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Fib-L基因干扰对棉大卷叶螟丝素蛋白的影响
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作者 陈春霞 马三恒 +1 位作者 苏宏华 杨益众 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2018年第2期109-113,共5页
为验证丝素蛋白轻链(Fib-L)基因对棉大卷叶螟[Sylepta derogata(Fabricius)]丝素蛋白的影响,采用RNA干扰(RNAi)技术沉默Fib-L基因,系统测定棉大卷叶螟5龄幼虫丝中氨基酸组分和丝的力学性能。结果表明:棉大卷叶螟Fib-L基因被干扰后,氨基... 为验证丝素蛋白轻链(Fib-L)基因对棉大卷叶螟[Sylepta derogata(Fabricius)]丝素蛋白的影响,采用RNA干扰(RNAi)技术沉默Fib-L基因,系统测定棉大卷叶螟5龄幼虫丝中氨基酸组分和丝的力学性能。结果表明:棉大卷叶螟Fib-L基因被干扰后,氨基酸组分与对照相比发生了明显变化,特别是酪氨酸经RNAi处理后几乎检测不到;碱性与酸性氨基酸及小侧基与大侧基氨基酸比例也明显下降;RNAi处理后棉大卷叶螟丝的吸湿能力受到明显影响,且较大幅度地降低丝的力学性能。该研究提示Fib-L基因在调控棉大卷叶螟吐丝过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 棉大卷叶螟 fib-l基因 氨基酸 力学性能 RNA干扰
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家蚕丝素蛋白轻链基因(fib-L)启动子序列的克隆及其活性分析 被引量:14
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作者 周文林 曹广力 +3 位作者 薛仁宇 虞晓华 沈卫德 贡成良 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期547-554,共8页
家蚕Bombyx mori丝素蛋白轻链(fibroin light-chain,fib-L)基因fib-L具有在后部丝腺组织专一性、高效性表达的特点。为了利用其启动子构建能够表达外源基因的丝腺生物工厂,本实验对fib-L启动子活性进行了研究。通过PCR法克隆了fib-L启... 家蚕Bombyx mori丝素蛋白轻链(fibroin light-chain,fib-L)基因fib-L具有在后部丝腺组织专一性、高效性表达的特点。为了利用其启动子构建能够表达外源基因的丝腺生物工厂,本实验对fib-L启动子活性进行了研究。通过PCR法克隆了fib-L启动子元件,序列分析显示fib-L启动子由位于-33^-25处的TATA盒元件和位于-128^-121处的特征性序列GTCAATTT共同组成。用fib-L启动子控制报告基因DsRed进行家蚕BmN细胞和蚕体内的瞬时表达研究,结果表明fib-L启动子可以驱动DsRed报告基因在BmN细胞和家蚕后部丝腺组织中瞬时表达。 展开更多
关键词 家蚕 丝素轻链基因 启动子 DSRED 瞬时表达
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家蚕丝素轻链蛋白多克隆抗体的制备及应用 被引量:2
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作者 刘春 韩宇 +4 位作者 荣海博 侯勇 陈玉琳 高志宏 夏庆友 《蚕学通讯》 2009年第1期9-14,共6页
本研究通过用回收纯化的Fib-L蛋白为抗原免疫家兔,获得多克隆抗体,通过与家蚕大造5龄5d的10个不同组织进行Western blot,结果表明,制备的Fib-L抗体能识别在后部丝腺特异合成的Fib-L蛋白,表明该抗体有较好的特异性。利用此抗体进行丝腺... 本研究通过用回收纯化的Fib-L蛋白为抗原免疫家兔,获得多克隆抗体,通过与家蚕大造5龄5d的10个不同组织进行Western blot,结果表明,制备的Fib-L抗体能识别在后部丝腺特异合成的Fib-L蛋白,表明该抗体有较好的特异性。利用此抗体进行丝腺组织的免疫组化,经抗体的一系列的梯度稀释和条件探索,发现当Fib-L一抗在1∶50和荧光二抗1∶1000的条件下得到理想的免疫组化结果,在荧光显微镜下观察到了二抗标记的绿色荧光。以上结果显示,本实验成功制得Fib-L蛋白抗体,获得丝腺组织免疫组化的一些重要参考信息,为家蚕丝腺功能基因的研究及细胞定位提供了一定的参考价值。 展开更多
关键词 丝素基因 fib-l蛋白 多克隆抗体 WESTERN blot免疫组化
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蓬子菜中香叶木苷抗血栓形成作用的实验研究 被引量:7
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作者 万晓晨 董坤 +2 位作者 寇韩旭 隋文霞 马英丽 《中医药信息》 2014年第6期4-7,共4页
目的:研究蓬子菜活性成分-香叶木苷的抗凝血和抗静脉血栓作用。方法:通过结扎大鼠下腔静脉造成下肢静脉血栓模型,通过对凝血四项指标:凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)的观察,及下腔... 目的:研究蓬子菜活性成分-香叶木苷的抗凝血和抗静脉血栓作用。方法:通过结扎大鼠下腔静脉造成下肢静脉血栓模型,通过对凝血四项指标:凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)的观察,及下腔静脉在光镜下的组织学变化,研究香叶木苷对血栓大鼠凝血功能的影响。结果:香叶木苷90、180、360mg/kg能明显延长PT和TT时间;180、360mg/kg能明显延长APTT时间;90、180、360mg/kg能显著降低FIB含量(P<0.05或P<0.01)。光镜观察香叶木苷高、中、低剂量组均能明显抑制大鼠下腔静脉血栓形成,保护血管内皮细胞,且中剂量组与阿司匹林组作用相当。结论:香叶木苷具有抗凝血和抗静脉血栓形成作用。 展开更多
关键词 蓬子菜 香叶木苷 静脉血栓形成 纤维蛋白原
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Identification and characterization of extrachromosomal circular DNA in the silk gland of Bombyx mori
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作者 Min Zhu Xinyu Tong +6 位作者 Qunnan Qiu Jun Pan Shulin Wei Yuming Ding Yongjie Feng Xiaolong Hu Chengliang Gong 《Insect Science》 SCIE CSCD 2023年第6期1565-1578,共14页
The silk gland cells of silkworm are special cells which only replicate DNA in the nucleus without cell division throughout the larval stage. The extrachromosomal circular DNAs (eccDNAs) have not yet been reported in ... The silk gland cells of silkworm are special cells which only replicate DNA in the nucleus without cell division throughout the larval stage. The extrachromosomal circular DNAs (eccDNAs) have not yet been reported in the silk gland of silkworms. Herein, we have explored the characterization of eccDNAs in the posterior silk gland of silkworms. A total of 35 346 eccDNAs were identified with sizes ranging from 30 to 13 569 549 bp. Motif analysis revealed that dual direct repeats are flanking the 5′ and 3′ breaking points of eccDNA. The sequences exceeding 1 kb length in eccDNAs present palindromic sequence characteristics flanking the 5′ and 3′ breaking points of the eccDNA. These motifs might support possible models for eccDNA generation. Genomic annotation of the eccDNA population revealed that most eccDNAs (58.6%) were derived from intergenic regions, whereas full or partial genes were carried by 41.4% of eccDNAs. It was found that silk protein genes fib-H, fib-L, and P25, as well as the transcription factors SGF and sage, which play an important regulatory role in silk protein synthesis, could be carried by eccDNAs. Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes enrichment analyses showed that the genes carried by eccDNAs were mainly associated with the development and metabolism-related signaling pathways. Moreover, it was found that eccDNAfib-L could promote the transcription of fib-L gene. Overall, the results of the present study not only provide a novel perspective on the mechanism of silk gland development and silk protein synthesis but also complement previously reported genome-scale eccDNA data supporting that eccDNAs are common in eukaryotes. 展开更多
关键词 Bombyx mori eccDNAfib-l extrachromosomal circular DNA(eccDNA) fib-l silk gland
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