Extraction Process and Content Determination of Total Flavonoids in Lonicera japonica

[Objectives]To optimize the extraction process of total flavonoids of Lonicerae japonica and establish a method for its extraction and content determination.[Methods]The total flavonoids of L.japonica were extracted by reflux extraction method.Through a single factor experiment,the effects of extraction method,extraction solvent concentration,extraction volume and extraction time on the total flavonoids content of medicinal materials were investigated to select the optimal extraction process of the total flavonoids of L.japonica.[Results]The optimal extraction process of the total flavonoids of L.japonica was 70%ethanol,1∶30 of solid-to-liquid ratio,and 1.0 h of reflux extraction time.[Conclusions]This method can effectively determine the content of total flavonoids in L.japonica and is expected to provide a certain scientific basis for the study of the quality standard of L.japonica.This method has high reproducibility.It is stable and feasible in extraction of total flavonoids from L.japonica.

金银花总黄酮低共熔溶剂提取工艺优化

目的优化金银花总黄酮低共熔溶剂提取工艺。方法在单因素试验基础上,以1,3-丁二醇与氯化胆碱比例、液料比、超声时间为影响因素,总黄酮得率为评价指标,响应面法和BP神经网络优化提取工艺。结果BP神经网络优化总黄酮得率高于响应面法优化。最优条件为1,3-丁二醇与氯化胆碱比例2.7∶1,液料比27∶1,超声时间29 min,总黄酮得率为7.85%。结论该方法稳定可靠,可用于低共熔溶剂提取金银花总黄酮。

基于酚酸类成分评价不同品种金银花枝和叶的利用价值

以8个品种金银花的枝和叶为研究对象,建立8种酚酸类成分的高效液相色谱检测方法,测定样品中酚酸类成分的含量特征,将含量测定结果经聚类分析、因子综合分析及偏最小二乘判别分析(PLS-DA)等多元统计学方法评价。结果表明,建立的金银花枝和叶中8种酚酸类成分的含量测定方法稳定、可靠、简便。8个品种金银花枝和叶中的酚酸类成分总含量变化范围分别为19.4162~33.6684、40.9900~80.3068 mg·g^(−1)。不同品种间酚酸类成分总含量差异较大,枝和叶中均为‘北花一号’的总含量最高,‘巨花一号’的总含量最低。聚类分析发现,金银花枝中,‘北花一号’单独聚为一类,其各组分含量高于其他品种;因子综合分析表明,‘北花一号’综合得分>1;PLSDA分析筛选出异绿原酸A、异绿原酸C、阿魏酸和绿原酸可能是引起枝的酚酸含量差异的主要成分。金银花叶中,‘北花一号’和‘九丰一号’聚为一类,且这两个品种因子综合分析得分>1;PLS-DA分析筛选出绿原酸、咖啡酸和阿魏酸可能是引起叶的酚酸含量差异的主要成分。总之,不同品种金银花枝和叶的主要酚酸类成分特征存在差异,就酚酸类成分而言,‘北花一号’和‘九丰一号’的枝和叶更有优势。本研究为金银花枝和叶的利用提供了科学依据。

不同金银花枝叶发酵产物的抑菌及抗氧化活性研究

该研究分别利用酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌及枯草芽孢杆菌发酵金银花枝叶,对比了发酵产物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌的抑菌效果,并测定了发酵产物清除ABTS+自由基、DPPH自由基的能力及对FRAP亚铁离子的还原能力。结果表明,4种发酵产物对3种病原菌均表现出一定的抑制作用,乳酸菌发酵产物对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌抑制能力最强,酵母菌发酵产物对枯草芽孢杆菌的抑制能力最强。乳酸菌发酵产物清除DPPH能力最强(IC_(50)0.07 mg/mL);酵母菌发酵产物清除ABTS+自由基能力(IC_(50)0.06 mg/mL)及还原亚铁离子能力最强(IC_(50)0.44 mg/mL)。研究结果可为金银花枝叶的综合利用提供一定的理论基础。

金银花黄酮对过氧化氢诱导RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用

探讨金银花黄酮对RAW264.7巨噬细胞抗氧化活性的影响。通过过氧化氢诱导RAW264.7细胞损伤,建立细胞氧化损伤模型,研究金银花黄酮低、中、高剂量组(62.5,125,250 mg/mL)对损伤细胞的保护作用。研究结果表明:质量浓度62.5～250 mg/mL范围的金银花黄酮可显著促进RAW264.7细胞的增殖(P<0.05)。金银花黄酮各剂量组显著提高了细胞及细胞培养液中总抗氧化能力(P<0.05),显著提高了SOD、GSH-Px、CAT活性及GSH含量(P<0.05);显著降低了细胞及细胞培养液中MDA含量(P<0.05);显著降低了细胞中LDH活性并提高了细胞培养液中LDH活性(P<0.05)。金银花黄酮促进RAW264.7细胞的增殖,并且对过氧化氢诱导的RAW264.7细胞损伤有良好的保护作用,存在剂量依赖效应。本研究为金银花功能性食品及保健品的开发提供理论依据。

RRLC-Q-TOF/MS分析金银花的化学成分

目的采用快速液相-高分辨四极杆飞行时间串联质谱对金银花化学成分进行分离鉴别。方法采用WatersACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm),乙腈(含0.1%甲酸)和0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速0.4mL.min-1,进样量为5μL,检测器为高分辨四极杆飞行时间质谱,ESI离子源,质量数扫描范围m/z100～1 500。结果根据正、负离子模式下获得的各色谱峰的质谱数据,共检测到33个化学成分,其中6个咖啡酰奎尼酸类、7个黄酮类和7个环烯醚苷类成分通过与文献对照或根据质谱裂解规律得到进一步确认。结论此方法灵敏准确,有利于化合物结构鉴别,可作为中药金银花的咖啡酰奎尼酸类、黄酮类和环烯醚苷类成分的鉴定方法。

金银花花叶总黄酮类化合物的最佳提取工艺研究

利用系统溶剂法及L9(34)正交实验探讨从金银花及金银花叶中提取黄酮类,其最佳提取工艺为90%乙醇、物料比1∶12,于70℃温浸60 min.

忍冬叶中黄酮类成分的分离与鉴定

目的为忍冬(Lonicera japonicaThunb.)叶中黄酮类化学成分药效学物质基础提供依据。方法采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20柱色谱法等对忍冬叶进行分离纯化,并通过理化常数测定和波谱分析对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果从忍冬叶75%乙醇提取物中分离得到7个黄酮类化合物,并鉴定其结构分别为5,7,4′-三羟基-8-甲氧基黄酮(5,7,4′-trihydroxy-8-me-thoxyflavone,1)、木犀草素(luteolin,2)、苜蓿素(tricin,3)、山萘酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempferol-7-O-β-D-glucopyranoside,4)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glu-copyranoside,5)、洋芹素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside,6)、香叶木素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside,7)。结论化合物1、4为首次从忍冬属植物中分离得到,化合物3、6、7为首次从植物忍冬中分离得到。

忍冬干叶基因组DNA提取方法的研究

目的:从变色硅胶干燥的忍冬叶片中提取高质量的基因组DNA。方法:分别采用常规CTAB法与改良CTAB法提取干叶的DNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法、酶切检测其质量,并与鲜叶的提取效果比较。结果:改良CTAB法所得DNA优于常规CTAB法,电泳条带清晰,完整性好,纯度高,能被EcoRⅠ完全酶切。从变色硅胶干燥的忍冬叶片中提取的DNA质量与鲜叶无明显差异,且产率更高。结论:改良CTAB法适合忍冬干叶基因组DNA的提取。

金银花叶中黄酮类物质的提取工艺

目的研究金银花叶中总黄酮的最佳提取工艺。方法以乙醇为提取溶剂,分别采用温浸法和超声法从金银花叶中提取黄酮,并通过单因素考察和正交试验优化各自的工艺条件。结果在优化的工艺条件下,温浸法提取总黄酮的收率为11.5%,超声法的收率为15.0%。工艺为用20倍量的50%乙醇浸泡金银花叶12 h后,于50℃超声提取。结论从金银花叶中提取黄酮类化合物的较佳方法为超声波法。

枇杷叶黄酮提取物的抗氧化作用研究

分别研究枇杷叶不同部位提取物中黄酮含量及黄酮提取物的抗氧化活性。采用超声法分别提取枇杷叶不同部位的黄酮类物质,用比色法测定含量。采用Schaal烘箱法,以过氧化值为指标研究了黄酮提取物对猪油的抗氧化效应,并采用DPPH自由基和ABTS自由基清除体系评价总黄酮的抗氧化能力。结果表明:枇杷叶尖部位的黄酮含量最高为(5.79±0.03)mg/g。在所研究的浓度范围内,枇杷叶黄酮对猪油具有一定的抗氧化作用,且随着其剂量的增加而增强;枇杷叶黄酮对DPPH自由基和ABTS自由基都具有较强的清除能力,在一定浓度范围内,清除自由基能力与浓度存在量效关系。

HPLC法同时测定忍冬叶中9种活性成分的研究

为了有效利用忍冬植株,建立了同时检测忍冬叶中新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、金丝桃苷、异绿原酸C、木犀草素和槲皮素9种活性成分含量的HPLC分析方法,并用于忍冬叶中活性成分的定量测定,为忍冬叶多指标质量评价标准提供理论依据和方法参考.

复合酶辅助提取金银花叶中黄酮工艺和动力学研究

为了探索采用恒温水浴法从金银花(Lonicera japonica)叶中提取黄酮的最佳试验方法及条件,采用单因素试验考察了酶种类和加入量、搅拌速度、提取温度、金银花叶粉末粒度、提取时间等因素对黄酮提取率的影响,采用正交试验获得在复合酶存在下提取金银花叶中黄酮的最佳试验条件,并用常规动力学模型进行验证。结果表明,复合酶的加入有利于金银花叶中黄酮的提取,其最佳条件为80℃、纤维素酶和果胶酶各0.06 g、搅拌速度800 r/min、提取时间40 min。当提取温度低于353 K,常规提取受动力学控制;若提取温度高于353 K,过程将不再受动力学控制。

枇杷叶不同成分抗氧化和止咳祛痰活性研究

采用分光光度法测定枇杷[Eriobotryajaponica(Thunb.)Lindl.]叶提取物中的黄酮、多酚、总萜及其含量;采用DPPH和FRAP法检测其抗氧化活性;采用氨水引咳法和气管酚红排泌法研究其止咳祛痰活性,并分析其成分与抗氧化、止咳祛痰活性的相关性。结果表明,6种枇杷叶提取物均具有抗氧化活性,其中黄酮抗氧化活性显著高于三萜酸,多糖抗氧化活性较差,提取物的抗氧化活性与黄酮和多酚含量显著相关;6种提取物均具有止咳祛痰活性,黄酮和三萜酸的效果相近,多糖较差,成分含量与活性相关性分析显示,黄酮能减少咳嗽次数,总萜能延长咳嗽潜伏期,且有一定的祛痰作用。枇杷叶中黄酮、多酚可能是抗氧化的重要成分,黄酮与止咳祛痰活性相关,通过精制富集有效成分,能提高相关活性。

金银花总黄酮自微乳处方的优化

目的优化金银花总黄酮自微乳处方。方法以油相、乳化剂、助乳化剂比例为影响因素,平均粒径、多分散指数、载药量为评价指标,单纯形网格法优化处方。结果最佳处方为油相(油酸乙酯)、乳化剂(吐温-80)、助乳化剂(1,2-丙二醇)比例10∶45∶45,平均粒径、多分散指数、载药量分别为45.63nm、0.315、12.506 mg/g。结论该方法稳定可靠,预测性好,可用于筛选金银花总黄酮自微乳处方。

金银花叶提取物的抑菌效果研究

对金银花叶提取物的抗菌作用进行了初步研究,结果表明:金银花叶提取液对供试的几种主要危害食品卫生、安全和对临床医学等具有重要影响的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、青霉、黑曲霉、黄曲霉和酿酒酵母等均有一定抑制作用,金银花叶中的黄酮类提取物对各敏感供试菌的最低抑菌浓度分别是125、62.5、250、1000、250、62.5、250和250μg/g;金银花叶中的绿原酸类提取物对各敏感供试菌的最低抑菌浓度分别是250、250、500、2000、500、125、500和500μg/g。

忍冬叶中绿原酸和总黄酮分离工艺的研究

研究了用柱层析法从忍冬叶中分离绿原酸和总黄酮的工艺，找出了最佳的工艺条件，为研制新药提供了理论依据。

忍冬非花蕾部位的研究进展

忍冬为忍冬科忍冬属植物,在我国分布广泛。目前已从忍冬主要部位提取分离出的化合物近300种,包括有机酸、黄酮、挥发油、萜类等成分,不同部位所含化学成分有所差异。概述了近年来关于忍冬根、茎、叶、果实等非花蕾部位的化学成分及主要药理作用,并且对目前发现的忍冬不同部位所含化学成分进行了比较,以期为忍冬今后的研究开发提供参考。

灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶显微特征比较研究

目的为灰毡毛忍冬及其变异株、忍冬的鉴别和种质选育资源的开发利用提供依据。方法采用性状鉴别和显微鉴别的方法从叶片外部形态和内部构造进行对比研究,探究灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶的异同点。结果灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶在外部形态(叶形、叶大小)和内部构造(毛茸、气孔指数等)均存在差异,其中灰毡毛忍冬与其变异株间差异相对较小,灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬差异较大。结论灰毡毛忍冬、灰毡毛忍冬变异株、忍冬叶外部形态和内部显微特征存在差异,可为三者鉴别提供参考。

忍冬叶有效成分含量与气候因子的灰色关联分析

采用HPLC法同时测定不同产区忍冬叶中8种有效成分(6种绿原酸类和2种黄酮类)的含量,并进行显著性分析;采用GTMS 3.0系统软件分析忍冬叶有效成分的含量与气候因子间的灰色关联度。结果表明:不同产区忍冬叶有效成分含量差异显著,山东产区忍冬叶质量最佳,其次为河北、河南;日照时数、降雨量、相对湿度是影响忍冬叶有效成分含量的主导气候因子。