SDE葫芦巴叶挥发性提取物GC-MS分析与抗氧化活性研究

以葫芦巴叶为研究对象,采用同时蒸馏萃取法,配合气相色谱-质谱技术(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)系统分析葫芦巴叶中挥发性成分并研究其抗氧化活性。结果显示,同时蒸馏萃取法所得葫芦巴叶挥发性提取物为液态,呈黄色,得率为0.37%,具有浓郁的芳香气味且略带刺激性;GC-MS共检出23种化合物,包括腈类、萜烯类、酚类、醇类、醛类、醚类等。其中,含量最多的为苄基腈(42.914%),其次为(+)-4-蒈烯(11.749%)、桉叶醇(8.774%)、麝香草酚(5.321%)、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚(4.582%)和香豆素(3.773%)等;对提取得到的挥发性物质进行抗氧化活性测定,结果显示,其总还原力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力和ABTS+自由基(ABTS+·)清除能力与质量浓度均呈量效关系,但总体上,其抗氧化能力较阳性对照VC小。

葫芦巴籽和桑叶提取混合物对胰岛素抵抗糖脂代谢紊乱大鼠模型的降血糖作用及其机制研究

目的探讨葫芦巴籽和桑叶提取混合物(fenugreek seed and mulberry leaf extract,FSML)对胰岛素抵抗糖脂代谢紊乱模型大鼠的降血糖作用及其作用机制。方法建立2个不同的胰岛素抵抗糖脂代谢紊乱大鼠模型,测定大鼠血糖、血脂指标,以及胰岛素受体底物蛋白1(IRS1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白的表达。结果对模型1,FSML高、低剂量组均能明显降低模型大鼠的0.5h血糖值及AUC(与模型组比较,P<0.01)。对模型2,FSML高剂量组能显著降低0.5 h血糖值及AUC(与模型组比较,P<0.05)。Western blot实验结果表明,FSML高、低剂量组均能提高GLUT4和PPARγ蛋白的表达(与模型组比较,P<0.05)。结论 FSML具有降血糖作用,其作用机制可能是上调PPARγ蛋白的表达,调节胰岛素信号通路,增加GLUT4蛋白表达,从而增加细胞的葡萄糖摄取,减少外周胰岛素靶组织的胰岛素抵抗。

胡芦巴叶黄酮组分的制备、表征及其对肝细胞氧化损伤的保护作用

研究胡芦巴叶黄酮组分(fenugreek leaf flavonoids,FLFs)中的主要成分及其抗氧化活性。利用溶剂萃取法对胡芦巴叶中的黄酮组分进行富集制备,采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q-TOF-MS/MS)对其中的黄酮类化合物进行表征;同时考察FLFs对H;O;诱导的L02肝细胞应激损伤的保护作用,首先采用MTT法检测L02细胞活力;H;O;诱导L02细胞建立氧化应激损伤模型;试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的泄漏量、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力;荧光染色法观察细胞凋亡情况;Western bolt法检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)等蛋白及其磷酸化蛋白的表达水平。结合MS碎片离子信息,经数据库检索和人工解析,FLFs中含有以槲皮素和山柰酚为苷元的8种黄酮类化合物;活性研究发现,与H;O;处理组相比,3.125~25μg·mL;的FLFs能够提高损伤后L02细胞存活率,并且能浓度依赖性地降低L02细胞中LDH泄漏量和MDA的含量,增强GSH、SOD和CAT等酶的活性;抑制JNK和ERK1/2蛋白磷酸化水平,促进Nrf2和HO-1蛋白水平。荧光染色结果显示,H;O;组细胞核呈浓缩致密的强蓝色荧光,FLFs组的蓝色荧光强度明显降低。FLFs对H;O;所致的L02细胞氧化损伤具有保护作用,作用机制与其激活MAPKs/Nrf2/HO-1信号通路从而增强细胞清除自由基能力和改善细胞凋亡2个方面因素有关,胡芦巴叶抗氧化作用与其中含有丰富的黄酮类化合物有关。