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表达禽腺病毒血清4型Fiber2蛋白的重组耐热新城疫病毒的构建及免疫效果评估 被引量:2
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作者 商雨 李林涛 +9 位作者 李丽 徐英英 冯贺龙 汪宏才 张蓉蓉 曾哲 王红琳 罗青平 邵华斌 温国元 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第2期650-659,共10页
【目的】研究针对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)的耐热基因工程疫苗。【方法】利用反向遗传学操作技术将NDV耐热株的HN基因替换到LaSota疫苗株上,再将禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus sero... 【目的】研究针对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)的耐热基因工程疫苗。【方法】利用反向遗传学操作技术将NDV耐热株的HN基因替换到LaSota疫苗株上,再将禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)的Fiber2基因插入到其基因组上,构建表达Fiber2蛋白的重组耐热NDV质粒pTS-HN-Fiber2。通过病毒拯救技术拯救重组NDV rTS-HN-Fiber2,并测定其生物学特性和作为疫苗候选株的免疫原性和攻毒保护性。【结果】rTS-HN-Fiber2的鸡胚平均致死时间>168 h,且脑内接种致病指数为0,属于弱毒的范畴;在细胞上的生长曲线结果表明,rTS-HN-Fiber2与亲本LaSota株有相似的生长曲线,但最终的生长滴度略低于LaSota株;rTS-HN-Fiber2在56℃处理15 min后,病毒滴度下降约10^(3) TCID_(50)/mL,而LaSota株56℃处理5 min几乎无感染性;间接免疫荧光试验结果表明,rTS-HN-Fiber2能表达Fiber2蛋白。免疫和攻毒试验结果显示,rTS-HN-Fiber2能产生NDV抗体,且能显著提高雏鸡在FAdV-4强毒下的存活率,减轻FAdV-4强毒引起的组织病变,降低组织中的病毒载量。【结论】本研究成功构建了表达FAdV-4 Fiber2蛋白的重组耐热NDV,该病毒保持了亲本LaSota株的弱毒生物学特性,但热稳定性有显著提升;重组NDV免疫雏鸡可产生针对NDV和FAdV-4强毒的保护,该重组NDV可作为开发针对FAdV-4和NDV二联基因工程疫苗的候选病毒株。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型(FAdV-4) 新城疫病毒(NDV) fiber2蛋白 重组病毒 耐热
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禽腺病毒血清4型Fiber2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定 被引量:6
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作者 郭瑞珍 苏冰倩 +6 位作者 王棋 王一 于朋伟 孟洁洁 齐艳丽 杨国宇 褚贝贝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期2000-2012,共13页
旨在制备禽腺病毒血清4型(FAdV-4)纤突蛋白(Fiber2)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的可溶性重组蛋白NusA-Fiber2作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得3株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白MAb的杂交瘤细胞株2G5、2G8、4C2,取细胞... 旨在制备禽腺病毒血清4型(FAdV-4)纤突蛋白(Fiber2)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的可溶性重组蛋白NusA-Fiber2作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得3株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白MAb的杂交瘤细胞株2G5、2G8、4C2,取细胞株2G5制备腹水并纯化,利用间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)和Western blot鉴定该单抗的特异性。用制备的单抗包被酶标板,通过一系列的优化,建立了FAdV-4 Fiber2双抗夹心ELISA检测方法。通过逐步截短分析鉴定出单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明:成功获取3株单克隆细胞株2G5、2G8、4C2。MAb 2G5可与原核表达纯化的Fiber2蛋白及FAdV-4特异性反应。建立的双抗夹心ELISA检测方法具有很好的特异性、灵敏性和重复性。该MAb识别的表位序列是N端aa1—33。本研究成功制备了具有良好Western blot和IFA反应原性的单克隆抗体,为Fiber2蛋白功能研究和FAdV-4新型表位疫苗商品化研发奠定了基础。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 fiber2蛋白 单克隆抗体 双抗夹心ELISA 表位鉴定
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一株禽腺病毒4型Fiber2蛋白单克隆抗体的制备 被引量:3
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作者 谢明 李国攀 +6 位作者 胡基雄 张志翔 艾笑扬 陈帝斯 李杨 尹俊翔 荣俊 《湖北农业科学》 2022年第10期121-126,131,共7页
制备禽腺病毒4型(FAdV-4)Fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,将重组蛋白FAdV-4 Fiber2纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,分离脾脏中的淋巴细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,筛选得到10株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白单克隆抗体的阳性杂... 制备禽腺病毒4型(FAdV-4)Fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,将重组蛋白FAdV-4 Fiber2纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,分离脾脏中的淋巴细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,筛选得到10株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株1B5F1、1B5G11、1B5C1、1B5D2、1B5E3、1B5F3、1B5E4、1B5G4、1B5A8、1B5G8,取分泌抗体水平最高的1B5F1细胞株制备腹水,利用斑点杂交(Dot blot)和间接免疫荧光试验(IFA)进行特异性检测。结果表明,成功制备10株杂交瘤细胞株;制备的腹水能与FAdV-4 Fiber2蛋白及FAdV-4攻毒后的鸡肝组织产生特异性反应,证明成功制备了FAdV-4 Fiber2蛋白特异性单克隆抗体。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 fiber2蛋白 单克隆抗体
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安卡拉病毒贵州分离株Fiber2基因的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 方天 何玲 +4 位作者 尹德晶 岳筠 朱二鹏 文明 程振涛 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第6期1603-1611,共9页
Fiber2蛋白是禽腺病毒血清4型(FAdV-4,又称安卡拉病毒)重要的免疫原蛋白,为深入了解FAdV-4贵州株Fiber2基因的遗传变异情况,本研究利用PCR技术扩增FAdV-4贵州晴隆株(GZ-QL)Fiber2基因,胶回收后将其连接至pMD19-T载体,转化入DH5α筛选阳... Fiber2蛋白是禽腺病毒血清4型(FAdV-4,又称安卡拉病毒)重要的免疫原蛋白,为深入了解FAdV-4贵州株Fiber2基因的遗传变异情况,本研究利用PCR技术扩增FAdV-4贵州晴隆株(GZ-QL)Fiber2基因,胶回收后将其连接至pMD19-T载体,转化入DH5α筛选阳性克隆质粒,经质粒PCR及双酶切鉴定后进行DNA测序,然后对测序结果进行生物信息学分析。结果显示,GZ-QL株Fiber2基因全长为1 440 bp,与四川分离的SCnj1601强毒株、北京分离的NIVD2强毒株Fiber2基因核苷酸同源性均为100.0%,与FAdV-4经典ON1株Fiber2基因核苷酸同源性为95.9%,两者位于相同进化分支。GZ-QL Fiber2蛋白共有33个氨基酸突变位点,其中,在第11~15位之间有5个氨基酸插入;蛋白质亲水性平均值为-0.031,其二级结构以无规则卷曲为主(占51.8%),无跨膜结构域或信号肽,抗原表位分布均匀,预测有8个优势抗原表位区域,且集中于N端。以上结果表明,FAdV-4贵州株GZ-QL Fiber2蛋白在禽腺病毒血清4型内相对保守且抗原性良好,具备成为优势抗原的潜力。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 fiber2基因 生物信息学分析
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禽腺病毒血清4型中国流行株fiber2蛋白单克隆抗体制备与鉴定 被引量:2
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作者 田开月 曲信芹 +4 位作者 韩城昊 尹坤 杨盼盼 黄玉波 赵军 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第11期104-109,共6页
旨在制备禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)中国流行株的fiber2蛋白的特异性单克隆抗体。以纯化的FAdV-4中国流行株CH/HNJZ/2015免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0细胞融合,采用基于fiber2蛋白的间接ELISA筛选阳性杂... 旨在制备禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)中国流行株的fiber2蛋白的特异性单克隆抗体。以纯化的FAdV-4中国流行株CH/HNJZ/2015免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0细胞融合,采用基于fiber2蛋白的间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,经过5次亚克隆,获得2株分泌抗fiber2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2C3和7B4。以制备的2C3和7B4腹水进行亚型鉴定、反应原性、特异性以及中和活性测定。结果显示,成功制备了抗FAdV-4 fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,获得的单克隆抗体均为IgM亚型,可特异性识别FAdV-4及其fiber2蛋白,为FAdV-4的免疫检测和fiber2蛋白功能研究提供了研究材料。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 fiber2蛋白 单克隆抗体
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高致病性FAdV-4分离株fiber2结构蛋白表达和细胞内定位的分析 被引量:1
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作者 李梅珍 洪琴 +1 位作者 邓翔飞 陈芳芳 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2022年第2期259-264,共6页
初步鉴定一株高致病性4型禽腺病毒(fowl adenovirus serotype 4, FAdV-4)并研究其生物学特性。应用PCR、动物实验、免疫印迹技术和激光共聚焦鉴定其致病性和传播途径,分析fiber2蛋白的表达特性及其在细胞内定位。结果显示,所分离的毒株... 初步鉴定一株高致病性4型禽腺病毒(fowl adenovirus serotype 4, FAdV-4)并研究其生物学特性。应用PCR、动物实验、免疫印迹技术和激光共聚焦鉴定其致病性和传播途径,分析fiber2蛋白的表达特性及其在细胞内定位。结果显示,所分离的毒株为FAdV-4型强毒株,对鸡的致死率达100%,对鸭无明显致病性;病毒可以经过滴鼻点眼感染而非经过口腔感染;PCR扩增的fiber2基因的大小为1 440 bp,所构建的含fiber2基因的重组真核和原核表达质粒均可正确表达;共聚焦结果显示,fiber2蛋白主要定位于细胞核。结果可为进一步研究安徽省地区高致病性禽腺病毒的感染和疫苗制备提供基础。 展开更多
关键词 FAdV-4 分离鉴定 fiber2 蛋白表达 细胞定位
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禽腺病毒4型湖北株的分离鉴定及其Fiber2蛋白在乳酸菌中的表达
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作者 李剑 徐鹏飞 +4 位作者 叶十一 陈红心 周启立 翁长江 熊涛 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第23期153-158,共6页
为研究湖北地区禽腺病毒4型遗传进化情况及其Fiber2蛋白在乳酸菌中的表达情况,将采集于湖北省某养鸡场的病变组织样处理后接种至LMH细胞,分离出2株禽腺病毒,通过PCR鉴定和Hexon基因测序分析表明为禽腺病毒4型,并命名为HBJZ2021A和HBJZ20... 为研究湖北地区禽腺病毒4型遗传进化情况及其Fiber2蛋白在乳酸菌中的表达情况,将采集于湖北省某养鸡场的病变组织样处理后接种至LMH细胞,分离出2株禽腺病毒,通过PCR鉴定和Hexon基因测序分析表明为禽腺病毒4型,并命名为HBJZ2021A和HBJZ2021B,遗传进化树分析结果表明,其与国内山东、浙江和北京等地区的毒株亲缘关系较近,处于同一进化分支。以其基因组DNA为模板扩增Fiber2基因并克隆至乳酸菌表达载体pNZ8148,通过酶切和测序表明成功构建了重组表达载体pNZ8148-Fiber2,并通过电转转化至NZ 9000乳酸菌,采用不同浓度梯度的Nisin进行诱导表达,SDS-PAGE及Western-Blot分析结果显示,成功在上清中表达了Fiber2蛋白。该研究结果为湖北地区禽腺病毒4型的流行情况及其口服疫苗的开发提供了参考依据。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 分离鉴定 遗传进化 fiber2蛋白表达 基因测序
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高致病性FAdV-4传代中的毒力和Fiber2基因的比对分析
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作者 洪琴 邓翔飞 +2 位作者 周香 徐彬 陈芳芳 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2023年第2期249-254,共6页
为筛选禽腺病毒疫苗株和制备亚单位疫苗提供科学依据,探明高致病性禽腺病毒C亚型4血清型(FAdV-4)毒株在传代中的毒力变化以及不同感染方式对雏鸡死亡率的影响,首先制备2~15代的高致病性FAdV-4尿囊液,用LMH细胞检测第2、4、8和15代尿囊... 为筛选禽腺病毒疫苗株和制备亚单位疫苗提供科学依据,探明高致病性禽腺病毒C亚型4血清型(FAdV-4)毒株在传代中的毒力变化以及不同感染方式对雏鸡死亡率的影响,首先制备2~15代的高致病性FAdV-4尿囊液,用LMH细胞检测第2、4、8和15代尿囊液的半数细胞感染量(TCID_(50));其次选取的4个代次尿囊液分别通过黏膜(点眼)和颈背部皮下途径接种SPF雏鸡,观察动物的死亡率;最后应用PCR方法扩增主要结构蛋白Fiber2基因序列并进行比对分析。结果表明:所有制备的2~15代FAdV-4毒株均在5~7 d内致鸡胚死亡(100%),4个代次毒株的TCID_(50)为10^(6.5±0.2)/0.1 mL,不同代次毒株间的毒力差异不显著(P>0.05);选取的4个代次毒株经颈背部皮下接种雏鸡的死亡率为100%,死亡雏鸡出现典型的心包积液综合征。而经黏膜接种的雏鸡死亡率呈下降趋势,分别为80%、50%、30%和30%;不同代次毒株Fiber2基因序列没有发生变化。总之,不同代次毒株通过皮下接种后对雏鸡的致病力没有差异,但黏膜接种的死亡率则逐代下降,而主要结构蛋白Fiber2基因则没有出现碱基变异。 展开更多
关键词 强毒株FAdV-4 毒力 致病性 fiber2
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基于FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:5
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作者 万文妍 刘延珂 +10 位作者 王贝贝 吴艳阳 杨东东 高冬生 李永涛 王新卫 杨霞 常洪涛 陈陆 王川庆 赵军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期883-888,共6页
利用在大肠杆菌中表达的FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白作为包被抗原,建立了检测抗禽腺病毒血清4型(FAdV-4)中国流行株抗体的间接ELISA方法。所建立方法的最佳条件为:抗原最适包被量为0.25μg/μL,包被时间为37℃1h,然后4℃过夜;... 利用在大肠杆菌中表达的FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白作为包被抗原,建立了检测抗禽腺病毒血清4型(FAdV-4)中国流行株抗体的间接ELISA方法。所建立方法的最佳条件为:抗原最适包被量为0.25μg/μL,包被时间为37℃1h,然后4℃过夜;被检血清的最佳稀释度为1:800,作用时间为2h;二抗选用HRP标记的兔抗鸡IgY,稀释度为1:4000,作用时间为1.5h;显色液TMB作用条件为室温5min。所建立ELISA的判定标准为:样品的S/P值大于或等于0.0553判为阳性,小于0.0418判为阴性。用建立的ELISA方法对抗鸡新城疫病毒、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法有较好的特异性,组内和组间重复的最大变异系数为5.6%和5.7%,所建立的ELISA方法重复性良好。用所建立的ELISA方法对50份来自于疑似患肝炎-心包积液综合征病鸡的血清样品进行检测,阳性捡出率为98%,与FAdV-4病原学检测结果符合率为100%。结果表明:本试验所建立的ELISA方法可用于抗FAdV-4中国流行株抗体的检测,为肝炎-心包积液综合征病监测和流行病学调查提供了方法。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 fiber2蛋白 间接ELISA
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禽腺病毒4型中国流行株Fiber2蛋白的原核表达与间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:8
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作者 田开月 张玉菡 +4 位作者 郭慧芳 李宁 杨霞 王增 赵军 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第9期76-80,共5页
为建立禽腺病毒4型(FAdV-4)特异性抗体检测方法,将密码子优化合成的FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白的编码基因克隆于pET-32a(+)载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。用纯化的Fiber2蛋白作为包被抗原,通过一系列条件的优化,建立了一种检测F... 为建立禽腺病毒4型(FAdV-4)特异性抗体检测方法,将密码子优化合成的FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白的编码基因克隆于pET-32a(+)载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。用纯化的Fiber2蛋白作为包被抗原,通过一系列条件的优化,建立了一种检测FAdV-4抗体的间接ELISA方法。结果:该方法可以特异地检测抗FAdV-4抗体,与新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒、H5和H9亚型禽流感病毒等常见禽病毒的抗血清均无交叉反应,表明所建立ELISA具有较好的特异性;FAdV-4阳性血清经1?3 200稀释后检测结果仍为阳性,表明所建立ELISA方法具有较高的敏感性;所建立ELISA的批内和批间重复试验的变异系数分别为1.5%~5.2%和1.1%~5.6%,表明其重复性良好。应用建立的ELISA方法对河南省及周边部分地区养禽场内FAdV-4的感染情况进行了血清流行病学调查,结果显示被检地区养禽场均存在不同程度的FAdV-4型抗体阳性,平均阳性率为59.53%。由此表明本研究所建立的ELISA方法可以用于FAdV-4感染的监测和流行病学调查。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 fiber2蛋白 间接ELISA 流行病学调查
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表达禽腺病毒4型中国流行株Fiber2蛋白重组新城疫病毒的构建与鉴定 被引量:3
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作者 田开月 张玉菡 +6 位作者 杨盼盼 郭慧芳 李宁 杨霞 边传周 王增 赵军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1697-1702,共6页
利用NDV LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统,将禽腺病毒4型(FAdV-4)中国流行株的全长Fiber2基因插入到NDV基因组的P和M基因之间,构建并拯救出重组病毒rLaSota-Fiber2。利用RT-PCR和序列测定,以及Western blot对重组病毒进行了鉴定。结... 利用NDV LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统,将禽腺病毒4型(FAdV-4)中国流行株的全长Fiber2基因插入到NDV基因组的P和M基因之间,构建并拯救出重组病毒rLaSota-Fiber2。利用RT-PCR和序列测定,以及Western blot对重组病毒进行了鉴定。结果显示,Fiber2基因插入位置和方向正确,Fiber2蛋白得到正确表达,表达形式为可溶的游离形式而非嵌入到NDV颗粒中。第10代重组病毒的鸡胚致病性试验和在鸡胚中的生长特性研究结果显示,重组病毒的半数鸡胚感染量(EID50)最高可达108.5/100μL,鸡胚平均致死时间(MDT)为120 h, 1日龄雏鸡脑内接种指数(ICPI)和6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)均为0,重组病毒保持了LaSota弱毒疫苗亲本毒株的低致病特性和对鸡胚良好的高滴度生长适应性。重组病毒与亲本LaSota株生长滴度在相近时间达到峰值,生长动力学特性与亲本株无明显差异。本试验构建的表达FAdV-4中国流行株Fiber2基因的重组病毒rLaSota-Fiber2有望为同时防控NDV和FAdV-4的感染提供安全、廉价和高效的辅助工具。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 fiber2蛋白 重组新城疫病毒 疫苗
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新型鸭腺病毒4型Fiber2蛋白的表达 被引量:2
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作者 吕涵 黄允真 +2 位作者 张春红 孙敏华 瞿孝云 《养禽与禽病防治》 2023年第5期7-11,共5页
Fiber2是鸭腺病毒4型(DAdV-4)的主要结构蛋白和免疫原性蛋白。本研究以DAdV-4毒株DNA为模板进行PCR扩增Fiber2基因片段,转化DH5a,通过EcoRI和HindII酶切后与pET28α载体通过T4DNA连接酶进行连接,构建重组表达载体,经序列测序鉴定后转化B... Fiber2是鸭腺病毒4型(DAdV-4)的主要结构蛋白和免疫原性蛋白。本研究以DAdV-4毒株DNA为模板进行PCR扩增Fiber2基因片段,转化DH5a,通过EcoRI和HindII酶切后与pET28α载体通过T4DNA连接酶进行连接,构建重组表达载体,经序列测序鉴定后转化BL21(DE3)构建重组表达菌,利用IPTG诱导表达Fiber2重组蛋白,经用SDS-PAGE电泳检测,结果显示,Fiber2重组蛋白能在大肠杆菌以包涵体形式表达。上述研究为鸭腺病毒4型的防控提供物质基础。 展开更多
关键词 鸭腺病毒4型 fiber2蛋白 原核表达
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“Zero‑Strain” NiNb_(2)O_(6) Fibers for All‑Climate Lithium Storage
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作者 Yan Zhao Qiang Yuan +5 位作者 Liting Yang Guisheng Liang Yifeng Cheng Limin Wu Chunfu Lin Renchao Che 《Nano-Micro Letters》 SCIE EI CAS 2025年第1期348-360,共13页
Niobates are promising all-climate Li^(+)-storage anode material due to their fast charge transport,large specific capacities,and resistance to electrolyte reaction.However,their moderate unit-cellvolume expansion(gen... Niobates are promising all-climate Li^(+)-storage anode material due to their fast charge transport,large specific capacities,and resistance to electrolyte reaction.However,their moderate unit-cellvolume expansion(generally 5%–10%)during Li^(+)storage causes unsatisfactory long-term cyclability.Here,“zero-strain”NiNb_(2)O_(6) fibers are explored as a new anode material with comprehensively good electrochemical properties.During Li^(+)storage,the expansion of electrochemical inactive NiO_(6) octahedra almost fully offsets the shrinkage of active NbO_(6) octahedra through reversible O movement.Such superior volume-accommodation capability of the NiO_(6) layers guarantees the“zero-strain”behavior of NiNb_(2)O_(6) in a broad temperature range(0.53%//0.51%//0.74%at 25//−10//60℃),leading to the excellent cyclability of the NiNb_(2)O_(6) fibers(92.8%//99.2%//91.1%capacity retention after 1000//2000//1000 cycles at 10C and 25//−10//60℃).This NiNb_(2)O_(6) material further exhibits a large reversible capacity(300//184//318 mAh g−1 at 0.1C and 25//−10//60℃)and outstanding rate performance(10 to 0.5C capacity percentage of 64.3%//50.0%//65.4%at 25//−10//60℃).Therefore,the NiNb_(2)O_(6) fibers are especially suitable for large-capacity,fast-charging,long-life,and all-climate lithium-ion batteries. 展开更多
关键词 NiNb_(2)O_(6)porous fiber “Zero-strain”mechanism Electrochemical property Harsh-temperature operation Operando characterization
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新型鸡心包炎—包涵体肝炎病毒的分离及鉴定 被引量:13
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作者 汪凯 蔡骁垚 +5 位作者 叶建强 刘红梅 张泉 刘芹防 李泽君 陈鸿军 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第4期1-6,共6页
2015年在江苏省某养鸡场疑似心包炎-包涵体肝炎病死鸡肝脏中分离获得1株病毒,经SPF鸡胚4代纯化,并针对其hexon基因设计特异性引物进行PCR扩增,测序结果表明该分离株属于I群禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)血清4型,命名为JS7株。ORF29和f... 2015年在江苏省某养鸡场疑似心包炎-包涵体肝炎病死鸡肝脏中分离获得1株病毒,经SPF鸡胚4代纯化,并针对其hexon基因设计特异性引物进行PCR扩增,测序结果表明该分离株属于I群禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)血清4型,命名为JS7株。ORF29和fiber2基因测序分析表明,该毒株为最近在国内流行的新型突变株。JS7株以1000 ELD_(50)病毒量肌肉接种21日龄雏鸡,5 d内呈现80%死亡率,剖检可见典型的心包炎、肝炎症状,在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、气管、法氏囊、脑、小肠、盲肠、腺胃、胸腺、胰脏中均能检测到病毒分布;H&E染色结果显示,在组织切片中,肝脏呈现典型的嗜碱性核染色,其他组织脏器也呈现不同程度的病理变化。可见JS7株在雏鸡中具有较强的致病性及广泛的组织嗜性。 展开更多
关键词 包涵体肝炎 禽腺病毒 fiber2 分离 鉴定
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鸭腺病毒3型LAMP快速检测方法的建立 被引量:4
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作者 陈翠腾 黄瑜 +6 位作者 陈珍 朱春华 傅光华 程龙飞 刘荣昌 刘斌琼 万春和 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期289-294,共6页
鸭腺病毒3型(DAdV-3)是我国鸭群中出现的一种新型腺病毒,属于腺病毒科禽腺病毒属成员。为建立DAdV-3的快速检测方法,本研究根据DAdV-3的fiber2基因,设计特异性的LAMP检测引物,构建重组质粒标准品pT-DAdV-3,经各反应条件优化,建立了DAdV-... 鸭腺病毒3型(DAdV-3)是我国鸭群中出现的一种新型腺病毒,属于腺病毒科禽腺病毒属成员。为建立DAdV-3的快速检测方法,本研究根据DAdV-3的fiber2基因,设计特异性的LAMP检测引物,构建重组质粒标准品pT-DAdV-3,经各反应条件优化,建立了DAdV-3 LAMP快速检测方法。结果显示,建立的LAMP检测方法最佳反应条件为64℃40 min;该方法仅对DAdV-3呈阳性反应,与番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鸭源减蛋综合征病毒等其他常见鸭源传染病病原均无交叉反应,特异性强。该方法对重组质粒标准品的最低检测限为50拷贝/μL;利用本研究建立的LAMP方法、前期建立的PCR方法和基于MGB探针的荧光定量PCR方法对临床收集的66份鸭组织病料样品进行检测,结果显示阳性率分别为13.63%(9/66)、13.63%(9/66)和15.15%(10/66);且LAMP检测的阳性样品经PCR方法检测和荧光定量PCR方法检测均为阳性,符合率为100%。本研究首次建立了检测DAdV-3的LAMP方法,该方法快速敏感、特异性强,为该病的流行病学调查提供技术支撑。 展开更多
关键词 鸭腺病毒3型 fiber2基因 LAMP 检测
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TiO2-PES Fibrous Composite Material for Ammonia Removal Using UV-A Photocatalyst
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作者 Anh Phuong Le Thi Masaru Ohshiro Takaomi Kobayashi 《Journal of Materials Science and Chemical Engineering》 2024年第1期1-19,共19页
This study focused on the development and characterization of TiO<sub>2</sub>-PES composite fibers with varying TiO<sub>2</sub> loading amounts using a phase inversion process. The resulting co... This study focused on the development and characterization of TiO<sub>2</sub>-PES composite fibers with varying TiO<sub>2</sub> loading amounts using a phase inversion process. The resulting composite fibers exhibited a sponge-like structure with embedded TiO<sub>2</sub> nanoparticles within a polymer matrix. Their photocatalytic performance for ammonia removal from aqueous solutions under UV-A light exposure was thoroughly investigated. The findings revealed that PeTi8 composite fibers displayed superior adsorption capacity compared to other samples. Moreover, the study explored the impact of pH, light intensity, and catalyst dosage on the photocatalytic degradation of ammonia. Adsorption equilibrium isotherms closely followed the Langmuir model, with the results indicating a correlation between qm values of 2.49 mg/g and the porous structure of the adsorbents. The research underscored the efficacy of TiO<sub>2</sub> composite fibers in the photocatalytic removal of aqueous under  UV-A light. Notably, increasing the distance between the photocatalyst and the light source resulted in de-creased hydroxyl radical concentration, influencing photocatalytic efficiency. These findings contribute to our understanding of TiO<sub>2</sub> composite fibers as promising photocatalysts for ammonia removal in water treatment applications. 展开更多
关键词 Ammonia Removal PHOTOCATALYST TiO2-PES Composite Fiber Fibrous Material
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2株鸡源血清4型禽腺病毒的分离鉴定及致病性研究 被引量:9
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作者 祝常椿 钱焱 +5 位作者 满成连 刘源 杜银平 秦涛 陈素娟 彭大新 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1282-1286,共5页
为了解江苏东台地区4型禽腺病毒(FAdV-4)分离株的遗传进化情况及其致病性。本研究收集13份疑似患有心包积水-肝炎综合征病鸡的心脏、肝脏和脾脏等组织进行PCR鉴定,阳性样品分别接种鸡肝癌细胞系(LMH)进行病毒分离,对纯化后鉴定的FAdV-4 ... 为了解江苏东台地区4型禽腺病毒(FAdV-4)分离株的遗传进化情况及其致病性。本研究收集13份疑似患有心包积水-肝炎综合征病鸡的心脏、肝脏和脾脏等组织进行PCR鉴定,阳性样品分别接种鸡肝癌细胞系(LMH)进行病毒分离,对纯化后鉴定的FAdV-4 Hexon基因和Fiber2基因进行序列分析,并将FAdV-4肌肉接种SPF鸡进行动物回归实验。结果显示,13份样品中有9份PCR扩增出500 bp的FAdV Hexon基因条带;其中2份样品在接种细胞48 h^60 h后可见细胞变圆皱缩,形成典型的细胞病变并能稳定传代。Hexon基因同源性和遗传进化分析显示,2株分离株的同源性为99.9%,与SDNY1-15和PDS株的亲缘关系最近,且同源性分别为99.9%和100%;Fiber2全长基因的Alu酶谱分析显示2株病毒没有差异,均为致病性FAdV-4,将病毒分别命名为FAdV-4 DT和FAdV-4 AN。动物回归实验结果显示,DT和AN株对4周龄SPF鸡的致死率分别为50%和90%,剖检可见典型的心包积液,肝脏肿大出血;病理组织学观察可见,两株分离病毒均能致SPF鸡心肌水肿并伴有淋巴细胞浸润,肝脂肪变性、坏死、出血,肝细胞核内可见嗜碱性包涵体等特征性病变,与FAdV-4感染的病变一致;AN株感染后脏器病变比DT株严重。本研究对2株鸡源FAdV-4的鉴定为进一步探究其致病机理提供了实验基础。 展开更多
关键词 禽腺病毒 血清4型 分离与鉴定 Hexon基因 fiber2基因
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禽腺病毒4型鞭毛重组蛋白的原核表达及其免疫效果研究 被引量:4
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作者 刘超 侯磊 +9 位作者 韦莉 王菁 全荣 朱珊珊 李子璇 齐宾宾 王利佳 姜海军 王丹 刘爵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第5期15-19,共5页
为研究禽腺病毒4型重组鞭毛-fiber2蛋白免疫保护性,将鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因与禽腺病毒4型的fiber2基因融合,再将融合基因和单独的fiber2基因分别克隆到原核表达载体p ET-28a,后将构建的p ET-28a-flagellin-fiber2和p ET-28a-fiber2... 为研究禽腺病毒4型重组鞭毛-fiber2蛋白免疫保护性,将鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因与禽腺病毒4型的fiber2基因融合,再将融合基因和单独的fiber2基因分别克隆到原核表达载体p ET-28a,后将构建的p ET-28a-flagellin-fiber2和p ET-28a-fiber2重组载体分别转入大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物,再将表达产物纯化后免疫21日龄SPF鸡;结果表明,重组菌在37℃培养条件下1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h可表达最多的可溶性重组蛋白,Western Blot分析表明,所表达的重组蛋白均能与禽腺病毒血清4型感染阳性血清发生特异性反应,说明所表达蛋白具有良好反应原性,动物试验表明,表达的两种目的蛋白能为鸡提供一定保护力,且低剂量的重组鞭毛-fiber2蛋白产生较好的免疫保护效果。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 鞭毛基因 fiber2基因 原核表达 免疫保护
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鹌鹑源FAdV4 Fiber 2、ORF29区序列分析及其致病性研究 被引量:4
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作者 卢琴 罗青平 +7 位作者 张腾飞 罗玲 汪宏才 王红琳 温国元 张蓉蓉 商雨 邵华斌 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第5期36-42,共7页
本实验室前期在鹌鹑中分离到了1株4型禽腺病毒(FAdV-4)HB1812株,为了解该病毒全基因组序列和致病性,进行了全基因组测序和致病性实验。结果显示:HB1812株与国内的FAdV-4型流行毒株HN151025和JSJ13株的同源性最高,Fiber 2序列中G219A/D、... 本实验室前期在鹌鹑中分离到了1株4型禽腺病毒(FAdV-4)HB1812株,为了解该病毒全基因组序列和致病性,进行了全基因组测序和致病性实验。结果显示:HB1812株与国内的FAdV-4型流行毒株HN151025和JSJ13株的同源性最高,Fiber 2序列中G219A/D、E230Q、S260T、I299V、S304A、P307A、V319I、A380T、S389T、A400G、Q403Q、S406I、T412S、T434S、D438E、S452A、A458N和V477L位点存在点突变,ORF29区缺失了RMITPLYTRPP共11个氨基酸;致病性试验结果,HB1812株对SPF鸡具有致病性,可见典型的心包积液及肝脏发黄等临床症状,HE镜检可见心肌纤维排列紊乱及部分心肌断裂,心肌间隙可见大量红细胞,肝脏可见炎性细胞浸润并伴随少量肝细胞坏死。该研究是国内首次报道鹌鹑源禽腺病毒,为我国FAdV-4的传播方式、灭活疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 鹌鹑源 FAdV-4 Fiber 2 ORF29 致病性
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Influence of pyrolytic carbon coatings on complex permittivity and microwave absorbing properties of Al_2O_3 fiber woven fabrics 被引量:5
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作者 丁冬海 周万城 +1 位作者 罗发 朱冬梅 《Transactions of Nonferrous Metals Society of China》 SCIE EI CAS CSCD 2012年第2期354-359,共6页
The pyrolytic carbon (PyC) coatings were fabricated on A1203 fiber fabrics by the method of chemical vapor deposition (CVD). The microstructures of A1203 fibers with and without PyC coatings were characterized by ... The pyrolytic carbon (PyC) coatings were fabricated on A1203 fiber fabrics by the method of chemical vapor deposition (CVD). The microstructures of A1203 fibers with and without PyC coatings were characterized by SEM and Raman spectroscopy. The influence of deposition time of PyC on the DC conductivity (ad) of A1203 filaments and complex permittivity of fabrics at X band (8.2-12.4 GHz) were investigated. The values of Crd and complex permittivity increase with increasing deposition time of PyC. The electron relaxation polarization and conductance loss were supposed to be contributed to the increase of ε' and ε", respectively. In addition, the reflection loss (RL) of fabrics was calculated. The results show that the microwave absorbing properties of Al2O3 fiber fabrics can be improved by PyC coatings. The best RL results are for 60 min-deposition sample, of which the minimum value is about -40.4 dB at about 9.5 GHz and the absorbing frequency band (AFB) is about 4 GHz. 展开更多
关键词 complex permittivity pyrolytic coating Al2O3 fiber fabric
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