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大肠杆菌F18菌毛FedE蛋白的表达与鉴定
被引量:
7
1
作者
成大荣
徐建生
+2 位作者
孙怀昌
高崧
刘俊斌
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期5-8,共4页
根据已经发表的F18菌毛E亚单位的基因序列(fedE)设计1对引物,利用PCR技术从重组质粒TF107E中扩增到一段序列,并按预定的阅读框架插入到表达性质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedE,并转化大肠杆菌BL2...
根据已经发表的F18菌毛E亚单位的基因序列(fedE)设计1对引物,利用PCR技术从重组质粒TF107E中扩增到一段序列,并按预定的阅读框架插入到表达性质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedE,并转化大肠杆菌BL21获得重组菌PPFedE。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明:该序列大小为459bp,与GENEBANK中的FedE结构编码序列(Z26520)完全一致。通过对菌体裂解物的SDS-PAGE电泳分析以及Westernblotting鉴定,证明重组大肠杆菌PPFedE的可以表达融合蛋白形式的FedE(命名为GST-FedE),即FedE蛋白(16.297ku)与谷胱苷肽转移酶(27.335ku)相连组成分子量为43.632ku的融合蛋白。
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关键词
大肠杆菌
菌毛
F18
FedE
表达
鉴定
下载PDF
职称材料
题名
大肠杆菌F18菌毛FedE蛋白的表达与鉴定
被引量:
7
1
作者
成大荣
徐建生
孙怀昌
高崧
刘俊斌
机构
扬州大学兽医学院
出处
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期5-8,共4页
基金
国家高技术发展计划项目(863-2003AA222141)
文摘
根据已经发表的F18菌毛E亚单位的基因序列(fedE)设计1对引物,利用PCR技术从重组质粒TF107E中扩增到一段序列,并按预定的阅读框架插入到表达性质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedE,并转化大肠杆菌BL21获得重组菌PPFedE。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明:该序列大小为459bp,与GENEBANK中的FedE结构编码序列(Z26520)完全一致。通过对菌体裂解物的SDS-PAGE电泳分析以及Westernblotting鉴定,证明重组大肠杆菌PPFedE的可以表达融合蛋白形式的FedE(命名为GST-FedE),即FedE蛋白(16.297ku)与谷胱苷肽转移酶(27.335ku)相连组成分子量为43.632ku的融合蛋白。
关键词
大肠杆菌
菌毛
F18
FedE
表达
鉴定
Keywords
Escherichia coli
fimbriae
F18
subunit, FedE
expression
分类号
S855.1 [农业科学—临床兽医学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌F18菌毛FedE蛋白的表达与鉴定
成大荣
徐建生
孙怀昌
高崧
刘俊斌
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005
7
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