铁冬青-单面针浸膏中紫丁香苷、长梗冬青苷、氯化两面针碱、白鲜碱含量测定

开展了HPLC法测定铁冬青-单面针及其浸膏中紫丁香苷、长梗冬青苷、氯化两面针碱、白鲜碱含量的方法学研究。确定了铁冬青的最优测定条件(流动相为乙腈-水;检测波长210 nm;流速1.0 mL/min;柱温30℃;进样量10μL)、单面针的最优测定条件(流动相为甲醇-0.1%甲酸水;检测波长272 nm;流速1.0 mL/min;柱温30℃;进样量10μL)、铁冬青-单面针浸膏的最优测定条件(流动相为乙腈-0.4%磷酸水;长梗冬青苷、白鲜碱检测波长为210 nm;紫丁香苷、氯化两面针碱检测波长为272 nm;流速1.0 mL/min;柱温30℃;进样量5μL)。在上述条件下,开展了HPLC测定法的线性范围、精密度、稳定性、重复性、回收率等实验,结果表明HPLC法可以较好地用于测定铁冬青-单面针及浸膏中紫丁香苷、长梗冬青苷、氯化两面针碱、白鲜碱的含量。

救必应及其常用同属药用植物高效薄层指纹图谱研究

目的以丁香苷、具栖冬青苷和铁冬青酸为对照建立救必应药材主要有效成分的高效薄层指纹图谱,分析比较取自救必应不同部位和不同横切面厚度的茎皮的指纹图谱,并与较易与之混淆的同属药用植物毛冬青及岗梅的指纹图谱进行比较。方法采用硅胶GF254高效预制薄层板,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(体积比8∶24∶5∶2∶2)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液显色后获得薄层荧光色谱指纹图谱,经指纹图谱系统解决方案软件(ChromafingerTM)生成共有模式,并进行相似度与主成分分析。结果救必应薄层荧光色谱指纹图谱由11条特征荧光斑条组成。将荧光色谱图像与轮廓扫描图谱结合分析,建立了救必应指纹图谱模式。结论救必应不同药用部位之间、不同厚度药材之间及与其同属药用植物之间指纹图谱差异均较大,应加以区别,不可混用。

救必应中长梗冬青苷提取工艺正交试验优化

目的:研究长梗冬青苷最佳提取工艺条件。方法:采用正交试验设计研究不同浓度的乙醇、乙醇体积、提取时间和提取次数对长梗冬青苷提取率的影响;采用高效液相色谱法测定提取物中长梗冬青苷含量。结果:救必应中长梗冬青苷最佳提取条件为加入6倍量70%乙醇,回流提取3次,每次1 h。结论:本法提取效率高,适合大量提取,可用于工业化生产。

救必应的化学成分研究

对救必应根皮的化学成分进行了系统研究。从其中分离并鉴定了12个化合物,分别为铁冬青酸(Ⅰ)、坡模醇酸(Ⅱ)、具栖冬青苷(Ⅲ)、苦丁冬青苷H(Ⅳ)、3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-3β,19α-二羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(Ⅴ)、丁香脂素4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅵ)、咖啡酸4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅶ)、香草酸4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅷ)、丁香苷(Ⅸ)、芥子醛葡萄糖苷(Ⅹ)、β-谷甾醇(Ⅺ)和胡萝卜苷(Ⅻ)。其中,化合物Ⅱ、Ⅳ～Ⅷ为首次从该植物中分离得到。

铁冬青果红色素的提取及性质研究

研究了铁冬青果红色素的提取条件和理化性质,结果表明,料液比1:50(g/mL)、70℃恒温、40%乙醇(pH1)浸提40min,提取效率较好,干果皮得率为10.6%。铁冬青果红色素属花色素苷类色素,pH值对色素影响明显;80℃以内比较稳定;光照能加快色素降解;金属离子Na+,Ca2+,A13+,Zn2+对色素色泽无影响,而Cu2+,Fe3+,Pb2+对其有不良影响;色素抗氧化能力较差而耐还原性能稍好;蔗糖、葡葡糖和盐等添加剂对色素无影响。

高效液相色谱法测定救必应药材中具栖冬青苷的含量

目的建立救必应药材中具栖冬青苷含量的测定方法。方法用C18柱(4.6×250mm,5μm),以60%甲醇为流动相,检测波长213nm。结果平均回收率为99.44%(RSD=2.15%)。结论该方法简便、快速、结果准确,可用于救必应药材的质量控制。

救必应对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用

目的研究救必应的水提物(IRTW)对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用及其机制。方法将60只小鼠随机平均分成6组:正常对照组、CCl4模型组、BPD组及IRTW高、中、低三个剂量组;采用四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤模型,观察IRTW对小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量及对肝组织病理变化的影响。结果 IRTW各剂量组能显著降低小鼠血清ALT、AST含量(P<0.01或P<0.05),降低肝匀浆MDA含量(P<0.01或P<0.05),升高SOD、GSH-Px活性(P<0.01或P<0.05),减轻肝组织病理损伤程度。结论 IRTW对小鼠急性化学性肝损伤具有显著保护作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化有关。

救必应中具栖冬青甙的分离与鉴定

报道救必应（ＩｌｅｘｒｏｔｕｎｄａＴｈｕｎｂ）中的主要成分具栖冬青甙的提取分离工艺，并列有该成分的详细的ＩＲ、１ＨＮＭＲ、１３ＣＮＭＲ和ＭＳ数据。

HPLC法测定救必应药材中冬青素A的含量

目的建立救必应药材中冬青素A的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法。色谱柱：Dia-monsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈（A）与0.4%磷酸（B）,梯度洗脱;体积流量：1 mL·min^-1;检测波长：210 nm;柱温：25℃;进样量：20μL。结果冬青素A在12.5-500μg·mL^-1范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9998）,平均回收率为99.22%,RSD=1.85%（n=6）。结论该方法简便、准确、可靠且分离度好,可用于救必应药材中冬青素A的含量测定。

紫外光谱法鉴别厚朴及其伪品救必应

目的 建立厚朴及其伪品救必应的紫外光谱鉴别方法。方法 采用中药鉴别紫外谱线组法进行实验。结果厚朴及其伪品救必的紫外谱线组图像、最大吸收峰数目及峰位值具有明显差异。结论 本法简便 ,准确、灵敏 。

尖叶杜英等4种景观树种轻基质容器育苗实验

研究不同基质配比对尖叶杜英等树种生长生理特性的影响,在于筛选出每种树种最佳的轻基质配方。设立15组不同配比的轻基质,测量尖叶杜英、山杜英、铁冬青、仪花的4项生长指标,利用隶属函数综合评价方法评价出最佳的基质配比。试验结果表明,对尖叶杜英育苗效果较好的基质配比有M3(椰糠)和M10(黄心土:泥炭土=1:4),对山杜英育苗效果较好的基质配比有M4(黄心土:泥炭土=1:1)和M9(黄心土:椰糠:蘑菇渣=2:1:1),对铁冬青育苗效果较好的基质配比有M9(黄心土:椰糠:蘑菇渣=2:1:1)和M8(黄心土:泥炭土:蘑菇渣=2:1:1),对仪花育苗效果较好的基质配比有M12(黄心土:蘑菇渣=1:4)和M8(黄心土:泥炭土:蘑菇渣=2:1:1)。

铁冬青不同产地不同部位质量分析

目的铁冬青不同产地不同部位的质量分析。方法采用高效液相色谱法测定铁冬青不同产地、不同药用部位中长梗冬青苷和紫丁香苷的含量。结果铁冬青的果实和树叶中无长梗冬青苷,含有微量的紫丁香苷;不同产地的铁冬青中长梗冬青苷和紫丁香苷含量差别也很大。结论在开发铁冬青药用资源时要充分考虑药用部位及产地对其质量的影响。

制备型高效液相色谱法纯化紫丁香苷的研究

救必应药材经粉碎过筛后用50%乙醇超声提取,再以大孔吸附树脂XDA-1分离富集获得紫丁香苷粗提物,然后用制备型高效液相色谱法:采用Welchrom C18(4.6 mm×250 mm,10μm)色谱柱,优化条件,获得DACHB50(50 mm×1000 mm)制备色谱柱初始色谱条件;再以Chromatorex C18(10μm,300 g)为制备色谱柱填料,优化条件探索最佳进样量,并制备获得目标化合物。通过薄层色谱法和分析型高效液相色谱法对该化合物进行定性和定量分析,结果表明所得化合物的纯度为98.6%。以X-单晶衍射方法测定该化合物的分子结构信息,并解析数据,进一步确定该化合物是紫丁香苷。

大叶冬青化学成分研究

目的研究大叶冬青中的化学成分。方法应用硅胶及Sephadex LH-20凝胶柱色谱法对其化学成分进行分离,并利用核磁共振(NMR)和质谱(MS)等方法鉴定分离得到的化合物。结果从大叶冬青的干燥叶中分离得到8个化合物,分别鉴定为羽扇豆醇、熊果酸、23-羟基齐墩果酸、熊果醇、27-羟基-α-香树脂醇、坡模酸、3β,23-二羟基乌索-12-烯-28-酸、羽扇-20(29)-烯-3β,24-二醇。结论该植物具有较好的研究价值。

正交设计法筛选救必应总黄酮的精制工艺

目的:研究救必应总黄酮的精制工艺;方法:应用正交设计表L9(3)4设计救必应的精制工艺,以总黄酮的量为考察指标,筛选救必应总黄酮的最佳精制工艺;结果:最佳精制工艺为取药材,经提取,将所得的提取液浓缩至一定浓度(每100mL相当于6.67g原药材),然后在其中加无水乙醇,使乙醇终浓度为45%,静置沉淀8h,过滤,浓缩至干浸膏粉。结论:该精制工艺合理、可行。

胃肠舒片薄层鉴别研究

目的:建立胃肠舒片中救必应、醋延胡索的薄层鉴别方法。方法:采用薄层色谱法,考察供试液制备方法、展开条件、色谱检视方法、耐用性等因素,对救必应、醋延胡索进行定性鉴别。结果:救必应、醋延胡索薄层鉴别斑点清晰,阴性对照无干扰,专属性强。结论:该方法简便可行,重现性好,可用于胃肠舒片的质量控制。

竹壳葫芦茶的质量标准研究

[目的]建立竹壳葫芦茶质量标准。[方法]采用薄层色谱法（TLC）对竹壳葫芦茶中的救必应进行定性鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC）测定竹壳葫芦茶中的槲皮素含量。[结果]TLC结果显示,竹壳葫芦茶在与救必应对照药材相应位置上,呈相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。竹壳葫芦茶槲皮素含量为41.03~49.06μg/包。[结论]该研究建立的定性及定量方法简单可行、重复性好,能有效地控制竹壳葫芦茶的质量。

救必应皂苷类成分的组织化学研究

目的应用植物解剖学和组织化学技术,研究救必应皂苷成分的累积分布状态。方法将救必应不同部位的显微切片用5%(质量浓度)香草醛-冰醋酸和高氯酸混合试剂进行染色后,放置于显微镜下观察并拍摄显微图片,阴性对照为用FAA固定液浸泡1个月后的组织切片。结果救必应皂苷成分在根中主要分布于次生韧皮部和皮层薄壁细胞中;在茎中主要分布于次生韧皮部细胞中,少量分布在韧皮部;在叶中则主要分布在栅栏组织中,海绵组织有少量分布。结论救必应中的皂苷成分主要分布在营养器官的薄壁组织细胞中。

救必应提取物制备工艺的研究

目的优选救必应提取物的制备工艺。方法采用单因素法选择提取溶剂;采用正交试验法,以长梗冬青苷质量分数、浸膏得率为指标,考察提取次数、提取时间、提取溶剂用量3个因素对提取工艺的影响;采用反相高效液相色谱法测定长梗冬青苷质量分数,烘干法测定浸膏得率。以长梗冬青苷质量分数为指标优选减压浓缩和干燥工艺。结果救必应最佳提取工艺为:药材加8倍量70%(体积分数)乙醇,加热回流提取2次,每次1 h;在60℃下减压浓缩和干燥。结论该工艺设计简便、稳定可行,适用于工业化生产。

救必应化学成分的分离与鉴定

目的研究救必应的化学成分。方法采用制备薄层色谱、硅胶吸附柱色谱、ODS柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等方法对救必应的95%乙醇提取物的乙酸乙酯层进行分离纯化,依据理化性质、波谱数据鉴定化合物结构。结果分离得到8个化合物,分别鉴定为3,4-dihydroxy-acetophenone(1)、threo-8S-7-methoxysyringylglycerol(2)、2,3-dihydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-1-propanone(3)、caffeic acid(1-hydroxyl-4-O-β-D-glucopyranosylprenyl)-ester(4)、长梗冬青苷(pedunculoside,5)、rotungenoside(6)、救必应酸(rotundic acid,7)、rotungenic acid(8)。结论化合物1、2、3、4为首次从冬青属植物中分得。