杜仲叶黄酮纯化及其抗炎活性研究

对杜仲叶总黄酮提取物及其4种单体进行纯化,并对其抗炎作用进行初步研究。含量65.19%总黄酮杜仲叶提取物通过液-质联用确定其活性组分,经95%乙醇萃取,萃取料液比为1 g∶10 mL,萃取次数为1次,得到80.35%总黄酮含量杜仲叶提取物,通过半制备液相色谱分离,得到槲皮素-3-O-桑布双糖苷、异槲皮苷、芦丁、紫云英苷4种单体黄酮化合物;经测定,4种杜仲叶单体黄酮化合物和杜仲叶18.14%总黄酮提取物及其78.78%总黄酮提取物均有一氧化氮致炎抗炎活性,其中含量为78.78%的总黄酮提取物抗炎活性最好,而单体化合物的一氧化氮生成抑制率为紫云英苷>芦丁>槲皮素-3-O-桑布双糖苷>异槲皮苷。

蛇含委陵菜总黄酮的体外和体内降血糖效果研究

目的:探讨蛇含委陵菜总黄酮(total flavonoid Potentilla kleiniana Wight et Arn.,TFP)的体外和体内降血糖效果。方法:TFP是利用超声波循环提取及D-101大孔树脂纯化得到。体外降血糖效果主要考察TFP对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶以及对氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorption capacity,ORAC)的抑制影响,体内降血糖效果是利用链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病模型,100、200、400mg/(kg·d)的不同剂量治疗4周,每周末尾部动脉取血测定血糖,4周后眼眶取血测定血清胰岛素,处死取肝脏测定肝糖原和丙酮酸激酶的含量。结果:体外降血糖效果发现,TFP对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制活性并且体现剂量依赖性,而对α-淀粉酶的抑制活性不高,对ORAC的抑制活性较高,而体内降血糖效果发现,TFP不同剂量对糖尿病小鼠具有很好的降血糖效果,特别是400mg/(kg·d)的剂量组降血糖效果非常明显,血清胰岛素的含量得到明显提高,另发现,TFP有利于丙酮酸激酶的分泌,从而促使肝糖原的合成,使得肝糖原的含量经过治疗后含量增加。结论:蛇含委陵菜总黄酮是一种具有很大潜力的降血糖和抗氧化的天然产物。

金樱子黄酮与金樱子多糖对TRPV5在IgA肾病肾脏组织中表达的影响

目的：观察TRPV5在IgA肾病肾脏组织中的表达,以及金樱子黄酮和金樱子多糖对TRPV5表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、金樱子黄酮组、金樱子多糖组。除正常对照组外,其他各组制备IgA肾病模型。金樱子黄酮组和金樱子多糖组于第9~12周分别灌服金樱子黄酮和金樱子多糖。第13周麻醉处死大鼠,提取肾脏组织RNA,荧光定量聚合酶链反应（ PCR）测定各组TRPV5 mRNA表达量。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠肾组织TRPV5表达减少（P〈0.01）；与模型对照组比较,金樱子黄酮组肾脏TRPV5表达差异无统计学意义（P〉0.05）,均低于正常对照组（P〈0.05）；金樱子多糖组大鼠肾脏TRPV5表达显著高于模型对照组（P〈0.01）,与正常对照组差异无统计学意义。结论金樱子多糖可通过调节TRPV5蛋白表达调节钙离子重吸收,发挥改善肾功能作用。

柑橘皮渣抑菌成分提取工艺研究

以柑橘皮渣粗提物中具有抑菌作用的类黄酮和类柠檬苦素为研究对象,进行正交试验优化,得最佳操作条件为:温度30℃,用90%的乙醇溶液按固液比1∶6加入到柑橘皮渣中,摇床转速200r/min连续提取8h得柑橘皮渣粗提物。此粗提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌具有良好的抑菌作用,抑菌圈的直径分别是5.9、5.7、6.0mm。

高速逆流色谱分离纯化荷叶黄酮槲皮素

以含量为4.4%的荷叶黄酮粗粉为原料,在优化高效液相色谱分析荷叶黄酮槲皮素条件的基础上,通过对不同溶剂体系的优选及操作参数的优化,建立了高速逆流色谱分离纯化荷叶黄酮槲皮素的技术方法。结果表明,采用流动相甲醇和0.4%磷酸、梯度(0min90%甲醇→10min60%甲醇→20min40%甲醇→40min20%甲醇)洗脱、检测波长360nm、流速1.0mL/min、柱温30℃、进样量20μL的技术参数可作为高效液相色谱分析荷叶黄酮槲皮素的方法;采用氯仿:甲醇:水(体积比8:10:5)为溶剂系统(上相为固定相,下相为流动相)、流速2mL/min、转速850r/min、进样量150mg的高速逆流色谱操作技术参数,可分离制备荷叶黄酮槲皮素单体,其纯度大于99%。

小鼠海马糖原合成酶激酶3β过表达对小补心汤总黄酮抗抑郁和抗焦虑作用的影响

目的评价小鼠海马糖原合成酶激酶3β(GSK3β)过表达对小补心汤总黄酮(XBXT-2)抗抑郁和抗焦虑作用的影响。方法小鼠海马立体定位微注射包装有GSK3β(S9A)突变型基因的腺相关病毒(AAV)制备小鼠GSK3β过表达模型,3周后采用Western蛋白印迹法检测GSK3β和磷酸化GSK3β(S9)〔pGSK3β(S9)〕含量,采用开场实验检测小鼠自发活动。而后将空载体AAV组和GSK3β过表达组小鼠各自分为给药组和溶剂组,分别ig给予XBXT-2 100 mg·kg^(-1)或同体积蒸馏水,每天1次,分别于给药14和16 d采用悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为,18和20 d采用高架十字迷宫实验和爬梯实验检测小鼠焦虑样行为。结果 Western蛋白印迹法检测结果显示,与AAV组相比,GSK3β过表达组小鼠海马GSK3β含量显著升高(P<0.01),p-GSK3β(S9)含量无显著性差异。在开场实验中,GSK3β过表达组与AAV组间小鼠跨格次数和站立次数无显著差异。在小鼠悬尾和强迫游泳实验中,AAV+XBXT-2组与AAV组比较,小鼠不动时间显著缩短(P<0.05,P<0.01);GSK3β过表达+XBXT-2组与GSK3β过表达组比较,小鼠不动时间无明显差异。在高架十字迷宫实验中,与AAV组比较,AAV+XBXT-2组小鼠进入开臂次数百分比和开臂停留时间百分比显著增加(P<0.01,P<0.05);与GSK3β过表达组比较,GSK3β过表达+XBXT-2组小鼠上述行为指标无明显改变。在爬梯实验中,AAV+XBXT-2组比AAV组小鼠爬梯站立次数显著减少(P<0.05);GSK3β过表达+XBXT-2组与GSK3β过表达组比较,小鼠站立次数无明显差异。结论海马脑区GSK3β过表达可取消XBXT-2在小鼠悬尾和强迫游泳实验中的抗抑郁作用及在高架十字迷宫实验和爬梯实验中的抗焦虑作用。

中药雀舌草中总黄酮提取纯化工艺优化

目的 建立中药雀舌草总黄酮含量测定方法,并对其提取纯化工艺进行优化。方法 以芹菜素作为对照品,以三乙胺（TEA）为显色剂,在波长400 nm处对样品中的总黄酮含量进行测定,并以总黄酮含量为指标对其提取纯化工艺优化。结果 样品总黄酮在浓度30.56~83.14μg/m L范围内线性关系良好,其回归方程为：Y=0.009 1X-0.016 1,R2=0.999 7;平均回收率为100.1%,RSD为1.95%（n=6）。雀舌草总黄酮纯化工艺为采用AB-8型大孔吸附树脂,上样浓度为0.25 g/m L生药材,上样流速为3 m L/min,径高比为1∶9,90%乙醇洗脱7倍量。结论 该方法简便、快速、准确、灵敏度高,可用于雀舌草中总黄酮含量控制;提取纯化工艺可用于雀舌草总黄酮的富集。

增强UV-B对凤仙花部分生理指标和总黄酮质量分数的影响

以凤仙花苗为材料,测定了不同强度UV-B处理(0,0.05,0.10,0.15,0.20 W/m2)对其叶片光合参数、可溶性总糖、脯氨酸、抗氧化酶(SOD,POD,CAT)活性、MDA、可溶性蛋白质以及总黄酮质量分数的影响,结果表明:随着外加UV-B辐射强度增加,胞间二氧化碳浓度(Ci)、可溶性总糖、脯氨酸、SOD,MDA,总黄酮质量分数随之增加,而净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、POD活性、CAT活性和可溶性蛋白质质量分数则随之下降,说明增强UV-B辐射对凤仙花造成了明显伤害,但同时提高了植物总黄酮质量分数.

几种特色蔬菜抗氧化作用的研究

采用DPPH法、ABTS法测定几种特色蔬菜的抗氧化活性,采用福林酚法测定蔬菜中总酚含量,分光光度法测定总黄酮含量并与抗氧化结果进行相关性分析。结果表明:生菜类、芳香类蔬菜具有较高抗氧化活性,IC50值为0.1-0.7 mg/mL。统计学结果表明,总多酚、黄酮含量和DPPH、ABTS的IC50值有显著的负相关(p<0.05)。

桑寄生总黄酮降糖效果初步研究

目的观察桑寄生总黄酮对链脲佐菌素致高血糖小鼠血糖血脂的影响。方法利用链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病模型,桑寄生总黄酮不同剂量治疗4周,每周末尾部动脉取血测定血糖,4周后眼眶取血测定血清血糖及血脂的含量。结果降血糖效果发现,桑寄生总黄酮不同剂量对糖尿病小鼠具有很好的降血糖效果,特别是高剂量组降血糖效果非常明显,同时相比模型组,给药组小鼠的血脂也在正常的范围。结论桑寄生总黄酮对高血糖小鼠有很好的降糖作用。

歪头菜黄酮类化学成分研究

目的研究歪头菜全草中的黄酮类化学成分。方法采用硅胶柱色谱,葡聚糖凝胶柱色谱以及半制备HPLC等方法分离纯化,根据MS和NMR数据鉴定化合物的结构。结果从歪头菜中分离得到8个化合物,分别鉴定为山柰酚(1),槲皮素(2),异鼠李素-3-O-α-L-鼠李糖苷(3),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(4),槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷(5),萹蓄苷(6),杨梅苷(7),金丝桃苷(8)。结论化合物1~7为首次从该植物中分离得到。

蒙药白益母草定性定量方法研究

目的：建立白益母草定性定量方法,以多指标成分综合评价白益母草质量。方法：采用化学和薄层色谱法对白益母草中黄酮类化合物进行定性鉴别;运用高效液相色谱法对其进行定量分析,采用Inertsil ODS-SP（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,检测波长为261 nm,柱温为35℃。结果：白益母草供试品溶液盐酸-镁粉反应阳性,灵敏度高;薄层鉴别斑点清晰,重现性好;HPLC分析,异鼠李素-3-O-芸香糖苷（S1）、5,6,7,4＇-四羟基黄酮-7-O-（6＂-O-[E]-咖啡酰基）-葡萄糖苷（S2）、5,6,7,4＇-四羟基黄酮-7-O-（6＂-O-[E]-香豆酰基）-葡萄糖苷（S3）、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷（S4）、金丝桃苷（S5）、芹菜素-7-O-葡萄糖苷（S6）和7,4＇-二甲氧基芹菜素（S7）质量浓度分别在100.00～500.00（r=0.999 7）、20.00～100.00（r=0.999 9）、10.00～50.00（r=0.999 9）、5.00～25.00（r=0.999 5）、2.00～10.00（r=0.999 5）、1.00～5.00（r=0.999 7）和1.00～5.00μg·m L-1（r=0.999 4）范围内具有良好的线性关系,平均回收率（n=6）分别为98.67%（RSD=1.20%）、97.42%（RSD=1.45%）、98.32%（RSD=2.08%）、96.85%（RSD=1.27%）、97.23%（RSD=1.95%）、96.37%（RSD=1.40%）、96.54%（RSD=1.63%）,8批样品中上述7种成分平均含量范围分别为5142.0～5714.0、1332.0～1465.0、724.0～802.0、302.4～330.8、113.4～132.4、58.69～62.08、58.75～62.57μg·g-1。结论：通过实验研究,建立了白益母草定性和定量分析方法,为药材质量检测提供依据。