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Fibrinogen-like protein 2/fibroleukin prothrombinase contributes to tumor hypercoagulability via IL-2 and IFN-γ 被引量:20
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作者 Kai Su Fang Chen Wei-Ming Yan Qi-Li Zeng Li Xu Dong Xi Bin Pi Xiao-Ping Luo Qin Ning 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2008年第39期5980-5989,共10页
AIM: To examine the role of Fibrinogen-like protein 2 (fgl2)/fibroleukin in tumor development. Fgl2 has been reported to play a vital role in the pathogenesis in MHV-3 (mouse hepatitis virus) induced fulminant an... AIM: To examine the role of Fibrinogen-like protein 2 (fgl2)/fibroleukin in tumor development. Fgl2 has been reported to play a vital role in the pathogenesis in MHV-3 (mouse hepatitis virus) induced fulminant and severe hepatitis, spontaneous abortion, allo- and xenograft rejection by mediating "immune coagulation".METHODS: Tumor tissues from 133 patients with six types of distinct cancers and the animal tumor tissues from human hepatocellular carcinoma (HCC) model on nude mice (established from high metastasis HCC cell line MHCC97LM6) were obtained. RESULTS: HfgI2 was detected in tumor tissues from 127 out of 133 patients as well as tumor tissues collected from human HCC nude mice. Hfgl2 was highly expressed both in cancer cells and interstitial inflammatory cells including macrophages, NK cells, and CD8^+ T lymphocytes and vascular endothelial cells. HfgI2 mRNA was localized in cells that expressed hfgI2 protein. Fibrin (nogen) colocalization with hfgl2 expression was determined by dual immunohistochemical staining. In vitro, IL-2 and IFN-γ, increased hfgl2 mRNA by 10-100 folds and protein expression in both THP-1 and HUVEC cell lines. One-stage clotting assays demonstrated that THP-1 and HUVEC cells expressing hfgl2 had increased procoagulant activity following cytokines stimulation. CONCLUSION: The hfgI2 contributes to the hypercoagulability in cancer and may induce tumor angiogenesis and metastasis via cytokine induction. 展开更多
关键词 Fibrinogen-like protein 2/fibroleukin Thrombin TUMOR Coagulation Cytokine
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乙型肝炎病毒蛋白对纤维介素基因的激活作用 被引量:6
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作者 韩梅芳 习东 +1 位作者 罗小平 宁琴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期49-54,共6页
纤维介素基因(fgl2)在人和小鼠的重型肝炎的发病机制中发挥重要作用.为探讨乙型肝炎病毒(HBV)编码蛋白对人纤维介素基因(hfgl2)的激活作用,构建了HBV编码蛋白C、S和X的真核表达质粒pcDNA-HBc、pcDNA-HBs和pcDNA-HBx,分别与hfgl2启动子... 纤维介素基因(fgl2)在人和小鼠的重型肝炎的发病机制中发挥重要作用.为探讨乙型肝炎病毒(HBV)编码蛋白对人纤维介素基因(hfgl2)的激活作用,构建了HBV编码蛋白C、S和X的真核表达质粒pcDNA-HBc、pcDNA-HBs和pcDNA-HBx,分别与hfgl2启动子荧光素酶报告基因质粒及β半乳糖苷酶基因质粒(-βGal)共转染到CHO细胞和HepG2细胞,采用免疫组织化学和免疫印记方法(Western blotting)鉴定病毒蛋白的表达.通过检测报告基因荧光素酶(LUC)及β半乳糖苷酶的表达活性,反映病毒蛋白对hfgl2启动子的转录激活作用.结果显示,转染了真核表达质粒的细胞均能瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白,在CHO细胞,转染pcDNA-HBc组和pcDNA-HBx组相对荧光素酶的活性是对照组的5.4和6倍,在hepG2细胞,转染pcDNA-HBc组和pcDNA-HBx组相对荧光素酶的活性是对照组的8.7和11倍.研究表明,CHO和HepG2细胞中表达的HBV C蛋白和X蛋白均具有激活hfgl2的功能,而S蛋白则不能激活.进一步揭示了HBV病毒蛋白与宿主基因的相互作用机制. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核心(C)蛋白 X蛋白 人纤维介素基因(hfgl2) 基因调控
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纤维介素蛋白2凝血酶原酶在人肝癌细胞增殖和凋亡中的作用 被引量:4
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作者 刘艳玲 曾其莉 +2 位作者 王静丽 严伟明 宁琴 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2010年第3期149-152,I0001,共5页
目的:探讨纤维介素蛋白2凝血酶原酶(fibrinogen-like protein 2/fibroleukin,fgl2)在人肝癌(hepatocel-lular carcinoma,HCC)细胞系HCCLM6细胞的表达及在肿瘤生长中的作用。方法:用RT-PCR方法检测HCCLM6细胞在静息和细胞因子作用下fgl2m... 目的:探讨纤维介素蛋白2凝血酶原酶(fibrinogen-like protein 2/fibroleukin,fgl2)在人肝癌(hepatocel-lular carcinoma,HCC)细胞系HCCLM6细胞的表达及在肿瘤生长中的作用。方法:用RT-PCR方法检测HCCLM6细胞在静息和细胞因子作用下fgl2mRNA水平的表达;用RNA干扰技术建立fgl2敲除的HCCLM6细胞模型;以流式细胞技术检测fgl2敲除后的HCCLM6细胞体外培养细胞周期和增殖指数的改变以及对TNF-α(肿瘤坏死因子-α)诱导凋亡的抵抗能力改变。结果:IFN-γ(干扰素-γ)、IL-1β(白介素-1β)和TNF-α均可在mRNA水平上调HCCLM6细胞fgl2的表达,以TNF-α诱导作用最为显著;fgl2干扰后HCCLM6细胞增殖指数显著降低,细胞周期分析S期比例显著下降;fgl2干扰对HCCLM6细胞在全培养基和无血清培养基中培养的凋亡率无显著影响,但在合并大剂量TNF-α诱导下,fgl2干扰可显著提高HCCLM6细胞的凋亡率。结论:炎性细胞因子可诱导HCCLM6细胞表达fgl2,fgl2的表达可直接促进肿瘤细胞的生长,并增强对TNF-α诱导凋亡的耐受。 展开更多
关键词 肝癌 纤维介素蛋白2凝血酶原酶 肿瘤坏死因子-Α 增殖 凋亡
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IFN-γ,IL-2诱导人脐静脉内皮细胞及单核细胞hfgl2表达的研究 被引量:1
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作者 苏凯 陈芳 +1 位作者 罗小平 宁琴 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期2410-2414,共5页
目的探讨肿瘤微环境中的一些细胞因子(IFN-γ、IL-2等)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人单核细胞(THP-1)hfgl2表达的影响。方法分别用免疫组化,RT-PCR方法检测HUVEC和THP-1在静息和细胞因子作用下人纤维介素(hfgl2)蛋白和mRNA水平的表达,... 目的探讨肿瘤微环境中的一些细胞因子(IFN-γ、IL-2等)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人单核细胞(THP-1)hfgl2表达的影响。方法分别用免疫组化,RT-PCR方法检测HUVEC和THP-1在静息和细胞因子作用下人纤维介素(hfgl2)蛋白和mRNA水平的表达,并对细胞因子刺激前后细胞的促凝功能做了检测。结果IFN-γ、IL-2均可明显增强hfgl2蛋白和mRNA的表达。并且刺激后的细胞出现明显升高的促凝活性(PCA),刺激后细胞的PCA产生于Ⅹ因子的下游,与Ⅱ因子密切相关。结论IFN-γ、IL-2增强hfgl2蛋白和mRNA的表达,hfgl2能直接催化凝血酶原转化为凝血酶,进而通过凝血酶的凝血依赖及非依赖途径促进肿瘤血管新生和转移。 展开更多
关键词 癌症 人纤维介素(hfgl2) 凝血酶 IFN-Γ IL-2
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急性冠状动脉综合征患者血清Fgl2水平升高的临床意义
5
作者 郑振中 詹俊峰 +4 位作者 章杨龙 王梦洪 郑泽琪 彭景添 魏云锋 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期980-984,共5页
目的检测急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血清中纤维介素(Fgl2)的水平,分析它与ACS及冠状动脉狭窄程度的相关性,探讨Fgl2在ACS中的临床价值。方法选择冠心病患者46例,其中急性心肌梗死患者(AMI组)12例、不稳定型心绞痛患者(... 目的检测急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血清中纤维介素(Fgl2)的水平,分析它与ACS及冠状动脉狭窄程度的相关性,探讨Fgl2在ACS中的临床价值。方法选择冠心病患者46例,其中急性心肌梗死患者(AMI组)12例、不稳定型心绞痛患者(UAP组)19例、稳定型心绞痛患者(SAP组)15例和非冠心病者(NCHD组)16例。冠心病患者根据冠状动脉造影结果,按冠状动脉病变支数分为三支病变组、双支病变组与单支病变组。酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组血清Fgl2水平,比较各组血清Fgl2水平变化。按照Gensini评分评价冠心病患者冠状动脉狭窄程度,并评价血清Fgl2水平与冠状动脉狭窄程度的相关性。结果ACS组Fgl2水平明显高于SAP组和NCHD组(P〈0.05),SAP组与NCHD组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。不同病变支数组之间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。Gensini评分显示,AMI组与UAP组、SAP组之间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论ACS患者急性期血清Fgl2水平明显增加,可能是冠心病特别是ACS冠状动脉微血栓形成有预测价值的急性时相性蛋白之一。冠心病患者冠状动脉狭窄程度与血清Fgl2水平无明显相关性。 展开更多
关键词 急性冠状动脉综合征(ACS) 纤维介素(Fgl2)
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肝癌与肝炎患者肝内人纤维介素的表达及意义 被引量:1
6
作者 蒙梦兰 玉艳红 +1 位作者 黄力毅 吴继周 《中国癌症防治杂志》 CAS 2014年第4期380-383,共4页
目的探讨轻度、中度、重度慢性乙型肝炎及肝癌患者肝组织内人纤维介素(又称人纤维蛋白原样2凝血酶原酶,human fibrinogen-like protein 2 prothrombnase,h Fgl 2)的表达及其与患者血清转氨酶(ALT、AST)、胆红素(TBIL)、血浆凝血酶原时间... 目的探讨轻度、中度、重度慢性乙型肝炎及肝癌患者肝组织内人纤维介素(又称人纤维蛋白原样2凝血酶原酶,human fibrinogen-like protein 2 prothrombnase,h Fgl 2)的表达及其与患者血清转氨酶(ALT、AST)、胆红素(TBIL)、血浆凝血酶原时间(PT)等指标的相关性,并分析其意义。方法对14例轻度慢性乙型肝炎、13例中度慢性乙型肝炎、8例重度慢性乙型肝炎及22例肝癌患者,应用免疫组化方法分别检测其肝炎组织及肝癌组织内h Fgl 2的表达,使用MIAS医学图像分析软件测定h Fgl 2的表达水平。结果 h Fgl 2在重度慢性乙型肝炎组及肝癌组的表达均高于轻度及中度慢性乙型肝炎组(P均<0.05)。慢性乙型肝炎组患者肝组织内h Fgl 2蛋白的表达水平与患者血清ALT、AST的水平呈正相关(P<0.001),在肝癌组中h Fgl 2的表达水平与患者PT、ALT、AST、TBIL均无相关性(P均>0.05)。结论肝癌和重度慢性乙型肝炎患者肝内人纤维介素呈高表达,在慢性乙型肝炎中其水平与肝细胞破坏严重程度相关,而在肝癌中则无相关性,提示人纤维介素在肝癌中的作用可能不同于慢性乙型肝炎。 展开更多
关键词 肝肿瘤 人纤维介素 慢性乙型肝炎 肝组织 表达
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Molecular cloning of promoter in human fibrinogenlike protein 2 (hfgl2) gene and functional analysis of its sequence
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作者 MEI FANG RAN YAO YONG ZHOU +3 位作者 DONG XI WEI MING YAN XIAO PING LUO QIN SING 《Journal of Microbiology and Immunology》 2006年第4期258-264,共7页
The aim of this study is to investigate the important regulative elements region which plays an important role on the activation of transcription exerted by the 5' noncoding region of hfgl2 gene in response to HBc... The aim of this study is to investigate the important regulative elements region which plays an important role on the activation of transcription exerted by the 5' noncoding region of hfgl2 gene in response to HBc and HBx. A series of promoter luciferase report plasmids, in which the hfgl2 gene has been deleted of the 5' and retained the common 3', were constructed. All the plasmids constructed were subjected to electrophoretic analysis and DNA sequencing. A eukaryotic construct expressing HBc or HBx, a luciferase reporter construct containing hfgl2 promoter and aβ-galactosidase (β-gal) plasmid were co-transfected into Chinese hamster ovary (CHO) cells and hepG2 cells, respectively. Luciferase report plasmids containing hfgl2 promoter were successfully constructed, and a serial assays of deletion of hfgl2 gene promoter showed that a strong regulatory region from -817 to -467 (relative to the transcription start site) was responsible for transcription and expression regulation of hfgl2 gene. The important regulative elements region in the promoter of hfgl2 gene was in response to HBc and HBx. which contributes to further pursuit of cis-acting elements and transcriptional factors involved in the transcription of hfgl2 gene. 展开更多
关键词 Fulminant hepatitis Fibrinogen-like protein 2 hfgl2)/fibroleukin Gene regulation Luciferase
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纤维介素基因hfgl2启动子的SARS冠状病毒核心蛋白反应元件初步分析
8
作者 姚华宁 韩梅芳 +3 位作者 严伟明 习东 罗小平 宁琴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期130-135,共6页
SARS冠状病毒核心蛋白对hfgl2纤维介素基因有激活作用,采用实时荧光定量PCR和Western印迹已验证了hfgl2基因在mRNA和蛋白水平的表达.为进一步明确在SARS冠状病毒核心蛋白刺激下,hfgl2纤维介素基因5′端非编码区对转录激活起重要作用的... SARS冠状病毒核心蛋白对hfgl2纤维介素基因有激活作用,采用实时荧光定量PCR和Western印迹已验证了hfgl2基因在mRNA和蛋白水平的表达.为进一步明确在SARS冠状病毒核心蛋白刺激下,hfgl2纤维介素基因5′端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列,构建了一系列hfgl2基因启动子荧光素酶报告基因质粒,将其与SARS冠状病毒核心蛋白真核表达质粒共转染CHO细胞.结果表明,转染前3个质粒hfgl2p(-1334)LUC、hfgl2p(-997)LUC、hfgl2p(-816)LUC的细胞的相对荧光素酶活性无显著改变;但转染hfgl2p(-468)LUC质粒的细胞荧光素酶的活性较前明显降低,说明在hfgl2基因启动子-816位至-468位(相对于转录起始点)之间存在着激活该基因的调控序列.本研究在一定程度上从分子水平揭示了SARS冠状病毒蛋白与宿主纤维介素基因之间的关系. 展开更多
关键词 纤维介素基因 SARS冠状病毒 核心蛋白 基因表达调控
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重型乙型肝炎患者肝组织中人纤维介素基因的检测及其与临床转归关系的探讨 被引量:29
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作者 朱帆 宁琴 +6 位作者 陈悦 陶新学 严伟明 习东 严福明 郝连杰 罗小平 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2004年第7期385-388,共4页
目的 研究人纤维介素基因或纤维介素/hfgl 2凝血酶原酶(简称hfgl 2)在重型肝炎、慢性肝炎、肝硬化患者肝组织及非配对患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,分析其表达与患者临床表现和肝功能的关系,探讨hfgl 2检测对预测患者临床转归和... 目的 研究人纤维介素基因或纤维介素/hfgl 2凝血酶原酶(简称hfgl 2)在重型肝炎、慢性肝炎、肝硬化患者肝组织及非配对患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,分析其表达与患者临床表现和肝功能的关系,探讨hfgl 2检测对预测患者临床转归和预后的价值。方法 采用免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测23例重型肝炎、13例慢性肝炎、14例肝硬化患者的肝组织和30例重型肝炎、10例慢性肝炎患者、10例健康对照者PBMC中的hfgl 2表达。应用多媒体彩色图文分析系统对hfgl 2的表达进行半定量分析。结果 23例重型肝炎患者肝组织中,21例可见hfgl 2表达,而在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者肝组织中均无hfgl 2表达。肝组织中hfgl 2表达水平与血清总胆红素值呈正相关。30例重型肝炎患者中,28例外周血白细胞hfgl 2高表达,10例慢性乙型肝炎患者中有1例PBMC可检测到hfgl 2,健康对照组未检测到hfgl 2。PBMC中hfgl 2表达水平与血清总胆红素值呈正相关。结论 Hfgl 2的表达为重型肝炎所特有的现象,hfgl 2的表达与乙型肝炎患者病情的严重程度密切相关,减少和阻断其表达有可能为防治重型肝炎提供新的途径和方法。PBMC中hfgl 2的检测可能有助于重型肝炎的早期诊断和临床转归的判断。 展开更多
关键词 重型乙型肝炎 肝组织 纤维介素 基因检测 临床转归 凝血酶原酶
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鼠纤维介素在小鼠心脏移植急性排斥反应中的表达及其意义 被引量:27
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作者 孙奕 宁琴 +3 位作者 李锦文 严伟明 陈忠华 龚非力 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期294-297,共4页
目的 探讨小鼠同种心脏移植急性排斥反应期间鼠纤维介素 (mfgl2 )在移植心脏组织中的表达及其与组织病理学改变的关系。方法 采用BALB/c小鼠到C5 7BL/ 6小鼠的颈部异位心脏移植作为同种排斥反应模型 ,以抗mgfl2多克隆抗体干预 ,并设... 目的 探讨小鼠同种心脏移植急性排斥反应期间鼠纤维介素 (mfgl2 )在移植心脏组织中的表达及其与组织病理学改变的关系。方法 采用BALB/c小鼠到C5 7BL/ 6小鼠的颈部异位心脏移植作为同种排斥反应模型 ,以抗mgfl2多克隆抗体干预 ,并设同系小鼠心脏移植对照组。采集移植心组织标本作病理学检查 ,以免疫组织化学方法测定mfgl2在移植心脏组织细胞上的表达 ,并对mgfl2的表达进行半定量分析。结果 同系移植对照组移植心脏组织结构正常 ,未见mfgl2表达 ;同种移植组移植心脏组织出现进行性坏死 ,大量单个核细胞浸润 ,并伴有mfgl2的表达 ,且血管内皮细胞表达mfgl2 ;抗mfgl2抗体干预组移植心脏组织损伤较轻 ,移植物的存活时间延长 (P <0 .0 1) ,巨噬细胞、淋巴细胞的浸润和mfgl2表达量也显著减少。结论 mfgl2表达水平与排斥反应所致移植心脏病理损害程度相关 ;抗mfgl2抗体干预能显著减少移植心脏巨噬细胞、淋巴细胞的浸润 ,明显延长移植心脏存活时间。 展开更多
关键词 心脏移植 急性排斥反应 纤维介素 组织病理学 巨噬细胞 淋巴细胞
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重型乙型肝炎患者肝组织中人纤维介素基因的表达及意义 被引量:12
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作者 陈悦 宁琴 +8 位作者 王宝菊 张东绅 严福明 孙奕 习东 严伟明 郝连杰 GLevy 罗小平 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期446-450,共5页
目的 研究人纤维介素基因 (hfgl2凝血酶原酶 /hfgl2 )在重型乙型肝炎患者肝组织内蛋白及mRNA水平的特异性表达 ,hfgl2表达的细胞类型及其与纤维蛋白沉积、微血栓及肝细胞坏死形成之间的关系。方法 采用免疫组化法研究了 2 3例重型乙... 目的 研究人纤维介素基因 (hfgl2凝血酶原酶 /hfgl2 )在重型乙型肝炎患者肝组织内蛋白及mRNA水平的特异性表达 ,hfgl2表达的细胞类型及其与纤维蛋白沉积、微血栓及肝细胞坏死形成之间的关系。方法 采用免疫组化法研究了 2 3例重型乙型肝炎、13例慢性乙型肝炎、14例乙型肝炎肝硬化患者的肝组织及重型乙型肝炎患者的肝外组织中hfgl2的表达 ,同时制备hfgl2cDNA探针并对上述组织进行原位杂交以了解其在mRNA水平的表达。对枯否氏细胞表面标志CD6 8、纤维蛋白进行了检测。进一步对在重型肝炎肝组织中hfgl2凝血酶原阳性标本进行了hfgl2凝血酶原酶和纤维蛋白双染色。结果  2 1例重型乙型肝炎患者肝组织中可见hfgl2表达 ,而在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者的肝组织、重型乙型肝炎肝炎的肝外组织均无hfgl2表达。重型乙型肝炎肝组织枯否氏细胞明显增生活化 ,主要分布于炎性坏死区 ,表达hfgl2之细胞主要为活化枯否氏细胞和血管内皮细胞 ,邻近组织发现有纤维蛋白的沉积和微血栓的形成。结论 hfgl2在重型乙型肝炎肝组织活化枯否氏细胞中的异常表达 ,激活凝血酶原 ,启动局部的凝血过程 ,导致纤维蛋白的沉积、微血栓的形成、微循环障碍和局部炎性反应 ,并最终引发肝细胞大量坏死 。 展开更多
关键词 重型乙型肝炎 肝组织 人纤维介素基因 表达
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理气化痰活血方对冠状动脉微循环障碍模型大鼠血管内皮功能的影响 被引量:14
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作者 王贤良 苏立硕 +3 位作者 毛静远 王帅 赵国元 王聪 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2019年第21期1849-1853,1860,共6页
目的探讨理气化痰活血方对冠状动脉微循环障碍的影响及可能作用机制。方法健康雄性SD大鼠245只随机分为理气化痰活血方组、缬沙坦组、模型组各80只,空白组5只。除空白组外,其余3组均采用经心尖部向左心室注射月桂酸钠的方法建立大鼠冠... 目的探讨理气化痰活血方对冠状动脉微循环障碍的影响及可能作用机制。方法健康雄性SD大鼠245只随机分为理气化痰活血方组、缬沙坦组、模型组各80只,空白组5只。除空白组外,其余3组均采用经心尖部向左心室注射月桂酸钠的方法建立大鼠冠状动脉微循环障碍模型。理气化痰活血方组及缬沙坦组术前1天及术后4周分别给予理气化痰活血方药(浓度2.25 g/ml)、缬沙坦悬浊液(浓度8.89 mg/ml)1 ml/100 g灌胃,模型组及空白组给予1 ml/100 g蒸馏水灌胃,均每日1次。实验期间观察各组大鼠死亡情况;理气化痰活血方组、缬沙坦组、模型组分别于术后1 h、24 h、1周、2周、3周、4周各时间点随机处死5只大鼠,空白组4周时处死,检测各组大鼠血清内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)、血管性血友病因子(vWF)浓度及心肌组织纤维介素(fgl 2)mRNA表达。结果模型组、理气化痰活血方组、缬沙坦组大鼠总计分别死亡44只、40只、42只,3组大鼠术中及术后死亡情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后4周时,模型组大鼠较空白组血清ET-1浓度升高,vWF浓度降低(P<0.01),血清NO浓度和心肌组织fgl 2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组同时间比较,理气化痰活血方组和缬沙坦组术后1 h、24 h、1周、2周、3周、4周血清ET-1浓度降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组和缬沙坦组同时间比较,术后4周理气化痰活血方组血清NO浓度升高,vWF浓度降低(P<0.05或P<0.01)。术后2周、3周理气化痰活血方组心肌组织fgl 2 mRNA表达显著低于模型组(P<0.01)。结论理气化痰活血方可能通过降低冠状动脉微循环障碍大鼠血清ET-1、vWF浓度及心肌组织fgl 2 mRNA表达,升高血清NO浓度,从而起到保护血管内皮功能的作用。 展开更多
关键词 冠状动脉微循环障碍 理气化痰活血方 心脏X综合征 内皮素1 一氧化氮 血管性血友病因子 纤维介素
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fgl2凝血酶原酶多肽抗体的制备和应用 被引量:2
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作者 韩梅芳 宁琴 +4 位作者 严伟明 习东 Laisum Fung Gary Levy 罗小平 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期649-652,共4页
目的 利用人工合成多肽制备针对人源、鼠源fgl2凝血酶原酶 (hfgl2、mfgl2 )的特异性多克隆抗体 ,以期用于与fgl2表达异常密切相关的疾病的研究和诊治。方法 根据mfgl2、hfgl2基因编码的氨基酸序列合成多肽 3(Pep3)和多肽 4 (Pep4 ) ,... 目的 利用人工合成多肽制备针对人源、鼠源fgl2凝血酶原酶 (hfgl2、mfgl2 )的特异性多克隆抗体 ,以期用于与fgl2表达异常密切相关的疾病的研究和诊治。方法 根据mfgl2、hfgl2基因编码的氨基酸序列合成多肽 3(Pep3)和多肽 4 (Pep4 ) ,并用化学方法与匙孔血蓝蛋白 (KLH)连接 ,纯品Pep3 KLH和Pep4 KLH免疫动物 ,所制备的抗血清用ELISA、Westernblot和前凝血质活性 (PCA)实验鉴定 ,并采用免疫组化法应用于乙型肝炎患者肝组织中hfgl2的检测。结果 ELISA检测表明 ,所制备的抗血清可分别与Pep3和Pep4发生特异性免疫反应 ;Westernblot结果显示 ,抗血清可识别MHV 3感染BALB cJ小鼠腹腔巨噬细胞特异性条带 ,相对分子质量 (Mr)为 6 5× 10 3;PCA实验提示 ,抗血清具有中和mfgl2分子酶活性的作用。对病毒性乙型肝炎患者肝组织免疫组织化学染色发现hfgl2仅在重型乙型肝炎患者高表达 ,而在慢性乙型肝炎和肝硬化患者的肝组织中无表达。结论 所制备的fgl2的多肽抗体 (多克隆抗体 )可识别mfgl2和hfgl2分子 ,具有与抗原特异性结合、中和其酶活性的特征 ,为深入研究这一新发现的分子提供了有力的科学手段。 展开更多
关键词 fg12凝血酶原 酶多肽抗体 3型鼠肝炎病毒 纤维介素
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hfg12凝血酶原酶短干扰RNA表达质粒的构建及其效应 被引量:1
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作者 习东 李黎 +5 位作者 高随 朱传龙 郭健文 王鸣 罗小平 宁琴 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期930-934,共5页
目的探索人fg12凝血酶原酶(hfg12)短干扰RNA(siRNA)在体外对hfg12凝血酶原酶基因表达的干预效应。方法构建产生hfg12短发夹状RNA(shRNA)的载体Phfg12shRNA,将其与hfg12-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因表达质粒pEGFPhfg12共... 目的探索人fg12凝血酶原酶(hfg12)短干扰RNA(siRNA)在体外对hfg12凝血酶原酶基因表达的干预效应。方法构建产生hfg12短发夹状RNA(shRNA)的载体Phfg12shRNA,将其与hfg12-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因表达质粒pEGFPhfg12共转染到中国仓鼠卵母细胞(CHO细胞),转染48h后,倒置荧光显微镜下观察EGFP在CHO细胞中的表达,并通过流式细胞仪检测荧光细胞阳性率。将Phfg12shRNA和hfg12表达质粒pcDNA3.1-hfg12共转染到CHO细胞,通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学检测hfg12基因转录和蛋白表达水平的变化。分为4组:共转染P—hfg12shRNA和pcDNA3.1-hfg12为干预组,共转染无关序列shRNA表达质粒和pcDNA3.1-hfg12为非相关干预组,仅转染pcDNA3.1-hfg12为未干预组,不转染任何质粒为空白组。结果在CHO细胞中,含Phfg12shRNA的干预组较未干预组和非相关干预组的绿色荧光强度明显减弱,荧光细胞数明显减少;荧光表达阳性细胞率:干预组α为6.5%±0.2%,未干预组α为40.1%±1.8%,两组比较,Χ^2=8.056,P〈0.01,差异有统计学意义。抑制效率达85.5%。hfg12shRNA显著抑制了hfg12mRNA和蛋白质的表达,干预组hfg12mRNA水平为0.11±0.01,未干预组为0.84±0.06,两组比较,F=10.7,P〈0.01,差异有统计学意义。结论P—hfg12shRNA可在体外高效特异地抑制hfg12基因转录和蛋白的表达,为进一步的体内干扰实验奠定了基础。 展开更多
关键词 肝功能衰竭 RNA CHO细胞 fg12凝血酶原酶
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人纤维介素在系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞中的表达及意义
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作者 严小枫 涂亚庭 林能兴 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期23-25,共3页
目的探讨人纤维蛋白原样蛋白/人纤维介素(HFGL2)与SLE中存在的凝血功能障碍之间的关系。方法采用免疫组化方法检测32例SLE患者和15例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中HFGL2蛋白的表达情况,并用高清晰度彩色医学图文分析系统对SLE患者PBMC... 目的探讨人纤维蛋白原样蛋白/人纤维介素(HFGL2)与SLE中存在的凝血功能障碍之间的关系。方法采用免疫组化方法检测32例SLE患者和15例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中HFGL2蛋白的表达情况,并用高清晰度彩色医学图文分析系统对SLE患者PBMC中HFGL2的表达进行半定量分析。结果与正常人对照组相比,活动期SLE患者PBMC中HFGL2的表达明显增高,并与疾病活动性呈正相关。结论PBMC中HFGL2的表达可能与SLE的发病和疾病的活动有关。 展开更多
关键词 SLE 患者 表达 PBMC 外周血单一核细胞 正常人 系统性红斑狼疮 结论 意义 活动
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缺血再灌注损伤大鼠肾脏凝血纤溶相关蛋白的表达
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作者 乔玉峰 李荣山 +5 位作者 王利华 李宇新 郭珲 王晨 张晓琴 周晓霜 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期525-529,共5页
目的观察缺血再灌注(IR)大鼠肾组织凝血纤溶相关物质的蛋白表达并探讨其意义。方法雄性Wistar大鼠48只被随机分为6组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注0、2、6、12、24h组(IR0h组、IR2h组、IR6h组、IR12h组、IR24h组),每组8只。用... 目的观察缺血再灌注(IR)大鼠肾组织凝血纤溶相关物质的蛋白表达并探讨其意义。方法雄性Wistar大鼠48只被随机分为6组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注0、2、6、12、24h组(IR0h组、IR2h组、IR6h组、IR12h组、IR24h组),每组8只。用无创动脉夹夹闭双肾动脉45min建立IR模型。HE染色观察肾组织病理改变;免疫组织化学法检测肾组织内皮素(ET-1)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)、纤维蛋白原样蛋白2(Fgl-2)凝血酶原酶蛋白的表达。结果与Sham组相比,IR24h组大鼠血BUN及Scr升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。IR各组肾组织病理改变程度随再灌注时间延长而逐渐加重;与Sham组相比,IR各组。肾小管损伤半定量评分明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。IR各组肾ET-1蛋白表达增加,6h达高峰,与Sham组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。IR各组肾FgI-2凝血酶原酶表达增加,12h达高峰,24h基本恢复正常,与Sham组相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。肾组织t—PA表达增加,12h达高峰,与Sham组相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论肾脏IR损伤后存在肾组织凝血纤溶相关物质的异常表达,推测后者可能参与了肾脏IR损伤。 展开更多
关键词 急性肾损伤 缺血再灌注损伤 内皮素-1 纤维蛋白原样2凝血酶原 组织型纤溶酶原激活物
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重型肝炎相关的人纤维介素基因启动子的克隆及功能分析
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作者 韩梅芳 习东 +2 位作者 严伟明 罗小平 宁琴 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期197-201,共5页
目的明确在病毒蛋白HBc和HBx作用下,hfgl2基因5’端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列。方法运用基因重组的方法,构建一系列5’端缺失而保留共同3’端的hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告质粒,将其分别与病毒蛋白HBc和HBx真... 目的明确在病毒蛋白HBc和HBx作用下,hfgl2基因5’端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列。方法运用基因重组的方法,构建一系列5’端缺失而保留共同3’端的hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告质粒,将其分别与病毒蛋白HBc和HBx真核表达质粒共转染CHO细胞和HepG2细胞,检测各组细胞的相对荧光素酶活性。结果酶切鉴定以及DNA测序等证实一系列hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告基因质粒构建成功,系列启动子缺失试验证实:在hfgl2基因启动子-817位至堋位(相对于转录起始点)之间存在着激活该基因的调控序列。结论在HBV病毒蛋白HBc及HBx作用下,hfgl2基因的启动子区存在一个与其转录表达有关的调控序列,探讨了重型肝炎相关的hfgl2基因高度表达的分子机制,为下一步研究相关的顺式作用元件及反式作用因子奠定了基础。 展开更多
关键词 重型肝炎 人纤维介素基因(hfgl2) 基因表达调控 荧光素酶
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重型肝炎小鼠模型肝组织凋亡相关蛋白的表达及其促肝细胞凋亡的研究
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作者 朱传龙 高随 +1 位作者 罗小平 宁琴 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期972-976,共5页
目的研究肝凋亡相关蛋白在重型肝炎小鼠模型肝组织中的表达及其促肝细胞凋亡的作用。方法100PFU鼠3型肝炎病毒(MHV-3)分别感染敏感鼠BALB/cJ系和耐受鼠A/J系,感染后24、48、72h取小鼠肝组织,固定后石蜡包埋并切片,常规HE染色病... 目的研究肝凋亡相关蛋白在重型肝炎小鼠模型肝组织中的表达及其促肝细胞凋亡的作用。方法100PFU鼠3型肝炎病毒(MHV-3)分别感染敏感鼠BALB/cJ系和耐受鼠A/J系,感染后24、48、72h取小鼠肝组织,固定后石蜡包埋并切片,常规HE染色病理诊断计算肝组织炎症活动度积分(HAI);采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测肝细胞凋亡;免疫组化SP法检测mfg12、Fas、TNFR1蛋白的表达及纤维素的沉积;Western blot法检测小鼠肝组织Bcl-2类蛋白的表达,并计算Bax/Bcl-2的值。结果MHV-3感染后BALB/cJ鼠肝组织出现大量炎性细胞浸润和肝细胞凋亡和坏死,而A/J鼠肝组织炎性反应轻微,且仅有少量肝细胞凋亡和坏死,两者差异有统计学意义(P〈0.01);感染后24h BALB/cJ鼠肝组织出现大量mfg12、Fas、TNFR1阳性细胞,并有大量纤维素沉积出现,而A/J鼠无阳性细胞和纤维素的沉积;感染后24h BALB/cJ鼠肝组织Bax蛋白的相对表达水平要远高于A/J鼠(P〈0.01),Bcl-2蛋白的相对表达水平差异无统计学意义,BALB/cJ鼠肝组织Bax/Bcl-2值要远高于A/J鼠(P〈0.01)。结论肝组织凋亡相关蛋白的表达及其促肝细胞凋亡在重型肝炎的发病机理中具有重要作用。 展开更多
关键词 重型肝炎 鼠3型肝炎病毒 纤维介素 凋亡
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