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短叶松素-3-乙酸酯对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及炎性因子表达的影响
被引量:
1
1
作者
王启海
张智
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第4期454-460,共7页
目的探讨短叶松素-3-乙酸酯(Pinobanksin-3-acetate,PB3A)对体外培养佐剂性关节炎(AIA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLSs)的增殖及脂多糖(LPS)诱导的炎性因子表达的影响。方法采用灭活分枝杆菌+弗氏完全佐剂(CFA)建立AIA大鼠模型,分离并原代培...
目的探讨短叶松素-3-乙酸酯(Pinobanksin-3-acetate,PB3A)对体外培养佐剂性关节炎(AIA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLSs)的增殖及脂多糖(LPS)诱导的炎性因子表达的影响。方法采用灭活分枝杆菌+弗氏完全佐剂(CFA)建立AIA大鼠模型,分离并原代培养AIA-FLSs。PB3A作用于细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot法检测细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。LPS诱导AIA-FLSs后,以PB3A干预,采用ELISA法检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量;RT-qPCR法检测细胞IL-1β、iNOS、MCP-1、MMP3 mRNA表达;Western Blot法检测细胞MMP3蛋白表达。结果与空白对照组比较,2.5~40μg·mL^(-1)的PB3A对AIA-FLSs细胞的增殖抑制率均有明显升高(P<0.05,P<0.01),且具有时间和浓度依赖性;PB3A 5、10、20μg·mL^(-1)组的AIA-FLSs细胞凋亡率明显升高(P<0.05,P<0.01);10、20μg·mL^(-1)PB3A均能明显下调Bcl-2蛋白表达(P<0.01),上调Bax、Caspase-3蛋白表达(P<0.01)。与LPS组比较,10、20μg·mL^(-1)PB3A能明显降低细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌量(P<0.01),下调细胞IL-1β、iNOS、MCP-1、MMP3 mRNA表达及MMP3蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论PB3A可通过调控凋亡相关蛋白表达抑制AIA-FLSs的细胞增殖,促进细胞凋亡,并通过下调TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS、MCP-1及MMP3的表达来抑制LPS诱导的炎性反应。
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关键词
短叶松素-3-乙酸酯
佐剂性关节炎
大鼠成纤维样滑膜细胞
增殖
凋亡
炎性因子
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职称材料
题名
短叶松素-3-乙酸酯对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及炎性因子表达的影响
被引量:
1
1
作者
王启海
张智
机构
安徽中医药高等专科学校中心实验室
中国科学技术大学生命科学学院
出处
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第4期454-460,共7页
基金
国家杰出青年科学基金资助项目(32025017)
安徽省卫生健康委科研项目(AHWJ2021b061)
安徽中医药高等专科学校自然科学研究重点项目(ZRKXZ202103)。
文摘
目的探讨短叶松素-3-乙酸酯(Pinobanksin-3-acetate,PB3A)对体外培养佐剂性关节炎(AIA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLSs)的增殖及脂多糖(LPS)诱导的炎性因子表达的影响。方法采用灭活分枝杆菌+弗氏完全佐剂(CFA)建立AIA大鼠模型,分离并原代培养AIA-FLSs。PB3A作用于细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot法检测细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。LPS诱导AIA-FLSs后,以PB3A干预,采用ELISA法检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量;RT-qPCR法检测细胞IL-1β、iNOS、MCP-1、MMP3 mRNA表达;Western Blot法检测细胞MMP3蛋白表达。结果与空白对照组比较,2.5~40μg·mL^(-1)的PB3A对AIA-FLSs细胞的增殖抑制率均有明显升高(P<0.05,P<0.01),且具有时间和浓度依赖性;PB3A 5、10、20μg·mL^(-1)组的AIA-FLSs细胞凋亡率明显升高(P<0.05,P<0.01);10、20μg·mL^(-1)PB3A均能明显下调Bcl-2蛋白表达(P<0.01),上调Bax、Caspase-3蛋白表达(P<0.01)。与LPS组比较,10、20μg·mL^(-1)PB3A能明显降低细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌量(P<0.01),下调细胞IL-1β、iNOS、MCP-1、MMP3 mRNA表达及MMP3蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论PB3A可通过调控凋亡相关蛋白表达抑制AIA-FLSs的细胞增殖,促进细胞凋亡,并通过下调TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS、MCP-1及MMP3的表达来抑制LPS诱导的炎性反应。
关键词
短叶松素-3-乙酸酯
佐剂性关节炎
大鼠成纤维样滑膜细胞
增殖
凋亡
炎性因子
Keywords
Pinobanksin-3-acetate(PB3A)
adjuvant induced arthritis(AIA)
fibroblast-like
synoviocytes
(
flss
)of
rats
prolife
rat
ion
apoptosis
inflammatory factor
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
短叶松素-3-乙酸酯对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及炎性因子表达的影响
王启海
张智
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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