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牛分支杆菌抗体荧光微球免疫层析试纸条检测方法的建立
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作者 苏华彬 亓菲 +8 位作者 南文龙 刘蒙达 孙明军 焉鑫 毛迎雪 曲瑶 孙淑芳 李桂梅 樊晓旭 《动物医学进展》 北大核心 2024年第11期1-8,共8页
为了建立一种便捷、高效、采用荧光微球免疫试纸条技术的牛分支杆菌检测方法,首先表达、纯化MPB70和MPB83蛋白,并用荧光微球进行标记,组装荧光微球免疫试纸条并进行条件优化、特异性试验、重复性试验以及灵敏性试验,建立一种检测牛分支... 为了建立一种便捷、高效、采用荧光微球免疫试纸条技术的牛分支杆菌检测方法,首先表达、纯化MPB70和MPB83蛋白,并用荧光微球进行标记,组装荧光微球免疫试纸条并进行条件优化、特异性试验、重复性试验以及灵敏性试验,建立一种检测牛分支杆菌的荧光微球免疫试纸条方法。试验表明,试纸条检测时间仅需15 min;试纸条仅对牛分支杆菌抗体阳性血清发生反应,特异性好;变异系数在3.51%~9.23%之间,重复性好;灵敏度与美国爱德士牛分支杆菌抗体检测试剂盒相当,且总符合率高达90.5%。说明建立的牛分支杆菌抗体荧光微球免疫层析试纸条检测方法具有良好的特异性、灵敏性与重复性,可为牛分支杆菌检测提供新技术支持。 展开更多
关键词 荧光微球 牛分支杆菌 试纸条
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四种稻米中镉检测方法比较研究
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作者 张大诚 李发启 +2 位作者 彭灿 胡丽 谭小文 《粮食科技与经济》 2024年第1期93-96,共4页
采用石墨炉原子吸收法、固体直接进样电热蒸发原子吸收光谱法、电化学阳极溶出伏安法和X射线荧光光谱法测定稻米中镉含量,对4种定量检测方法的准确度、精密度以及相对误差进行了比较分析。研究结果表明,固体直接进样电热蒸发原子吸收光... 采用石墨炉原子吸收法、固体直接进样电热蒸发原子吸收光谱法、电化学阳极溶出伏安法和X射线荧光光谱法测定稻米中镉含量,对4种定量检测方法的准确度、精密度以及相对误差进行了比较分析。研究结果表明,固体直接进样电热蒸发原子吸收光谱法操作简单,无需化学前处理,单样检测时间在3 min左右,快速高效,精密度良好,可信度高。通过4种检测方法对比,固体直接进样电热蒸发原子吸收光谱法的测试结果准确度高,与国家标准方法相比相对误差多数在±10%以内,重复6次测定的RSD为3.9%,可作为一种新型快速检测稻米中镉的方法,具备方便快速、准确度高、重复性好等优点,在基层可广泛应用。 展开更多
关键词 稻米 固体直接进样 石墨炉原子吸收法 X射线荧光光谱法 电化学阳极溶出伏安法
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Determination of <i>Salmonella pullorum</i>with Nanoparticles Immune Based Lateral Flow Strip Assay
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作者 Bin Wu Xiuyun Zhang +2 位作者 Wei Pan Lin Zhang Fan Zhang 《Advances in Microbiology》 2015年第5期364-369,共6页
The isolation and culture of conventional detection method of salmonella can not meet the testing requirements of quick and easy detection at the grassroots level. In this study, we prepare the fluorescent nanoparticl... The isolation and culture of conventional detection method of salmonella can not meet the testing requirements of quick and easy detection at the grassroots level. In this study, we prepare the fluorescent nanoparticles as a marker, covalently conjugate with monoclonal antibodies of Salmonella pullorum. The whole Salmonella pullorum antigen and goat anti-mouse antibody sprayed on the nitrocellulose membranes are used as test line and control line. The fluorescence nanoparticles immune based lateral flow strips are made according to the principle of antigen-antibody immune response. The test strips may interpret results within 30 min. The results of the salmonella A, S. agona, S. chester and S. arechavaleta are positive, including, S. agona for weakly positive. After analysis, it is found that in addition to the salmonella of group A, the other positive salmonella are in group B. But it is negative of S. derby, S. rissen, and other 6 kinds of salmonella, with good specificity. The fluorescence nanoparticles immune based lateral flow strips are a little of sample can be detected fast, easily, inexpensive, easy to universal without professional technical personnel detection method. It provides a new detection method for the detections of Salmonella pullorum. 展开更多
关键词 Monoclonal Antibody NANOPARTICLES fluorescence NANOPARTICLES IMMUNE BASED Lateral Flow strips SALMONELLA pullorum
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基于咖啡酸的水合肼荧光探针的合成及应用 被引量:3
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作者 宋健 杨晓琴 +3 位作者 张颖君 饶小平 赵平 姜倩 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第1期50-55,62,共7页
以天然产物咖啡酸为原料,设计、合成了一种可快速识别水合肼(N_(2)H_(4))的咖啡酸乙酯荧光探针(ED)。通过^(1)HNMR、^(13)CNMR和HRMS对其结构进行了表征。探针ED对N_(2)H_(4)具有高选择和高灵敏性识别,检测极限为0.31μmol/L,最适pH范围... 以天然产物咖啡酸为原料,设计、合成了一种可快速识别水合肼(N_(2)H_(4))的咖啡酸乙酯荧光探针(ED)。通过^(1)HNMR、^(13)CNMR和HRMS对其结构进行了表征。探针ED对N_(2)H_(4)具有高选择和高灵敏性识别,检测极限为0.31μmol/L,最适pH范围为3~8,响应时间为48 s。采用HRMS和^(1)HNMR确定探针与N_(2)H_(4)的作用机理,结果表明,探针ED与N_(2)H_(4)作用后不饱和酮结构与N_(2)H_(4)反应后生成吡唑环。此外,探针ED与N_(2)H_(4)作用后,溶液颜色从无色变为黄色,可实现N_(2)H_(4)的“裸眼检测”,并成功用于水样中N_(2)H_(4)的检测。 展开更多
关键词 咖啡酸 荧光探针 水合肼 快速识别 检测试纸 功能材料
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荧光纳米微球免疫层析技术检测新型冠状病毒研究
5
作者 陈艳 丁旭 +6 位作者 李朝阳 邹明强 殷宏 齐小花 薛强 罗雁非 金涌 《质量安全与检验检测》 2023年第5期72-76,共5页
采用碳二亚胺(EDC)法将抗新冠病毒核衣壳蛋白(N蛋白)单克隆抗体与稀土铕荧光纳米微球共价偶联,合成荧光标记免疫探针,并用透射电子显微镜进行表征。开发了一种检测新型冠状病毒的荧光免疫检测试纸条,通过荧光检测仪测定检测线上的荧光强... 采用碳二亚胺(EDC)法将抗新冠病毒核衣壳蛋白(N蛋白)单克隆抗体与稀土铕荧光纳米微球共价偶联,合成荧光标记免疫探针,并用透射电子显微镜进行表征。开发了一种检测新型冠状病毒的荧光免疫检测试纸条,通过荧光检测仪测定检测线上的荧光强度,建立了定量检测新冠病毒的荧光免疫检测技术。本研究研制的新冠病毒荧光免疫层析试纸条,与荧光检测仪配套使用,对新冠病毒N蛋白的最低检出限达到0.01 ng/mL;对新冠病毒检测特异性强,与肺炎支原体、禽流感病毒等其它呼吸道肺炎病原物无交叉反应;对新冠灭活病毒的检测,用本研究开发的荧光免疫试纸条技术与荧光定量PCR进行比对验证,灵敏度为荧光定量PCR的1/100;与胶体金抗原检测试纸条相比较,比胶体金试纸条灵敏10倍以上。本研究开发的新冠病毒荧光检测试纸条,操作简便、快速、灵敏、成本低、体积小,适于现场快速检测。 展开更多
关键词 稀土铕荧光纳米微球 新型冠状病毒 荧光免疫试纸条 现场快速检测
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量子点掺杂荧光凝胶标准试纸条研制及荧光免疫分析仪校准应用
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作者 陶晴 王乐乐 +3 位作者 彭涛 李兰英 刘刚 闻艳丽 《计量学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期1919-1924,共6页
利用微流控技术和量子点技术,将量子点与PDMS均匀混合并压入毛细管中固化成型,研制成量子点掺杂荧光凝胶标准试纸条。通过对量子点浓度的控制,制备了高、中、低共3种荧光强度的荧光凝胶标准试纸条,并对试纸条的光漂白性、均匀性、稳定... 利用微流控技术和量子点技术,将量子点与PDMS均匀混合并压入毛细管中固化成型,研制成量子点掺杂荧光凝胶标准试纸条。通过对量子点浓度的控制,制备了高、中、低共3种荧光强度的荧光凝胶标准试纸条,并对试纸条的光漂白性、均匀性、稳定性等方面进行了考察,评估了不确定度。结果表明该荧光凝胶标准试纸条具有良好的抗光漂白性、均匀性,可在室温避光下稳定保存180天。通过对多家荧光免疫分析仪进行校准实验,证明了该荧光凝胶试纸条具有良好的适用性,为荧光免疫分析仪的校准提供了可靠的参考依据。 展开更多
关键词 计量学 荧光凝胶标准试纸条 荧光免疫分析仪 量子点掺杂 微流控技术
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荧光免疫层析法汗液CRP快速检测试纸条的研发及不同保存条件对汗液CRP的影响
7
作者 顾芳艳 胡琛光 +6 位作者 李锦 彭薇 檀旭东 桑培培 周红辉 田亚平 张蔓丽 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2023年第10期1123-1127,1171,共6页
背景研究发现人体汗液C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)与炎症有一定关联,但国内外未见关于汗液CRP快速检测和保存条件的研究。目的利用荧光免疫层析技术研发一种快速半定量检测汗液CRP含量的试纸条并探讨人体汗液不同保存条件下CRP... 背景研究发现人体汗液C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)与炎症有一定关联,但国内外未见关于汗液CRP快速检测和保存条件的研究。目的利用荧光免疫层析技术研发一种快速半定量检测汗液CRP含量的试纸条并探讨人体汗液不同保存条件下CRP的变化。方法利用双抗体夹心法研发汗液CRP试纸;于2021年5月24日7:00-16:00收集54例青年男性野外徒步50 km状态下的汗液,利用试纸条检测汗液CRP浓度并确定正常参考范围。取其中10例CRP相对高值汗液样本,设置不同保存温度和时间分别检测汗液CRP浓度变化。结果CRP抗原标准品和T/C值的标准曲线方程为Y=(7.5362+0.0105)/[1+(X/2186.5735)^(-0.7549)]-0.0105,R2值为0.9999;空白限(LoB)为1.94 ng/mL;检出限(LoD)为5.94 ng/mL;用相对偏差的绝对值验证准确度,结果均<10%;该测定结果与血清淀粉样蛋白A和降钙素原的交叉反应率分别为0和0.01%;重复性和实验室内精密度均<10%;目标青年男性人群汗液CRP正常参考范围为≤25 ng/mL;不同温度(4℃、25℃、37℃)条件下汗液保存1 h,CRP检测结果差异无统计学意义;保存3 h后,4℃和25℃条件下CRP浓度显著下降,37℃条件下浓度变化不显著。结论荧光免疫层析法快速半定量检测人汗液CRP的试纸条具有较好的准确度、特异性、重复性、实验室内精密度,应扩大样本量进一步研究,未来或可用于人汗液CRP含量快速检测。 展开更多
关键词 汗液 C反应蛋白 快速检测 荧光免疫层析法 试纸条
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两种基于重组酶介导扩增技术的沙门氏菌检测方法比较 被引量:6
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作者 张雅薇 林碧莲 +2 位作者 张芳 傅德江 韩涛 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第3期341-347,共7页
该研究旨在利用重组酶介导扩增技术建立并比较两种食品中沙门氏菌快速检测方法。根据沙门氏菌菌毛蛋白fimY基因设计引物和探针,分别采用荧光法和侧向流试纸条法对扩增产物进行检测,构建重组酶介导等温核酸扩增方法,验证两种方法的特异... 该研究旨在利用重组酶介导扩增技术建立并比较两种食品中沙门氏菌快速检测方法。根据沙门氏菌菌毛蛋白fimY基因设计引物和探针,分别采用荧光法和侧向流试纸条法对扩增产物进行检测,构建重组酶介导等温核酸扩增方法,验证两种方法的特异性、灵敏度及对人工污染样品的检测效果。该研究构建的两种方法均在39℃下恒温运行,检测时间30~40 min,方法特异性良好,与大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌等常见的其他食源性致病菌无交叉反应,侧向流试纸条法灵敏度可达到1 pg/μL,荧光法灵敏度为10 pg/μL,对人工污染样品的检测结果与传统分离培养法检测结果一致。因此该研究建立了两种快速、特异、灵敏的方法用于检测沙门氏菌,为食品中沙门氏菌污染的快速筛查提供一定的参考价值和数据支撑。 展开更多
关键词 重组酶介导扩增 侧向流试纸条 荧光法 快速检测 沙门氏菌
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牛布鲁氏菌抗体荧光快速检测试纸卡的研制 被引量:3
9
作者 王英超 赵荣茂 +7 位作者 张慧莹 刘海莹 高晓龙 高敏 郑博君 周德刚 梅力 冯小宇 《中国动物检疫》 CAS 2023年第2期125-130,152,共7页
为研制一种快速检测牛布鲁氏菌抗体的便捷试纸卡,采用间接荧光免疫层析技术,以荧光微球为标记物,与兔抗牛IgG偶联,以布鲁氏菌脂多糖(LPS)抗原包被硝酸纤维素膜,通过反应条件优化,研制牛布鲁氏菌抗体荧光微球快速检测试纸卡。结果显示:... 为研制一种快速检测牛布鲁氏菌抗体的便捷试纸卡,采用间接荧光免疫层析技术,以荧光微球为标记物,与兔抗牛IgG偶联,以布鲁氏菌脂多糖(LPS)抗原包被硝酸纤维素膜,通过反应条件优化,研制牛布鲁氏菌抗体荧光微球快速检测试纸卡。结果显示:该试纸卡灵敏度可达0.8 IU/mL,与牛口蹄疫病毒O型、牛口蹄疫病毒A型、牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒的抗体阳性血清均无交叉反应;对469份临床牛血清进行检测,同时与荧光偏振方法进行比较,发现两种方法的符合率为100%。结果表明,本次研制的牛布鲁氏菌抗体荧光微球检测试纸卡灵敏度高,特异性好,适用于临床样品的快速检测。本试纸卡的成功研制为牛布鲁氏菌病免疫效果评估和准确诊断提供了一种简便的血清学诊断方法。 展开更多
关键词 牛布鲁氏菌 荧光免疫层析技术 试纸卡 荧光微球 脂多糖抗原
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席夫碱荧光探针的合成及其对三价金属的识别 被引量:7
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作者 聂梅 汤静洁 +3 位作者 黎鹏 温慈恩 秦健南 黄冬婷 《化学试剂》 CAS 北大核心 2023年第5期136-141,共6页
Al ^(3+)、Cr ^(3+)、Fe ^(3+)、Ce ^(3+)对环境和生物体有重要影响,能同时检测这4种三价金属离子的荧光探针较为少见。以2-氨基蒽和对苯基苯甲醛制备了一种席夫碱类荧光探针Ⅰ,通过1HNMR、HRMS和元素分析对其结构进行了表征。光谱分析... Al ^(3+)、Cr ^(3+)、Fe ^(3+)、Ce ^(3+)对环境和生物体有重要影响,能同时检测这4种三价金属离子的荧光探针较为少见。以2-氨基蒽和对苯基苯甲醛制备了一种席夫碱类荧光探针Ⅰ,通过1HNMR、HRMS和元素分析对其结构进行了表征。光谱分析实验结果表明,探针Ⅰ在四氢呋喃/水(V(THF)∶V(水)=1∶1)溶液中对三价金属Al ^(3+)、Cr ^(3+)、Fe ^(3+)和Ce ^(3+)具有较强荧光响应,有较高选择性和快速响应,且不受其他金属离子或阴离子影响,抗干扰能力强,检测的最适pH范围为5~9。结合高分辨质谱检测、紫外测试和理论计算,证实探针与三价金属的作用机理为:探针与三价金属作用后,分解生成2-氨基蒽,发出荧光。进一步将荧光探针负载于试纸条,成功实现对三价金属的试纸检测。 展开更多
关键词 2-氨基蒽 席夫碱 荧光探针 三价金属离子 试纸检测
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基于分子模拟优化筛选甲磺隆特异性多肽
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作者 尚华 赵雷兴 +1 位作者 秦月 刘冰 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2023年第1期28-33,共6页
该研究通过分子模拟技术优化筛选甲磺隆的高特异性多肽,并应用量子点荧光淬灭免疫层析试纸条验证模拟筛选结果。运行CDOCKER程序对乙酰乳酸合成酶晶体结构与甲磺隆分子进行对接,结合蛋白中对甲磺隆的活性空腔结构和受配体相互作用的关... 该研究通过分子模拟技术优化筛选甲磺隆的高特异性多肽,并应用量子点荧光淬灭免疫层析试纸条验证模拟筛选结果。运行CDOCKER程序对乙酰乳酸合成酶晶体结构与甲磺隆分子进行对接,结合蛋白中对甲磺隆的活性空腔结构和受配体相互作用的关键氨基酸设计多肽。运行虚拟氨基酸突变对所有多肽进一步优化并建库。根据结合能初步筛选出S1、S2和S3三条多肽,应用试纸条方法进一步验证3条多肽可成功识别甲磺隆目标物并筛选出S1为最优序列,试验结果与模拟结果一致性良好。 展开更多
关键词 甲磺隆 分子模拟 分子对接 虚拟氨基酸突变 荧光淬灭免疫层析试纸条
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Fluorescence strip sensor for sensitive determination of prometryn in foods
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作者 Weifang Gu Steven Suryoprabowo +3 位作者 Lingling Guo Aihong Wu Liqiang Liu Chuanlai Xu 《One Health Advances》 2023年第1期268-275,共8页
We report the development of a sensitive,fast,and simple method for the detection of prometryn(PRO)in potato and celery using a lateral flow immunochromatographic assay(LFIA).A monoclonal antibody(mAb)against PRO was ... We report the development of a sensitive,fast,and simple method for the detection of prometryn(PRO)in potato and celery using a lateral flow immunochromatographic assay(LFIA).A monoclonal antibody(mAb)against PRO was prepared under optimized conditions,and the 50%inhibition concentration(IC50)for use in ELISA was determined to be 0.6 ng mL−1.Moreover,the cut-off value for use in an LFIA was 50 ng mL−1.To validate the reliability of the developed LFIA strip,real samples were used,and the recovery rate was found to be 99.3-104.3%.The assays were completed within 8 min,demonstrating the suitability of our developed methods for the detection of PRO in potato and celery. 展开更多
关键词 fluorescence immunochromatographic test Monoclonal antibody PROMETRYN strip test
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基于荧光硅球的克伦特罗快速定量免疫层析试纸条的研制 被引量:16
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作者 李怀明 赖卫华 +5 位作者 许恒毅 徐波 罗薇 魏华 王水兴 熊勇华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1647-1652,共6页
采用荧光硅球为标记物制备了快速定量检测克伦特罗(CLE)的荧光硅球免疫层析试纸条。通过正交实验得到最优荧光硅球抗体标记量、硅球垫抗体标记物用量以及检测线抗原浓度。在最优条件下,试纸条线性范围为0.28-3.3μg/L。猪尿样品CL... 采用荧光硅球为标记物制备了快速定量检测克伦特罗(CLE)的荧光硅球免疫层析试纸条。通过正交实验得到最优荧光硅球抗体标记量、硅球垫抗体标记物用量以及检测线抗原浓度。在最优条件下,试纸条线性范围为0.28-3.3μg/L。猪尿样品CLE加标回收率为81.7%~101%,表明此试纸条可实现猪尿中CLE残留的快速定量检测。 展开更多
关键词 荧光硅球 定量检测 克伦特罗 试纸条
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大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制 被引量:14
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作者 解泉源 赖卫华 +6 位作者 刘春梅 孙吉昌 邓省亮 刘成伟 魏华 游兴勇 熊勇华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期353-357,共5页
目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双... 目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条。结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果。制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157:H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL。试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应。结论:大肠杆菌O157:H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 H7 荧光微球 免疫层析法 试纸条
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水质在线监测技术研究及应用 被引量:10
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作者 项光宏 闻路红 +2 位作者 王静 韩双来 王健 《控制工程》 CSCD 北大核心 2010年第S1期111-113,共3页
为了满足水质在线监测应用需求,研究建立了全谱法水质分析、在线顺序注射分析、无汞伏安溶出分析、发光细菌法综合毒性分析等多种技术平台,基于上述技术平台开发了一些了水质在线分析仪表,形成完整的产品组合,并成功应用于污染源排放废... 为了满足水质在线监测应用需求,研究建立了全谱法水质分析、在线顺序注射分析、无汞伏安溶出分析、发光细菌法综合毒性分析等多种技术平台,基于上述技术平台开发了一些了水质在线分析仪表,形成完整的产品组合,并成功应用于污染源排放废水、地表水、饮用水、工业过程水等多个领域的水质在线连续监测。 展开更多
关键词 水质 在线监测 顺序注射 荧光 伏安溶出
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西马特罗分子印迹荧光检测试纸条的研制 被引量:5
16
作者 张连明 黄小云 +3 位作者 张英明 李建平 张兰 曾英 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1477-1481,共5页
将分子印迹技术良好的选择性与试纸条快速检测的特点相结合,研制了一种快速检测西马特罗的分子印迹试纸条。以西马特罗为模板分子,化学聚合法制备西马特罗分子印迹聚合物,将其附着在硝酸纤维素膜上。洗脱模板分子后,裁剪压制得到分子印... 将分子印迹技术良好的选择性与试纸条快速检测的特点相结合,研制了一种快速检测西马特罗的分子印迹试纸条。以西马特罗为模板分子,化学聚合法制备西马特罗分子印迹聚合物,将其附着在硝酸纤维素膜上。洗脱模板分子后,裁剪压制得到分子印迹试纸条。试纸条识别样品中西马特罗后,滴加荧光物质曙红Y,根据反应区内西马特罗与曙红Y反应后荧光猝灭程度对西马特罗进行分析。研究结果表明,在0.01~100μg/m L浓度范围内,荧光猝灭程度随着西马特罗浓度的增加而增大,最低检测浓度为0.01μg/m L。此试纸条制备简单,操作简便,可用于现场检测。将其用于猪肉和饲料样品中西马特罗的快速测定,结果令人满意。 展开更多
关键词 试纸条 分子印迹 西马特罗 荧光 曙红Y
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克伦特罗荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究 被引量:10
17
作者 李静宇 何小维 +2 位作者 刘晓云 李文美 邓建超 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第10期2606-2611,共6页
本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,为实现其产业化应用奠定基础。采用荧光胶乳微粒为标记物,以抗原包被浓度、膜干燥时间、混匀反应时间、反应温度及层析时间为单因素优化制备了CLB... 本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,为实现其产业化应用奠定基础。采用荧光胶乳微粒为标记物,以抗原包被浓度、膜干燥时间、混匀反应时间、反应温度及层析时间为单因素优化制备了CLB荧光免疫层析试纸条,并对该试纸条的检测限、特异性、临床准确度及添加回收率、精密度和稳定性进行了评价。最佳制备条件:抗原包被浓度2.0mg/mL,膜干燥时间5d,混匀反应时间1min,反应温度25℃,层析时间15min。评价结果显示,试纸条检测限可达0.35μg/L;CLB与其他8种同类药物交叉反应率均小于0.8%,特异性良好;各批添加回收率在80%-120%之间,准确度达到要求;不同CLB浓度下变异系数(CV)均小于5%,符合精密度标准;此外,稳定性试验验证了该试纸条稳定性良好。 展开更多
关键词 克伦特罗 荧光免疫层析法 试纸条 快速检测
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3种β_2-受体激动剂荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究 被引量:9
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作者 李丹妮 黄华 +2 位作者 张婧 王学生 顾依雯 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第8期2437-2442,共6页
本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)、莱克多巴胺(ractopamine,RAC)和沙丁胺醇(salbutamol,SAL)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符... 本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)、莱克多巴胺(ractopamine,RAC)和沙丁胺醇(salbutamol,SAL)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符合率进行评价。结果显示,克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条标准曲线范围分别为0~3.2、0~6.4、0~8.0μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条检测下限分别可达0.2、0.4和0.5μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇与其他8种同类药物交叉反应均成阴性,特异性良好;各批添加回收率在60%~120%之间,准确度达到要求;不同克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇浓度下变异系数(CV)均小于15%,符合精密度标准;猪尿中假阳性率和假阴性率均为0;此外与仪器方法的符合率为100%。试纸条适用于猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺残留快速检测,具有灵敏度高、稳定性好和特异性强的特点。 展开更多
关键词 克伦特罗 莱克多巴胺 沙丁胺醇 荧光免疫层析法 试纸条 快速检测
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用于检测氯霉素类残留物的荧光免疫检测试纸条的研制 被引量:14
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作者 郭艳宏 李飞 +3 位作者 邹明强 金涌 李锦丰 陈野 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期496-498,517,共4页
利用反相微乳技术合成了稀土铕-S iO2纳米颗粒,用其与氯霉素单克隆抗体结合制备氯霉素类残留物免疫检测探针,并制备免疫层析试纸条,用于牛奶中氯霉素和氯霉素琥珀酸盐同步检测,简便快速,30 m in内出结果。与甲砜霉素、庆大霉素、磺胺二... 利用反相微乳技术合成了稀土铕-S iO2纳米颗粒,用其与氯霉素单克隆抗体结合制备氯霉素类残留物免疫检测探针,并制备免疫层析试纸条,用于牛奶中氯霉素和氯霉素琥珀酸盐同步检测,简便快速,30 m in内出结果。与甲砜霉素、庆大霉素、磺胺二甲基嘧啶之间无交叉反应,特异性好,未发现非特异性吸附问题。 展开更多
关键词 稀土铕-SiO2纳米颗粒 免疫检测探针 免疫层析试纸条 氯霉素 氯霉素琥珀酸盐
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猪流行性腹泻病毒时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立 被引量:7
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作者 王华俊 赵雪丽 +5 位作者 闫若潜 谢彩华 刘光辉 马震原 王淑娟 房大学 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期40-45,共6页
为建立一种快速、定量检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)时间分辨荧光免疫层析检测方法(TRFIA),本研究采用杂交瘤技术制备了抗PEDV N蛋白特异性单克隆抗体(MAb)5E6和1B7,将MAb 5E6与荧光微球偶联包被结合垫,将MAb 1B7和兔抗鼠IgG抗体分别包被... 为建立一种快速、定量检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)时间分辨荧光免疫层析检测方法(TRFIA),本研究采用杂交瘤技术制备了抗PEDV N蛋白特异性单克隆抗体(MAb)5E6和1B7,将MAb 5E6与荧光微球偶联包被结合垫,将MAb 1B7和兔抗鼠IgG抗体分别包被硝酸纤维素膜作为检测线和质控线制备PEDV荧光微球免疫层析试纸条。优化了标记MAb 5E6、包被MAb 1B7的反应条件,并对其性能进行评价。结果显示,10μL 1%浓度的荧光微球标记MAb 5E6的量为18μg,MAb 1B7的包被浓度为1.2 mg/mL,最佳检测时间为点样后15 min;该方法与CSFV、PRRSV、TGEV、PDCoV及PRV Batha-K61株等均无交叉反应,特异性强;对PEDV的检测下限为389699.7 TCID50/0.1 mL,敏感性较高;对PEDV检测的线性范围为24940778.9 TCID50/0.1 mL~389699.7 TCID50/0.1 mL,线性范围较宽;批内和批间变异系数分别为8.76%、10.53%,重复性较好;试纸条在4℃和室温至少保存8个月,37℃则可保存10d,稳定性较好。该TRFIA试纸条与PEDV荧光定量PCR(FQ-PCR)平行检测160份疑似发病猪肛门拭子或小肠内容物样品。结果显示,该试纸条检测出76份阳性样品,84份阴性样品;FQ-PCR法检测出81份阳性样品,79份阴性样品,二者的总符合率为90.63%;经SPSS 22统计软件分析结果显示,K值为0.813,二者检测结果的一致性较高。本研究建立了一种简单、快速、灵敏和特异的基于MAb的TRFIA,为PEDV的现场检测提供了一种新方法。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 荧光微球免疫层析 单克隆抗体 试纸条
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