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Oral Administration Following Subcutaneous Administration of FCV Vaccines Enhances Vaccine Efficacy against Challenge of a Highly Virulent Vs Feline Calicivirus 被引量:2
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作者 Sing Rong Kim Floyd-Hawkins Vicki King 《World Journal of Vaccines》 2014年第2期81-87,共7页
Feline calicivirus (FCV) is a common cause of upper respiratory and oral disease in cats. Highly virulent systemic strains of FCV (vs FCV) have been described. These vs FCV isolates cause characteristic edema, cutaneo... Feline calicivirus (FCV) is a common cause of upper respiratory and oral disease in cats. Highly virulent systemic strains of FCV (vs FCV) have been described. These vs FCV isolates cause characteristic edema, cutaneous ulcers and other clinical signs typically associated with FCV infection. Vs FCV isolates also cause high mortality even in previously vaccinated cats. We reported previously that the FCV serum cross-neutralization profile of cat serum generated using the oralnasal route of administration is broader than with subcutaneous administration (SC), as measured with a 26-FCV viral panel (Rong et al., Virus Research 122:95-108, 2006). In this report, we tested the in vivo ef- ficacy of the FCV vaccine, in a 4-way (FCV-FHV-FPV-FCp) format, by using a highly virulent vs FCV- 33585 as the challenge virus. Vaccines were administered as 2-dose subcutaneouly (SC/SC), or subcutaneously followed by orally (SC/Oral). The mortality induced by vs FCV-33585 in unvaccinated control cats was 78% (7 out of 9 cats). The mortality decreased to 44% (4 out of 9 cats) with cats vaccinated with the 4-way vaccine given SC/SC. However, when this vaccine was given SC/Oral, the mortality decreased to 10% (1 out of 10 cats). The clinical scores, calculated based on frequency and severity of various clinical signs, correlated with mortality data. These results demonstrated that oral administration of FCV vaccines, as the second dose following the first dose of subcutaneious administration, ehances FCV efficacy against challenge of a highly virulent vs FCV. We propose that not only oral vaccination offers convenience and needle-free inoculation, it also enhances FCV vaccine efficacy. 展开更多
关键词 Positive-Strand RNA fcv VS fcv calicivirus SUBCUTANEOUS ADMINISTRATION Oral/Oronasal ADMINISTRATION Serum-Virus Neutralization Vaccine Efficacy
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Isolation and phylogenetic analysis of feline calicivirus strains from various region of China 被引量:1
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作者 Longlong Cao Qiuyan Li +9 位作者 Kaituo Shi Liting Wei Hehao Ouyang Zijun Ye Wenguang Du Jiawen Ye Xiaochen Hui Jiakang Li Shengbo Cao Dengyuan Zhou 《Animal Diseases》 2022年第3期165-174,共10页
Feline calicivirus(FCV)is an important feline pathogen mainly causing upper respiratory tract disease,conjunctivitis,and stomatitis,and it is classifed into genotype I and genotype II.To investigate the prevalence and... Feline calicivirus(FCV)is an important feline pathogen mainly causing upper respiratory tract disease,conjunctivitis,and stomatitis,and it is classifed into genotype I and genotype II.To investigate the prevalence and molecular characteristics of FCV,this study collected 337 cat swab samples from animal hospitals in diferent regions of China from 2019 to 2021.The positive detection rate of FCV was 29.9%(101/337)by RT-PCR.Statistical analysis showed that FCV prevalence was signifcantly associated with living environment(p=0.0004),age(p=0.031)and clinical symptoms(p=0.00),but not with sex(p=0.092)and breed(p=0.171).The 26 strains of FCV were isolated using F81 cells.Phylogenetic analysis showed that 10 isolates belonged to genotype I,and 16 isolates belonged to genotype II.These 26 isolates were highly genetically diverse,of which HB7 isolate had three same virulence-related amino acid loci with VSD strains.Potential loci distinguishing diferent genotypes were identifed from 26 isolates,suggesting the genetic relationship between diferent genotypes.In addition,selection pressure analysis based on capsid protein of 26 isolates revealed that the protein is under diversifying selection.This study reveals the genetic diversity of FCV and provides a reference for the screening of vaccine candidate strains and the development of vaccines with better cross-protection efects. 展开更多
关键词 feline calicivirus Genetic diversity Phylogenetic analysis Selection pressure analysis ORF2 gene
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2020-2023年西安地区猫杯状病毒流行情况调查
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作者 于仕佳 陈冰洁 +1 位作者 张欣珂 杜涛峰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期118-122,共5页
为了解西安地区猫杯状病毒(FCV)病发病率与季节、猫的性别、品种、年龄、临床症状、血液检查结果等的相关性,将西北农林科大西安动物医院2020年6月至2023年6月期间FCV感染阳性病例进行统计分析。调查显示,西安地区FCV发病率为3.20%,怀... 为了解西安地区猫杯状病毒(FCV)病发病率与季节、猫的性别、品种、年龄、临床症状、血液检查结果等的相关性,将西北农林科大西安动物医院2020年6月至2023年6月期间FCV感染阳性病例进行统计分析。调查显示,西安地区FCV发病率为3.20%,怀疑病例的阳性检出率为45.81%,其中英国短毛猫发病率最高,占阳性病例总数的18.29%。此外,FCV感染与猫的品种和性别无相关性,而且发病无季节性。年龄方面,1周岁以下的猫发病率最高,占病例总数的65.33%。口炎、牙龈炎以及上呼吸道症状为本病最常见的症状,其中口炎和牙龈炎与FCV感染具有显著相关性。调查结果可为FCV感染在西安地区的防控提供参考依据。 展开更多
关键词 杯状病毒 流行情况
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猫杯状病毒的分离纯化及遗传进化特征分析
4
作者 马增贤 张娜 +5 位作者 卢琳琳 李春雨 杨勃 孙子龙 牛胜 张鼎 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1707-1714,共8页
猫杯状病毒(FCV)作为导致猫上呼吸道感染的重要病原,具有高度传染性,严重危害猫科动物健康。为了解山西省FCV分离株变异水平及遗传发育特征,使用猫肾细胞(CRFK)分离、纯化山西省FCV分离株,用透射电镜观察病毒形态,测定病毒半数感染量(TC... 猫杯状病毒(FCV)作为导致猫上呼吸道感染的重要病原,具有高度传染性,严重危害猫科动物健康。为了解山西省FCV分离株变异水平及遗传发育特征,使用猫肾细胞(CRFK)分离、纯化山西省FCV分离株,用透射电镜观察病毒形态,测定病毒半数感染量(TCID_(50))和生长曲线,基于结构蛋白VP1分析猫杯状病毒基因、氨基酸变异水平与遗传发育特征。结果显示,试验纯化得3株山西省FCV分离株(SX-2021-1、SX-2021-2和SX-2021-3),病毒大小约为40 nm,TCID_(50)为10^(-8.43)/mL,FCV感染CRFK细胞的6~72 h中,在24 h时病毒滴度达到最高(SX-2021-3)。SX-2021-1与SX-2021-2株的VP1基因同源性为99.8%,SX-2021-3株VP1基因呈现较高的变异性,与其他两株的同源性约为77%。FCV山西分离株与已公布FCV毒株同源性为70.7%~83.9%,其中SX-2021-1、SX-2021-2与我国黑龙江分离株(HRB-SS)同源性最高(83.9%),SX-2021-3与我国上海分离株(SH1)同源性最高(80.5%)。FCV山西分离株VP1蛋白在E区5′高变区和3′高变区均存在多个氨基酸位点突变,其中SX-2021-3株与其他两株的VP1蛋白氨基酸差异性明显。遗传进化分析结果显示,FCV山西分离株与疫苗株和VSD毒株亲缘关系均较远,SX-2021-1、SX-2021-2与我国黑龙江地区分离株(HRB-SS、WZ-1和XH)亲缘关系较近;SX-2021-3与上海毒株(SH1)处于同一分支。综上,本研究阐明了山西省FCV分离株变异水平及遗传发育特征,为FCV病原及疫苗研究提供了重要依据。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 山西省 同源性 遗传进化
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猫杯状病毒VP1蛋白的单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
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作者 张泽宇 董宁宁 +5 位作者 谈晓梅 李传锋 朱杰 刘光清 张伟 孟春春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5784-5791,共8页
本研究旨在制备并鉴定针对猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)VP1蛋白的单克隆抗体(monoclonal antibodies,mAbs)。本研究使用SH14株FCV全病毒作为免疫原,通过腹腔注射法免疫BALB/c小鼠,制备了针对VP1蛋白的mAb。通过ELISA筛选,成功获... 本研究旨在制备并鉴定针对猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)VP1蛋白的单克隆抗体(monoclonal antibodies,mAbs)。本研究使用SH14株FCV全病毒作为免疫原,通过腹腔注射法免疫BALB/c小鼠,制备了针对VP1蛋白的mAb。通过ELISA筛选,成功获得特异性单克隆抗体3A3C1株。对3A3C1株mAb进行了全面的生物学特性鉴定,3A3C1株mAb确认为IgG_(1)型,轻链为κ链。Western blot和间接免疫荧光检测的结果显示,3A3C1株mAb能特异性地识别并结合FCV SH14株、F9株和GZ22。此外,本研究还深入探究了3A3C1株mAb的线性抗原表位。通过分段表达VP1蛋白并进行详细的Western blot分析,最终确定3A3C1株mAb的线性抗原表位位于VP1蛋白的^(426)PSRLTPAGDYAITSG^(440)区域。本研究制备的3A3C1株mAb不仅是理解FCV免疫学特性的重要工具,也对发展FCV诊断方法和疫苗策略具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 单克隆抗体 抗原表位 衣壳蛋白
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基因Ⅱ型猫杯状病毒XA20-2023株的分离鉴定及基因组序列分析
6
作者 谈晓梅 张琦 +6 位作者 张树梅 朱旭 董宁宁 李娜 刘光清 徐彦召 孟春春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期754-760,共7页
为了解猫杯状病毒(FCV)的生物学特性及遗传规律,本研究对从陕西西安地区采集的17份疑似FCV感染的口鼻咽样品经PCR检测,并经PCR扩增FCV阳性样品的VP1基因并测序。采用SnapGene软件分析GenBank中国内外23株FCV参考株与所测VP1的氨基酸序列... 为了解猫杯状病毒(FCV)的生物学特性及遗传规律,本研究对从陕西西安地区采集的17份疑似FCV感染的口鼻咽样品经PCR检测,并经PCR扩增FCV阳性样品的VP1基因并测序。采用SnapGene软件分析GenBank中国内外23株FCV参考株与所测VP1的氨基酸序列,结果显示,17份拭子样品中有6份呈FCV阳性,阳性率为35.3%。氨基酸序列分析结果显示,所测VP1序列中有一条与GⅡ型FCV VP1氨基酸序列存在3处相同的变异,分别为N^(377)K、A^(539)V、G^(557)S,其余5条VP1氨基酸序列的变异与GI型FCV的VP1一致。表明所测VP1基因序列对应的FCV属于GⅡ型。将该FCV阳性样品接种CRFK细胞进行病毒的分离与传代,并在传代过程中观察细胞的CPE。将传至5代的病毒分别采用PCR与间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,结果显示连续传5代后,每代CRFK细胞均产生稳定且典型的CPE,并能观察到FCV的特异性绿色荧光,表明分离到一株GⅡ型FCV并命名为XA20-2023株。经PCR分段扩增第5代分离病毒的全基因组序列,测序拼接后显示XA20-2023株全长7 687 bp。采用MegAlign软件分析该株病毒与GenBank中10株FCV的全基因组、非结构蛋白、VP1及VP2编码基因序列的同源性。采用MEGA 11软件中的NJ法构建XA20-2023株与GenBank中85株FCV参考株全基因组序列的系统发育树。同源性分析结果显示,XA20-2023株与GenBank中10株FCV全基因组序列的同源性为76.4%~84.2%,与GⅡ型FCV SH株全基因组序列的同源性最高为84.2%,与GI型疫苗株F9、F4及FCV 255株全基因组序列的同源性分别为76.4%、77%及77.1%。非结构蛋白编码基因序列的同源性差异最大的是NS2(74.6%~94.2%),差异最小的是NS6(77.3%~82.9%)。VP1及VP2编码基因序列的同源性分别为73.7%~83.8%及76.0%~87.5%。进化树结果显示XA20-2023株与GⅡ型分离株处于同一分支,与GI型疫苗株F9和F4的遗传距离较远。上述结果进一步表明,XA20-2023株为GⅡ型FCV,与FCV代表株尤其是GI型疫苗株的同源性较低,且其变异程度较高。本研究丰富了西安地区流行的GⅡ型FCV基因库,并为后续揭示国内GⅡ型FCV的流行状况、遗传变异及其所致疫病的防制具有重要意义。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 分离鉴定 全基因组序列 序列分析
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北京地区猫杯状病毒的分离鉴定及VP1基因序列分析 被引量:4
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作者 张中华 纪志辉 +5 位作者 赵晓 苏煜智 董昊 司永芳 王金明 石文达 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期29-35,共7页
为了解猫杯状病毒(FCV)新流行毒株的流行情况、变异特点及致病性,通过收集2016-2022年4月北京地区多家宠物医院就诊疑似感染FCV的猫眼、鼻、咽拭子进行RT-PCR检测和分离培养,对分离到的5株FCV进行病毒含量测定、VP1基因序列分析,并对其... 为了解猫杯状病毒(FCV)新流行毒株的流行情况、变异特点及致病性,通过收集2016-2022年4月北京地区多家宠物医院就诊疑似感染FCV的猫眼、鼻、咽拭子进行RT-PCR检测和分离培养,对分离到的5株FCV进行病毒含量测定、VP1基因序列分析,并对其中1株进行致病性试验。结果显示,2018-2022年4月阳性率分别为36.98%、34.30%、41.33%、40.46%和34.39%,总阳性率为37.93%。5株FCV分离株VP1基因核苷酸和氨基酸同源性分别为74.1%~85.4%和83.6%~91.0%;5株FCV分离株与国内疫苗株255株核苷酸和氨基酸同源性分别为74.8%~84.5%和83.7%~91.6%;与国内疫苗株255株、国外疫苗株F9株在不同的小分支上。致病性试验结果显示,猫感染BJH13株FCV后出现精神沉郁、食欲减退、体温升高、体重下降、眼鼻分泌物增多和舌泛红、溃疡等典型感染FCV临床症状;FCV感染猫的舌和肺脏组织病理切片结果显示,FCV侵染猫舌和肺脏并呈典型感染FCV病理特征。以上结果表明,FCV阳性率高;分离株BJH13株致病力强;FCV VP1基因序列变异大,与目前临床使用的疫苗株255、F9株VP1基因存在明显差异,存在疫苗免疫失败的风险。这对现阶段FCV防控带来了巨大挑战,同时为今后的疫苗研发提供了候选毒株和科学依据。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 分离鉴定 VP1基因 序列分析 致病性
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北京部分地区猫泛白细胞减少症病毒、疱疹病毒和杯状病毒流行病学调查分析 被引量:1
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作者 张美华 张中华 +5 位作者 鲁锋 朱方超 赵俊鑫 苏煜智 武峥 石文达 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期138-141,共4页
为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)... 为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)或FCV(1638份)和体检动物样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)进行检测,并对结果进行统计分析。结果显示,FPV、FHV和FCV阳性率分别为57.51%、39.43%和42.31%;0~6月龄猫FPV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FPV;0~6月龄猫FHV阳性率显著高于>6~12月龄、>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FHV;0~6月龄和>6~12月龄猫FCV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~12月龄猫更易感染FCV;免疫猫FPV、FHV和FCV阳性率极显著低于未免疫猫(P<0.01),说明疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率呈强相关性,进一步表明疫苗免疫可有效降低FPV、FHV和FCV阳性率。因此,建议在0~6月龄及时进行猫三联疫苗免疫,可有效降低猫感染FPV、FHV和FCV的风险,更有利于宠物健康。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒(FPV) 猫疱疹病毒(FHV) 猫杯状病毒(fcv) 流行病学调查
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猫杯状病毒单克隆抗体的制备
9
作者 王莹 李佳康 +6 位作者 曾悦 史开拓 韦丽婷 彭佳佳 李秋燕 曹龙龙 周登元 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期401-405,共5页
制备猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)的特异性单克隆抗体,为FCV的免疫学诊断方法提供材料。本研究将经蔗糖梯度离心纯化的FCV灭活后免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,并对其进行一系列鉴定。结果成功获得1株能... 制备猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)的特异性单克隆抗体,为FCV的免疫学诊断方法提供材料。本研究将经蔗糖梯度离心纯化的FCV灭活后免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,并对其进行一系列鉴定。结果成功获得1株能够稳定分泌抗体的单克隆细胞株3B11。MAb 3B11抗体类型鉴定其重链属于IgG_(1)、轻链为κ链。MAb 3B11能与FCV-SH192发生特异性反应;小鼠腹水MAb 3B11对5株FCV毒株具有较高的ELISA效价;与5株FCV毒株具有间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)结合特性。本研究制备的MAb 3B11对FCV具有良好的特异性、免疫反应性及广谱识别性,为FCV诊断方法的优化、流行毒株筛选以及基础研究提供生物原料。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 单克隆抗体 特异性 反应性
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猫杯状病毒实时荧光定量逆转录PCR检测方法的建立
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作者 李静怡 熊雷 +4 位作者 黄莉璎 刘晓鹏 杨盛奋 金京勋 王弋 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期64-72,共9页
为了建立可快速检测猫杯状病毒(FCV)的方法,本试验采用肽核酸(PNA)设计分子信标荧光探针,优化反应体系和条件,建立了FCV实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测方法,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证,并进行临床样本检测。结果显... 为了建立可快速检测猫杯状病毒(FCV)的方法,本试验采用肽核酸(PNA)设计分子信标荧光探针,优化反应体系和条件,建立了FCV实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测方法,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证,并进行临床样本检测。结果显示,建立的RT-qPCR检测FCV参考株具有良好的线性关系(R^(2)=0.9995),最低检测限为1×10^(2)TCID_(50)/mL,对其他相关病毒无有效响应,组内变异系数和组间变异系数均小于1%。应用该方法检测33份临床样本,阳性率为51.5%。由此可见,本试验建立的RT-qPCR敏感性、特异性和重复性均良好,可为FCV的早期快速诊断和疫病防控等提供检测手段。 展开更多
关键词 猫杯状病毒(fcv) 肽核酸(PNA) 分子信标荧光探针 实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR) 开放阅读框(ORF)
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猫杯状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:10
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作者 姜雪 高玉伟 +6 位作者 胡桂学 杨松涛 赵艳丽 刘秋燕 徐春忠 梁秀娟 夏咸柱 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期973-977,共5页
根据GenBank中编码猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白ORF2的保守序列,设计并合成了一对引物和相应的TaqMan探针,建立了快速检测FCV的荧光定量PCR方法.通过对该方法的反应体系和反应条件进行优化,建立了标准曲线,给出了特异性、敏感性和重复性实验... 根据GenBank中编码猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白ORF2的保守序列,设计并合成了一对引物和相应的TaqMan探针,建立了快速检测FCV的荧光定量PCR方法.通过对该方法的反应体系和反应条件进行优化,建立了标准曲线,给出了特异性、敏感性和重复性实验,并对临床24份疑似样品(其中阳性3份、阴性21份)进行检测.结果表明:该方法检测cDNA的线性关系为0.992,线性范围为2.26×1011-2.26×101拷贝/μL;可检测出样品中的FCV,其他猫相关病毒检测为阴性;批内重复性实验变异系数为2.158%,与病毒分离结果相符. 展开更多
关键词 猫杯状病毒(fcv 荧光定量PCR 检测方法
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猎豹与虎猫杯状病毒的分离及其超变区基因比较研究 被引量:20
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作者 高玉伟 夏咸柱 +3 位作者 扈荣良 黄耕 徐春忠 王铁东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期179-182,共4页
用F8 1细胞从上海某动物园患口腔溃疡的猎豹和虎的唾液病料中分离获得两株杯状病毒 ,经形态学、理化学、生物学鉴定和病毒核酸超变区基因RT_PCR扩增与序列测定证明两株病毒均为猫杯状病毒 (FCV) ,分别命名为FCV/cheetah/Shanghai/ 0 2 /... 用F8 1细胞从上海某动物园患口腔溃疡的猎豹和虎的唾液病料中分离获得两株杯状病毒 ,经形态学、理化学、生物学鉴定和病毒核酸超变区基因RT_PCR扩增与序列测定证明两株病毒均为猫杯状病毒 (FCV) ,分别命名为FCV/cheetah/Shanghai/ 0 2 / 2 0 0 2与FCV/tiger/Shanghai/ 0 3/ 2 0 0 2。人工感染猫可引起体温升高 ,口腔溃疡 ,食欲下降等症状。两株病毒的超变区序列 5 2 0bp长片段间的同源性为 99.2 % ,与国内桂林虎分离株 (TFCV9710 )的同源性为 74 .0 % ,与国外分离株的总体同源性为 5 8.1% ,说明不同宿主或同种不同个体间杯状病毒分离株超变区核酸差异十分显著 。 展开更多
关键词 猎豹 猫杯状病毒 病毒分离 序列分析
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同时检测猫细小病毒、杯状病毒、疱疹病毒1型多重PCR方法的建立 被引量:15
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作者 王翀 刘大飞 +6 位作者 刘春国 柴洪亮 张洪英 程景 吕健 华育平 曲连东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期31-33,共3页
为建立检测多种猫科病毒的多重PCR方法,本研究参照GenBank中登录的猫细小病毒(FPV)的NS基因序列、猫杯状病毒(FCV)的ORF2基因序列以及猫疱疹病毒(FHV-I)的TK基因序列设计合成3对引物,通过对反应体系及条件的优化,建立了可以同时扩增FPV(... 为建立检测多种猫科病毒的多重PCR方法,本研究参照GenBank中登录的猫细小病毒(FPV)的NS基因序列、猫杯状病毒(FCV)的ORF2基因序列以及猫疱疹病毒(FHV-I)的TK基因序列设计合成3对引物,通过对反应体系及条件的优化,建立了可以同时扩增FPV(392 bp)、FCV(922 bp)和FHV-I(290 bp)的多重PCR方法。该检测方法结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测出以上3种病毒,FPV、FCV和FHV的最低检出限分别为101.5TCID50、101.9TCID50和101.2TCID50。以该方法对黑龙江省各地区收集的120份血清进行检测,其中FPV、FCV和FHV-I的阳性率分别为5%(6/120)、2.5%(3/120)和4.1%(5/120),证明该方法可以用于3种病毒的检测,具有良好的特异性和敏感性。 展开更多
关键词 猫细小病毒 猫杯状病毒 猫疱疹病毒 多重PCR
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猫鼻气管炎病毒、杯状病毒、泛白细胞减少症病毒的分离及其形态学观察 被引量:7
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作者 李六金 李成 +6 位作者 姜焕宏 吴钟灵 胡淑贤 师长宏 张志培 李学忠 刘晓荣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期341-345,共5页
根据病毒的理化特性 ,从猫三联活疫苗中分离出猫鼻气管炎、猫杯状和猫泛白细胞减少症病毒 ;筛选出每种病毒敏感的细胞 ,并将该 3种病毒分别在其中传代与扩增 ;通过电镜观察此 3种病毒的形态学特征及其在宿主细胞内增殖部位、分布情况等 ... 根据病毒的理化特性 ,从猫三联活疫苗中分离出猫鼻气管炎、猫杯状和猫泛白细胞减少症病毒 ;筛选出每种病毒敏感的细胞 ,并将该 3种病毒分别在其中传代与扩增 ;通过电镜观察此 3种病毒的形态学特征及其在宿主细胞内增殖部位、分布情况等 ,并以此对猫 3种病毒进行了初步鉴定。 展开更多
关键词 猫鼻气管炎病毒 猫杯状病毒 猫泛白细胞减少症病毒 电镜技术 病毒形态学
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猫杯状病毒全基因组的克隆及序列分析 被引量:9
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作者 郑翠玲 向华 +2 位作者 宣华 王延树 严悌昆 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期109-111,共3页
采用RT-PCR和重组PCR扩增了猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)CH-GD株的全基因,并进行了序列测定,用DNAStar软件对其核苷酸序列和氨基酸序列进行比较分析。结果表明,首次分离于中国广东的CH-GD株与各参考毒株有较大的差异。CH-GD株与... 采用RT-PCR和重组PCR扩增了猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)CH-GD株的全基因,并进行了序列测定,用DNAStar软件对其核苷酸序列和氨基酸序列进行比较分析。结果表明,首次分离于中国广东的CH-GD株与各参考毒株有较大的差异。CH-GD株与各参考毒株之间的同源性仅为75.4%~77.1%,明显低于各参考毒株之间的同源性(78.9%~99.9%)。同时遗传进化树显示,14个分离株形成两大分支,CH-GD株独自在一分支,各分离株无明显的地域性差异。对FCV衣壳蛋白6个区(A^F)的分析结果发现,CH-GD株中A^F区的特点与报道的相符。此外还发现,CH-GD株有3个区域的3个连续的氨基酸发生了变异,与参考毒株相比,CH-GD株在这3个区域的抗原性和亲水性也都发生了相应的变化。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 全基因组 克隆 序列分析
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猫杯状病毒分离株VP1基因序列与致病性分析 被引量:5
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作者 刘健 白艺兰 +11 位作者 李鑫 桂亚萍 鞠厚斌 龚国华 夏炉明 陈伟锋 朱晓英 常晓静 李增强 唐聪圣 王建 赵洪进 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3530-3539,共10页
旨在了解上海地区猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)VP 1基因与致病性,采用常规方法分离鉴定出13株FCV,经RT-PCR和测序获得分离株VP 1的基因序列,与参考株VP 1基因进行同源性和遗传演化分析,对2株分离株进行动物致病性试验。结果显示... 旨在了解上海地区猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)VP 1基因与致病性,采用常规方法分离鉴定出13株FCV,经RT-PCR和测序获得分离株VP 1的基因序列,与参考株VP 1基因进行同源性和遗传演化分析,对2株分离株进行动物致病性试验。结果显示,13株上海地区分离株VP 1基因核苷酸序列相互间相似性为74.3%~99.8%,与参考株核苷酸序列和氨基酸序列相似性也较低,符合FCV易突变的特征;进化树分析表明,上海地区FCV流行株主要来自国内北方地区,少数毒株来自国外地区;通过对宿主临床症状、VP 1进化树和VS-FCV特征性氨基酸位点进行分析,筛选出7株FCV强毒株;动物致病性试结果验表明,FCV-SH202101株和FCV-SH202113株可导致感染猫发病和死亡,潜伏期为1~2 d,接种后第3天即可检测到排毒,不同年龄段猫的病程不一致,可导致幼猫5 d后死亡,成年猫病程可持续11~18 d,2株分离株在致病性方面均符合VS-FCV特征。本研究丰富了中国FCV的分子流行病学资料,为VS-FCV毒株的筛选提供了有力的证据,也为FCV疫苗的研究提供了技术支持。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 VP1 序列同源性 系统发育树 致病性
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猫杯状病毒的分离鉴定及超变区基因序列分析 被引量:5
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作者 刘春国 刘永相 +10 位作者 刘大飞 郭东春 田进 仇铮 刘鑫 蒋艳妹 刘家森 彭永刚 李岩 刘明 曲连东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期885-887,共3页
为了解猫杯状病毒(FCV)的生物学特性,本研究对猫体内分离到的一株FCV HRB-SS株进行了病毒学、分子生物学鉴定和遗传学分析。结果显示该分离株能够在猫肾细胞系(CRFK)中产生明显的细胞病变,形成蚀斑。FCV的VP1基因超变区核苷酸序列分析... 为了解猫杯状病毒(FCV)的生物学特性,本研究对猫体内分离到的一株FCV HRB-SS株进行了病毒学、分子生物学鉴定和遗传学分析。结果显示该分离株能够在猫肾细胞系(CRFK)中产生明显的细胞病变,形成蚀斑。FCV的VP1基因超变区核苷酸序列分析结果显示,HRB-SS分离株与疫苗株CVXPOLYCAP同源性最高,为78.2%,而与中国分离株CH-JL和GD的同源性最低,仅为67.9%和68.8%;推导氨基酸序列分析结果显示,HRB-SS分离株与12Q087-5、UTCVM-NH12和FCLF4的同源性最高,为86.7%,而与中国分离株的同源性仅为73.9%。系统发育树分析结果显示,HRB-SS分离株与中国分离株亲缘关系较远。本研究结果表明,FCV HRB-SS与我国FCV具有不同的遗传起源。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 分离鉴定 超变区 序列分析
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6例猫杯状病毒病例的诊断及治疗 被引量:7
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作者 朱晓英 刘健 +5 位作者 白艺兰 赵洪进 夏炉明 李增强 陈伟锋 常晓静 《畜牧与兽医》 北大核心 2022年第1期118-122,共5页
上海市某宠物店15只猫中有6只患猫出现呼吸道症状。经临床检查发现,6只患猫体温、呼吸、心率都正常;1#、2#、3#、5#和6#患猫血常规检测正常,4#患猫血常规显示有轻度脱水。对6只患猫的样品进行猫杯状病毒核酸检测和基因测序,结果均为猫... 上海市某宠物店15只猫中有6只患猫出现呼吸道症状。经临床检查发现,6只患猫体温、呼吸、心率都正常;1#、2#、3#、5#和6#患猫血常规检测正常,4#患猫血常规显示有轻度脱水。对6只患猫的样品进行猫杯状病毒核酸检测和基因测序,结果均为猫杯状病毒阳性。对6只患猫进行抗菌、点眼、清洁口腔等治疗,患猫均在10~14 d内恢复健康。调查发现,6只患猫中的4只之前已经免疫过一次猫三联疫苗,且超过21 d,另外9只健康猫都进行过2次以上的猫三联免疫。对15只猫进行猫杯状病毒抗体检测,结果6只患猫中2只未免疫的患猫和1只已免疫的患猫无抗体,1只已免疫的患猫抗体偏低,2只已免疫的患猫抗体良好;9只健康猫中1只抗体偏低,7只抗体良好,1只抗体偏高。试验表明,疫苗具有良好的免疫效果,但由于杯状病毒丰富的抗原多样性和遗传变异性,疫苗免疫无法产生针对杯状病毒感染的完全保护能力。 展开更多
关键词 杯状病毒 抗体检测
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猫杯状病毒的分离鉴定及其全基因组的序列分析 被引量:5
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作者 何平 杨文娟 +10 位作者 李法凯 赵卫锋 周华波 李瑞凯 梁明丽 韦红云 何剑桥 祝健 韦祖樟 黄伟坚 陈樱 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第1期1-6,共6页
本研究采用MDCK细胞从养殖场患病猪的鼻拭子样品中分离获得1株猫的杯状病毒(Feline calicivirus,FCV),命名为GX01-2013。采用RT-PCR方法扩增了该毒株的全基因组,并进行了序列测定和分析。结果表明,该毒株基因组全长7704 bp,与哈尔滨... 本研究采用MDCK细胞从养殖场患病猪的鼻拭子样品中分离获得1株猫的杯状病毒(Feline calicivirus,FCV),命名为GX01-2013。采用RT-PCR方法扩增了该毒株的全基因组,并进行了序列测定和分析。结果表明,该毒株基因组全长7704 bp,与哈尔滨分离株HRB-SS较为相近,其核苷酸同源性为82.3%。根据FCV衣壳蛋白构建的遗传进化树分析,发现该病毒与F9、F4、225和2024疫苗株均不在同一分支,氨基酸同源性为84.2%~87.7%,各毒株间无明显地域差异。此外,VP1蛋白的E区(426~521aa)发现有4个中和性抗原位点发生改变。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 全基因组 遗传进化分析
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猫疱疹病毒Ⅰ型、猫杯状病毒、支气管败血波氏杆菌多重荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:6
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作者 周红蕾 程淑琴 +3 位作者 李佳鹏 刘涵 姚志兰 张蕾 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第3期130-138,共9页
旨在建立检测猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus 1,FHV-1)、猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)、支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)多重TaqMan荧光定量PCR方法。基于FHV-1的胸苷激酶(TK)基因、FCV的衣壳蛋白VP1基因... 旨在建立检测猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus 1,FHV-1)、猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)、支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)多重TaqMan荧光定量PCR方法。基于FHV-1的胸苷激酶(TK)基因、FCV的衣壳蛋白VP1基因、Bb的皮肤坏死毒素基因(DNT1)序列保守区域设计并合成TaqMan荧光定量PCR引物和探针,以FHV-1、FCV、Bb、猫细小病毒、沙门菌、金黄色葡萄球菌为模板验证引物和探针的特异性。制备重组质粒pMD18T-FHV-TK、pMD18T-FCV-VP1、pMD18T-Bb-DNT1作为标准品,经矩阵法确定最佳反应体系。以10倍梯度稀释的标准品为模板检测方法的灵敏性。应用建立的方法对32份临床具有上呼吸道感染症状的猫眼、口、鼻拭子检测,以评估该方法的可行性。结果显示:该方法可特异性检出FHV-1、FCV、Bb,且与猫细小病毒、沙门菌、金黄色葡萄球菌无交叉反应;灵敏度试验表明该方法对FHV-1、FCV、Bb的最低检出限分别为10、10和100拷贝/μL;应用该方法从32份猫临床样品中检测出FHV-1阳性11份、FCV阳性21份、Bb阳性4份,并经PCR测序验证。本研究初步建立了FHV-1、FCV、Bb多重TaqMan荧光定量PCR检测方法,具有特异性强、敏感性高的特点,为临床猫上呼吸道疾病病原的分子检测提供参考。 展开更多
关键词 猫疱疹病毒Ⅰ型 猫杯状病毒 支气管败血波氏杆菌 TaqMan荧光定量PCR
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