低。而在短光照转长光照过程中,FBXL21基因的表达量显著降低,由短光照SP21转到长光照LP3、LP15时,表达量显著降低,LP15表达量相对最低,在LP21时FBXL21基因表达量达到最高,在LP42时又显著降低,LP49又升高。综上,FBXL3基因的表达量与由短光照和长光照季节性发情调控关键分子(EYA3和TSHb等)和催乳素的表达趋势相似,推测FBXL3基因可能通过调控下丘脑核心生物钟从而在绵羊季节性发情调控通路上游发挥重要作用,FBXL21基因在这个调控过程中也发挥着重要作用。

靶向FBXL20基因的siRNA片段的筛选及其验证

在人结肠腺癌SW480细胞株及口腔鳞癌HSC3细胞株中,筛选有效干扰fbxl 20的siRNA片段.设计合成3对靶向fbxl 20 mRNA的小干扰RNA片段,通过阳离子脂质体介导转染SW480细胞和HSC3细胞.结果发现siRNA-1,siRNA-2,siRNA-3均能抑制SW480细胞和HSC3细胞fbxl20 mRNA的表达,siRNA-2抑制作用最明显,抑制率分别为86.8%和100%.MTT试验显示:siRNA-2转染SW480细胞和HSC3细胞后,细胞增殖能力明显降低,细胞增殖抑制率分别为29.5%和43.4%.Transwell小室迁移实验表明,HSC3细胞在转染24 h后,细胞迁移能力明显减弱,迁移抑制率高达72.4%.流式细胞术检测细胞凋亡结果显示:转染36 h后,SW480细胞实验组细胞凋亡率为21.9%;转染24 h后,HSC3细胞实验组细胞凋亡率为44.7%.本实验成功的筛选出了特异性的抑制fbxl 20基因的siRNA片段,并初步鉴定了fbxl 20基因的功能.

结直肠腺癌发病基因fbxl20和E—cadherin的相关性研究

目的研究fbxl20与E—cadherin基因与结直肠癌临床病理特征的关系及其表达水平间的相关性。方法收集50例结直肠腺癌组织及对照癌旁组织，用半定量PCR技术检测fbxl20及E—cad．herin基因的表达水平并进行相关性分析。结果fbxl20基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织（0．479±0．141 vs．0．296±0．121，P=0．001）；E—cadherin基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织（0．440±0．026vs．0．741±0．059，P=0．000）；fbxl20与E—cadherin基因在本研究50例结直肠腺癌组织中的表达水平无相关性（r=-0．165，P=0．251）。但是，在低分化和高分化肿瘤组织及D期肿瘤组织中，fbxl20与E—cadherin基因的表达水平呈负相关（r=-0．600，P=0．008；r=-0．784，P=0．017；r=-0．643，P=0．032）。结论E—cadherin基因在结直肠腺癌组织中的低表达可能与fbxl20基因的高表达有关，且结直肠腺癌晚期肿瘤的高迁移性及高侵袭性可能与E—cadherin有关。

猪FBXL8基因第二内含子的克隆测序及SNP位点检测

为探明猪FBXL8基因的分子结构特征,本试验以人FBXL8基因的mRNA序列作为信息探针,搜集猪同源基因EST序列,并构建EST重叠群Contig,设计出合适的引物,以湖北通城、大白和长白猪基因组为模板,应用PCR技术克隆测定FBXL8基因的第二内含子序列。序列分析结果表明猪FBXL8基因第二内含子为855 bp。通过运用SEQMAN软件对3个品种的序列比较分析,初步发现第二内含子的第325、361和493位碱基为SNP位点。

结直肠腺癌发病基因fbxl20和set的相关性研究

目的:通过半定量PCR技术,研究fbxl20基因与set基因与临床病理特征的关系及其表达水平间的相关性研究。方法:收集50例结直肠腺癌组织及癌旁正常组织,用半定量PCR技术检测fbxl20基因及set基因的表达水平并进行分析。结果:fbxl20基因及set基因在结直肠腺癌组织中的表达水平均显著高于癌旁组织;fbxl20基因与set基因在本实验50例结直肠腺癌组织中的表达水平无相关性。但是,在低分化肿瘤组织及D期肿瘤组织中,fbxl20基因与set基因的表达水平呈正相关。结论:fbxl20基因及set基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著升高,其可能与癌细胞的分化过程有关。

FBXL20在喉癌组织中的表达及意义

目的检测喉癌组织中FBXL20的表达,并探讨其与喉癌发生、发展的关系以及临床应用的潜在价值。方法用免疫组化SP法,检测30例喉癌组织和其对应的正常组织中FBXL20的表达情况。结果 FBXL20表达于正常组织和肿瘤组织的胞浆中,相对于肿瘤组织,FBXL20在正常组织中表达较高(P=0.010);其表达在有无侵犯淋巴结中,差异有统计学意义(P=0.042);其表达在正常组织与低分化肿瘤中,差异有统计学意义(P=0.018)。结论 FBXL20在喉癌的发生中可能发挥着一定作用,并且可能是喉癌发生过程中的抑制因子。

FBXL20在喉癌组织中的表达

目的研究FBXL20在喉癌组织中的表达,分析其在喉癌组织和癌旁组织中表达是否有差异,并分析FBXL20表达强度与喉癌临床病理特征:分化程度,有无淋巴结转移,性别,年龄之间的关系及研究与喉癌发生、发展、转移的关系,从而探索在临床应用上的潜在价值。方法采用免疫组化检测30例喉癌组织和癌旁组织中FBXL20的表达情况。结果 FBXL20在正常组织和肿瘤组织均有表达,其多集中于胞浆中,FBXL20在正常组织中阳性表达率较高于肿瘤组织,FBXL20在正常组织中的表达与肿瘤组织相比,差异有统计学意义(P=0.004),其表达在有无侵犯淋巴结中差异有统计学意义(P=0.044),与性别,年龄和分化程度无关。结论 FBXL20可能在喉癌的发生中发挥着一定作用。

构建逆转录病毒pQCXIH-HA-FBXL11表达质粒及稳定转染细胞

目的:构建pQCXIH-HA-FBXL11逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11的稳定转染细胞。方法:以牙髓干细胞的cDNA为模板,利用PCR方法扩增目的基因FBXL11,PCR产物纯化回收、连接、酶切、测序鉴定,构建pQCXIH-HA-FBXL11质粒。利用FuGENE6转染293T细胞,蛋白质免疫印迹法和实时荧光定量PCR法在蛋白及mRNA水平检测HA-FBXL11的表达。利用逆转录病毒感染牙髓间充质干细胞。结果:成功构建了逆转录病毒表达质粒pQCXIH-HA-FBXL11,蛋白及mRNA水平检测证实其在293T细胞可以有效的表达。成功建立了过表达HA-FBXL11的牙髓间充质干细胞稳定转染细胞。结论:通过构建pQCXIH-HA-FBXL11表达质粒及在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11稳定转染细胞,为进一步研究FBXL11对间充质干细胞的功能调控奠定了基础。

FBXL20在原发性肺癌中的表达与临床特征及预后相关性分析

目的 分析F盒-富含亮氨酸重复蛋白20(F-box and leucine rich repeat protein 20,FBXL20)在原发性肺癌中的表达与临床特征及预后的关系。方法 选取2014年12月至2016年12月南阳市第二人民医院诊治的108例原发性肺癌作为研究对象,称为原发性肺癌组,并选取同期南阳市第二人民医院收治的56例肺部良性疾病和50例健康体检者作为对照,分别称为肺部良性疾病组和健康体检组。采用实时荧光定量PCR检测3组血液中FBXL20 mRNA表达水平;采用免疫组织化学(IHC)检测原发性肺癌组癌组织和癌旁正常组织FBXL20蛋白表达情况;并分析FBXL20 mRNA和蛋白与原发性肺癌临床特征及预后之间的关系。结果 3组血液中FBXL20 mRNA表达水平比较差异具有统计学意义(P<0.05),且表现为原发性肺癌组>肺部良性疾病组>健康体检组;原发性肺癌组癌组织FBXL20蛋白高表达率(70.37%)明显高于低表达率(9.26%),且差异具有统计学意义(P<0.05);经Spearman法分析,原发性肺癌组血液FBXL20 mRNA与蛋白高表达呈正相关(P<0.05),与蛋白低表达呈负相关(P<0.05);FBXL20 mRNA及蛋白在原发性肺癌细胞学类型、组织学分级及淋巴转移上差异具有统计学意义(P<0.05);经3年随访,108例原发性肺癌中70例生存,38例死亡;死亡组FBXL20 m RNA及蛋白高表达率均明显高于生存组(P<0.05)。结论 FBXL20在原发性肺癌中高表达,且与细胞学类型、组织学分级及淋巴转移密切相关,在预后预测上具有一定价值。

FBXL20在颞叶癫痫患者及癫痫大鼠模型中的表达变化

目的通过研究E3泛素连接酶FBXL20及其下游蛋白-神经元突触膜胞外分泌调节蛋白1(regulating synaptic membrane exocytosis 1,RIM1)在颞叶癫痫患者皮质及匹鲁卡品癫痫大鼠模型皮质、海马组织中的表达变化,探讨FBXL20在癫痫形成中的作用。方法以颞叶癫痫患者手术切除病灶标本(n=25)为癫痫组,以脑外伤减压手术所切皮质标本(n=10)为对照组。另取40只健康雄性SD大鼠腹腔注射氯化锂(127 mg/kg),20 h后腹腔注射匹鲁卡品(50 mg/kg),每30分钟重复给予1次匹鲁卡品(10 mg/kg),直到大鼠癫痫发作。2周后出现癫痫自发性发作的大鼠纳入癫痫组;2个月后仍未出现癫痫自发性发作的大鼠纳入对照组。采用免疫荧光对FBXL20的表达进行定位;免疫组化检测FBXL20的表达水平;Western blot检测FBXL20、RIM1的表达水平。结果免疫荧光检测结果显示FBXL20主要表达于神经元;免疫组化及Western blot检测结果均显示癫痫患者皮质、癫痫大鼠模型皮质与海马中FBXL20表达较对照组明显下降(P<0.05);同时Western blot检测结果显示RIM1表达较对照组明显升高(P<0.05)。结论 FBXL20在癫痫患者及大鼠模型中的表达水平明显降低,RIM1表达明显升高,提示FBXL20可能通过调控RIM1参与了癫痫的形成。

斑马鱼Fbxl5基因多克隆抗体的制备与检测

Fbxl5为F-box基因家族的一员,目前研究发现其与心脏的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能,有必要制备其多克隆抗体。通过桥式PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Fbxl5基因片段,将其克隆入表达载体pET-28a,转化至大肠杆菌Rosseta中。用IPTG诱导Fbxl5重组质粒得到His-Fbxl5的融合蛋白。这个融合蛋白用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化的His-Fbxl5融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。使用Western Blot检测,获得了Fbxl5原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Fbxl5多克隆抗体。随后检测了Fbxl5在斑马鱼胚胎和成体组织中蛋白的表达,通过基因芯片分析在Fbxl5-MO和Std胚胎样品的mRNA含量差异.所得结果显示获得了较高效价和特异性好的斑马鱼Fbxl5多克隆抗体,为Fbxl5功能的进一步研究奠定了基础。

组蛋白去甲基化酶FBXL11抑制牙髓干细胞成骨和成牙本质分化

目的研究组蛋白去甲基化酶FBXL11对牙髓干细胞定向分化能力的影响。方法成骨分化诱导培养基诱导牙髓干细胞体外成骨/成牙本质分化。逆转录病毒转染构建过表达FBXL11的牙髓干细胞稳定转染细胞,进行FBXL11获得性功能研究。碱性磷酸酶活性实验及碱性磷酸酶染色检测成骨/成牙本质分化早期分化指标-碱性磷酸酶活性。茜素红染色及钙离子定量分析检测牙髓干细胞体外成骨/成牙本质分化能力。实时定量RTPCR检测FBXL11及成骨/成牙本质分化相关基因-骨涎蛋白、骨桥蛋白和骨钙素的表达。结果成骨诱导牙髓干细胞抑制FBXL11的表达。过表达FBXL11明显抑制牙髓干细胞的碱性磷酸酶活性、牙髓干细胞体外矿化能力以及骨涎蛋白和骨桥蛋白的表达。结论组蛋白去甲基化酶FBXL11具有抑制牙髓干细胞成骨和成牙本质分化的潜能。

FBXL20对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响

目的观察FBXL20(F-box and leucine rich repeat protein 20)对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响并初步探究其机制。方法采用慢病毒感染A549细胞,构建对照组(FBXL20-vector组)及干扰组(FBXL20-RNAi组),通过Western blot验证慢病毒敲减效率。利用CCK-8及集落形成实验观察FBXL20的下调对A549细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化,Western blot分析周期蛋白的改变,基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)探究FBXL20可能参与的生物学过程。结果干扰组FBXL20的蛋白表达(0.36±0.02)显著低于对照组(0.58±0.01)(P<0.01)。与对照组相比,干扰组的增殖能力增强(P<0.05),形成的集落数目也显著增加(100±20 vs 53±6)(P<0.05),且停留在G_2/M期的细胞比例明显降低(5.65±1.35 vs 9.94±1.44)(P<0.05)。Western blot结果显示Cyclin D1、ERK1/2蛋白表达无明显变化(P>0.05),CDK2、Cyclin E、CDK1、Cyclin A、Cyclin B1蛋白表达显著增加,而p-ERK1/2则显著降低(P<0.05)。GSEA结果显示FBXL20的低表达与G_2/M检查点呈正相关(P<0.01)。结论下调FBXL20可以加快A549细胞G_2/M期的进程,提高其生长能力。其机制可能是通过抑制p-ERK的激活,使得其下游周期蛋白CDK1、Cyclin A、Cyclin B1表达增加而实现的。

针对Fbxl5基因关键结构域F-box的Crispr/Cas9打靶有效性分析

为了在动物体内研究Fbxl5基因是通过什么机制导致斑马鱼心脏出现突变表型,本文利用近几年兴起的CRISPR/Cas9打靶技术建立斑马鱼Fbxl5基因敲除品系。本文将打靶位点定位于Fbxl5的F-box结构域,也就是Fbxl5的第五号外显子上。首先经过基因打靶网站分析筛选出针对Fbxl5基因F-box结构域最适合的打靶位点,扩增出Fbxl5基因CRISPR/Cas9打靶双链DNA,并转录为RNA,与Hcas9共注射至斑马鱼胚胎。最后,在注射48 h后对Fbxl5基因CRISPR/Cas9打靶的有效性进行检测。首先在注射48 h之后收集胚胎提取基因组DNA,用特异性引物进行PCR扩增;将纯化后的Fbxl5基因PCR产物连接到p MD18-T载体,再经质粒提取,测序分析,通过与WT斑马鱼基因组序列进行比对发现Fbxl5-9号在PAM序列AGG下游缺失了4个碱基。证明该CRISPR/Cas9系统在敲除心脏发育候选基因Fbxl5是有效的,该研究为最终获得Fbxl5基因敲除斑马鱼奠定了良好的基础。

FBXL5在结肠癌中的表达及临床意义

目的:通过研究E3泛素连接酶FBXL5在结肠癌组织中的表达情况,来确定和探讨其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测20例癌旁组织及60例结肠癌组织中E3泛素连接酶FBXL5的表达情况。结果:FBXL5在结肠癌和癌旁组织中表达差异有统计学意义(P<0.0 5),其阳性率分别为8 3.3%(5 0/6 0)、25.0%(5/20)。FBXL5的表达与结肠癌的淋巴结转移(P=0.027)和临床TNM分期(P=0.013)有关。FBXL5表达与术后5年生存率明显相关(P=0.016)。Cox多因素分析显示TNM分期为结肠癌的独立预后因素。结论:FBXL5促进了结肠癌的发生、发展、侵袭及转移,希望本次研究结果能对结肠癌的治疗及发生机制提供一个方向,为后续的生物学研究及临床治疗提供一个参考。

E3泛素连接酶FBXL5与恶性肿瘤关系的研究进展

泛素化修饰是蛋白质降解的信号，调节体内蛋白质翻译后修饰的重要途径之一，密切参与细胞周期、信号转导、DNA修复、免疫反应、一录调控等。泛素化修饰中的泛素连接酶与肿瘤的发生、发展密切相关。泛素化修饰被3种关键酶共同介导，其中E3泛素连接酶介导活泛素分子从结合酶E2转移到底物，不同的泛素连接酶靶向不同的底物蛋白，决定泛素化修饰的特异性，故E3连接酶于泛素化修饰中具有至关重要作用，已成为当前研究、探讨的热点问题之一。