海珠益肝加味方对自身免疫性肝炎小鼠Th17/Treg平衡与FoxP3/RORγt的影响

目的:研究海珠益肝加味方对自身免疫性肝炎(AIH)小鼠辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞失衡与维甲酸相关孤核受体γ(ROR-γt)、特异性叉头状转录因子3(FoxP3)的影响。方法:将32只小鼠随机分为正常组、模型组、海珠益肝加味方组、醋酸泼尼松组,每组8只。除正常组外其他组采用刀豆蛋白A(ConA)尾静脉注射制备AIH小鼠模型,造模后采集各组小鼠血液及肝组织。HE染色观察各组肝组织病理表现;采用流式细胞术检测各组Th17和Treg细胞比例。Western Blot检测各组小鼠肝组织中IL-10、IL-17、TGF-β1、FoxP3、ROR-γt蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组Th17细胞比例、Th17/Treg均显著上升(P<0.01),Treg细胞比例显著下降(P<0.01);与模型组比较,海珠益肝加味方组及醋酸泼尼松组Th17细胞比例、Th17/Treg均显著降低(P<0.01),Treg细胞比例显著上升(P<0.01)。与空白组比较,模型组IL-10、FoxP3蛋白表达下降,IL-17、TGF-β1、ROR-γt蛋白表达上升(P<0.01)。与模型组相比,海珠益肝加味方及醋酸泼尼松组IL-10、FoxP3表达显著上升,IL-17、TGF-β1、RORγt蛋白表达均显著下降(P<0.01)。结论:海珠益肝加味方可以有效改善Th17/Treg失衡,其机制可能与调节特异性转录因子FoxP3、ROR-γt的表达相关。

慢性阻塞性肺疾病的炎症反应与Foxp3、T-bet、GATA3表达失衡有关

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠调节性T细胞(Treg)、叉头状转录因子3(Foxp3)、T-bet、GATA连接蛋白3(GATA3)的变化。方法将30只大鼠随机分为对照组、模型组,每组15只。模型组大鼠采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入方法建立COPD模型。模型复制成功第28天,采用ELISA检测大鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)白介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)水平,流式细胞术检测外周血Treg表达,分别采用逆转录PCR及Western blot法检测肺组织Foxp3、T-bet、GATA3mRNA和蛋白表达。结果模型组大鼠肺泡腔及肺间质内大量炎性细胞浸润,肺组织结构破坏。与对照组比较,模型组大鼠血清IFN-γ表达升高(P<0.01),IL-4、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg降低(P<0.05);模型组Foxp3、GATA-3mRNA、蛋白表达降低,T-bet mRNA和蛋白升高(P<0.01)。相关性分析显示,T-bet、GATA-3、Foxp3基因和蛋白表达与IL-4、IFN-γ分泌相关(P<0.05)。结论 COPD炎症反应与T-bet、GATA-3、Foxp3表达失衡有一定关系。

哮喘小鼠CD4^+T细胞中microRNA-31和FOXP3 mRNA的表达及相互关系的研究

目的初步探讨哮喘CD4+T细胞中microRNA-31和FOXP3的表达水平、两者的相关性及激素对它们的影响。方法以卵蛋白(OVA)致敏激发建立哮喘小鼠模型。将15只BALB/c小鼠分为正常对照组、OVA组和地塞米松组,ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4和IFN-γ水平;实时荧光定量PCR检测小鼠脾脏CD4+T细胞的microRNA-31和FOXP3 mRNA的水平,并分析二者之间的相关性。结果 OVA组BALF中IL-4水平高于正常对照组[(228.29±66.18)pg/ml vs(66.63±17.33)pg/ml,P<0.05],地塞米松组BALF中IL-4水平与正常对照组或OVA组相比,无统计学差异。各组间IFN-γ无统计学差异。OVA组CD4+T细胞中FOXP3 mRNA为正常对照组的0.10倍(P<0.05);地塞米松组CD4+T细胞中FOXP3 mRNA为OVA组的3.75倍(P<0.05);正常对照组与地塞米松组之间FOXP3mRNA无统计学差异。OVA组的microRNA-31为正常对照组4.79倍(P<0.05);地塞米松组的microRNA-31为正常对照组4.85倍(P<0.05);OVA组microRNA-31水平和地塞米松组相比无统计学差异。microRNA-31和FOXP3 mRNA的Pearson相关系数为-0.609(P<0.05)。结论哮喘中microRNA-31和FOXP3 mRNA具有相关性。microRNA-31与地塞米松可能通过不同的途径调节CD4+T细胞中FOXP3 mRNA的表达。

Pgp1和FoxP3在结直肠癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨P-糖蛋白1(Pgp1)和核转录因子蛋白3(FoxP3)在结直肠癌中的表达及其与预后的关系。方法选取2012年2月至2015年2月我院保存的结直肠癌标本106例,同时选取癌旁组织标本64例作为对照,采用免疫组化染色法检测Pgp1和FoxP3表达,同时根据Pgp1和FoxP3表达情况将患者分为Pgp1和FoxP3双阴性表达(A组),Pgp1单阳性表达(B组)、FoxP3单阳性表达(C组),Pgp1和FoxP3双阳性表达(D组)。结果结直肠癌组织Pgp1和FoxP3蛋白阳性表达率分别为63.21%和43.40%,明显高于癌旁组织(P<0.05);结肠癌Pgp1蛋白阳性表达率为78.95%,明显高于直肠癌(P<0.05);FoxP3表达与患者临床病理特征以及治疗方案无明显关系(P>0.05);B组中位总体生存时间为52个月(95%CI:40.01～63.99),明显高于A组、D组和C组(P<0.05);A组和D组中位总体生存时间为40个月(95%CI:31.20～48.80)和34个月(95%CI:30.74～37.26),明显高于C组的24个月(95%CI:18.56～29.44),比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Pgp1和FoxP3表达与结直肠癌临床病理特征关系较弱,其中仅Pgp1表达与肿瘤位置有一定相关性;Pgp1和FoxP3表达与结直肠癌患者预后有一定关系,其中Pgp1阳性表达,FoxP3阴性表达者预后较好。

子痫前期患者蜕膜中CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞的Foxp3表达

目的初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞在子痫前期患者胎盘附着处蜕膜中表达及其临床意义。方法选择子痫前期30例和正常晚期妊娠30例,采用免疫组化法检测蜕膜CD4+CD25+调节性T细胞的特异性转录因子Foxp3的阳性表达率,分析比较两组检测结果。结果蜕膜中Foxp3在子痫病例组及正常对照组的阳性表达率分别为16.67%和66.67%,子痫病例组Foxp3阳性表达率明显低于正常对照组(P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞的特异性转录因子Foxp3在子痫前期患者蜕膜组织中阳性表达率减低,其免疫抑制功能减弱,从而使母胎免疫耐受失衡、受损,免疫排斥作用增强,导致子痫前期的发生。

Tubacin上调小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞Foxp3表达并增强其抑制功能

目的分析组蛋白去乙酰化酶6抑制剂(HDAC6i)tubacin在体外对调节性T细胞(Treg)的叉状头转录因子3(Foxp3)表达的影响,并鉴定经tubacin处理后的Treg的免疫生物学特性。方法用磁珠双阳性分选的方法从C57BL/6J小鼠脾脏细胞中获得CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞,应用tubacin对天然型Treg(n Treg)及转化生长因子β1(TGF-β1)诱导分化的诱导型Treg(i Treg)进行诱导培育,鉴定各群细胞Foxp3的表达状况,并通过混合淋巴细胞培养(MLC)实验分析各群细胞的免疫抑制活性及相关机制。结果小鼠n Treg及i Treg经tubacin孵化后Foxp3表达均明显增强,通过MLC实验证实,n Treg及i Treg经tubacin培养诱导后可获得更强的免疫抑制活性,能显著抑制同基因CD4+CD25-T细胞的活化。结论组蛋白去乙酰化酶6抑制剂tubacin可上调CD4+CD25+Treg的Foxp3表达,并增强其细胞免疫抑制活性。

孕晚期胎膜早破孕妇阴道内菌群变化、外周血单个核细胞FoxP3、STAT5表达及妊娠结局

目的:孕晚期胎膜早破(PROM)孕妇阴道内菌群变化、外周血单个核细胞叉头翼状螺旋转录因子3(FoxP3)、信号转导与转录激活因子5(STAT5)表达及其妊娠结局分析。方法:收集2020年6月-2021年12月本院收治的PROM孕妇(PROM组)123例和正常妊娠晚期孕妇(对照组)120例临床资料,检测分娩前阴道分泌物微生物分布,外周血单个核细胞FoxP3、STAT5 mRNA表达水平及血清IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10水平,分析两组阴道菌群分布与FoxP3、STAT5 mRNA表达水平的差异。结果:PROM组乳酸杆菌患者占比(51.2%)低于对照组(75.0%),革兰阳性杆菌(15.5%)、革兰阳性球菌(13.0%)、溶血性葡萄球菌(21.1%)、粪肠球菌(25.2%)、阴沟肠杆菌(17.9%)占比高于对照组(6.7%、5.0%、8.3%、10.0%、7.5%),外周血单个核细胞FoxP3(0.78±0.12)、STAT5 mRNA(1.04±0.22)表达水平均低于对照组(1.26±0.34、1.75±0.42)(均P<0.05);与对照组比较,PROM组血清IFN-γ、IL-12水平升高,IL-4、IL-10水平降低,且PROM组阴道微生态失调孕妇外周血单个核细胞FoxP3、STAT5 mRNA表达水平低于阴道微生态正常孕妇,妊娠结局不良者外周血单个核细胞FoxP3、STAT5 mRNA表达水平低于妊娠结局良好者(均P<0.05)。结论:PROM患者外周血单个核细胞FoxP3、STAT5 mRNA表达水平降低,与患者阴道内菌群变化和妊娠结局有关,可能是PROM发生的相关机制。

微小RNA-708靶向调控FOXO3表达及对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的探讨微小RNA-708(miR-708)对叉头转录因子O亚型3(FOXO3)表达的靶向调控作用及对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用脂质体法向NSCLC细胞A549转染miR-708抑制剂(Inhibitor组)和阴性对照(NC组),并设空白对照组。采用实时定量PCR(QPCR)检测miR-708水平以评估转染效率,分别采用MTT法、细胞划痕实验和侵袭实验检测A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-708对FOXO3的靶向关系,采用QPCR检测FOXO3 mRNA水平。结果Inhibitor组的miR-708水平为0.241±0.057,低于空白对照组的1.027±0.121和NC组的1.186±0.254(P<0.05);与空白对照组和NC组相比,Inhibitor组转染后24~48 h时的细胞增殖活力降低(P<0.05);Inhibitor组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(33.24±1.98)%和(202.9±8.4)个,均低于空白对照组的(54.23±2.16)%和(352.7±12.5)个及NC组的(55.63±2.78)%和(361.2±13.7)个,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-708模拟物可抑制野生型FOXO3 3’端非翻译区的荧光素酶活性,而不影响突变型。QPCR结果显示,Inhibitor组的FOXO3 mRNA水平高于空白对照组和NC组(P<0.05)。结论下调miR-708水平可抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能通过靶向FOXO3来发挥促癌作用,有望成为NSCLC防治的潜在靶点。

MicroRNA-155调控Th17/Treg平衡的研究进展

微RNA(miRNA)是真核生物中的一种小的内源性非编码蛋白质小分子RNA,它在细胞的分化中起着重要作用。在众多的miRNAs中,miR-155与免疫调控的关系最为密切。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)是介导适应性免疫应答的两个T细胞亚群,两者之间相互调节共同发挥免疫效能。miR-155可通过调节Th17、Treg等炎性T细胞的增殖、分化与发育而介导自身免疫炎症反应,并可调节机体的细胞因子的分泌来调控Th17/Treg的平衡。

应用iDC从G-CSF动员的外周血中诱导产生CD4^＋CD25^＋调节性T细胞

目的探讨在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血单个核细胞(PBMC)中诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的可行性及其表型和功能。方法收集G-CSF动员和未动员的BALB/c♀鼠的PBMC,采用磁活性标记的细胞分选法(MACS)分选BALB/c♀鼠的CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+T细胞及C57BL/6♂鼠的CD11c+未成熟树突细胞(iDC),建立细胞培养体系,经iDC体外诱导G-CSF动员和未动员的CD4+CD25-T细胞转换为CD4+CD25+Treg细胞(iTreg)。分别应用流式细胞术、混合淋巴细胞反应技术检测诱导后细胞的CD25、Foxp3的表达水平以及抑制功能,比较G-CSF动员与非动员组间iTreg的表型和抑制功能的差异。结果 iDC诱导G-CSF未动员和动员的组间CD25+分子表达率分别为(76.8±4.1)%和(90.4±5.3)%,差异有统计学意义(P<0.01);两组诱导产生的CD25+T细胞的Foxp3表达水平分别为(64.1±2.7)%和(59.5±3.2)%,差异有统计学意义(P<0.05)。iDC诱导G-CSF未动员和动员的外周血产生的iCD4+CD25+Treg均表现出免疫抑制功能,其中动员后诱导生成的iTreg的免疫抑制效应明显增强。结论应用iDC从G-CSF动员的外周血中诱导产生的iCD4+CD25+Treg具有更强的体外抑制效应,为自身免疫性疾病的治疗提供新的思路和手段。

免疫浸润相关基因mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中的表达及其与预后的关系

目的探讨免疫浸润相关基因mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中的表达水平及其与预后的关系。方法选取延安大学附属医院2017年1月至2019年1月宫颈癌患者74例作为宫颈癌变组,宫颈癌前病变患者74例作为宫颈癌前病变组,另选取同期因子宫肌瘤行子宫切除术患者74例作为宫颈正常组,比较3组免疫浸润相关基因[人类白细胞抗原G(HLA-G)、叉状头螺旋转录因子3(FOXP3)、T细胞免疫球蛋白粘连蛋白-3(TIM-3)]、恶性生物学行为相关基因[侵袭基因p21-活化的激酶6(PAK-6)、zeste 2多梳抑制复合物2亚基增强子(EZH2)、增殖基因血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、同源盒基因B7(HOXB7)]的mRNA相对表达量,分析免疫浸润相关基因与宫颈癌发生及宫颈癌恶性生物学行为的关系,并统计对比不同免疫浸润相关基因表达水平患者3年生存率。结果HLA-G、FOXP3、TIM-3 mRNA相对表达量为宫颈癌变组>宫颈癌前病变组>宫颈正常组(P<0.05);不同临床分期、分化程度,以及有无淋巴结转移、有无脉管浸润患者的HLA-G、FOXP3、TIM-3、PAK-6、EZH2、ANGPTL4、HOXB7 mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA高表达患者宫颈癌前病变进展至宫颈癌的风险分别是低表达患者的3.005倍、4.654倍、3.343倍;宫颈癌患者HLA-G、FOXP3、TIM-3 mRNA与侵袭相关基因PAK-6、EZH2 mRNA、增殖相关基因ANGPTL4、HOXB7的mRNA表达呈正相关(P<0.05);随访3年,失访2例,72例宫颈癌患者3年生存率为68.06%(49/72),HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA高表达患者3年生存率均低于低表达患者(P<0.05)。结论免疫浸润相关基因HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中呈上调表达,会显著增加宫颈癌发病风险,且与宫颈癌恶性生物学行为密切相关,还可能对生存预后产生重要影响。

TGF⁃β1对炎症状态下人牙周膜成纤维细胞的调控作用

目的探讨转化生长因子⁃β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖(lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg⁃LPS)刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs)的调控作用。方法获取hPDLFs并进行免疫组化鉴定,通过qRT⁃PCR与CCK⁃8确定Pg⁃LPS的刺激浓度。将hPDLFs分成4组:空白对照组,单纯100μg/mL Pg⁃LPS;低浓度组,1 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;中浓度组,10 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;高浓度组100 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS。CCK⁃8检测细胞增殖情况;划痕实验与Transwell小室实验检测hPDLFs细胞迁移能力;流式细胞术检测hPDLFs的细胞周期;qRT⁃PCR检测hPDLFs的转录因子叉头盒p3(forkhead/winged helix transcription⁃al factor p3,Foxp3)、白细胞介素6(interleukin⁃6,IL⁃6)及EB病毒诱导基因3(Epstein⁃Barrvirus⁃induced gene 3,EBI3)mRNA表达;Western blot检测hPDLFs的Foxp3、IL⁃6及EBI3蛋白表达。结果免疫组化鉴定显示抗波形丝蛋白阳性及抗角蛋白阴性;Pg⁃LPS浓度为100μg/mL时,hPDLFs中IL⁃6 mRNA表达相比空白对照组显著上升(P<0.0001)且细胞增殖能力下降(P<0.0001),所以选择100μg/mL Pg⁃LPS用于模拟炎症状态。10、100 ng/mL TGF⁃β1能提高炎症状态下hPDLFs的增殖能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1能促进炎症状态下hPDLFs的迁移能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可加快炎症状态下hPDLFs的细胞周期(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可抑制炎症状态下hPDLFs的IL⁃6基因和蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的EBI3基因及蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的Foxp3基因表达量,10 ng/mL TGF⁃β1可提高Foxp3蛋白表达量(P<0.05)。结论TGF⁃β1可促进炎症状态下hPDLFs的增殖及迁移能力、上调EBI3表达,可能与转录因子Foxp3表达有关。

转录因子叉状头螺旋转录因子3在斑秃患者外周血单个核细胞中的表达

目的:探讨斑秃患者外周血单个核细胞(PBMCs)中转录因子叉状头螺旋转录因子(FOXP)3蛋白的表达水平。方法 :将52例斑秃患者分为活动期组18例,稳定期组34例;局限型斑秃组41例,重型斑秃组11例。选取50例健康人作为正常对照组。采用蛋白质印迹法(WB)检测2组PBMCs中FOXP3蛋白表达水平,并进行相关性分析。结果:正常对照组PBMCs中FOXP3蛋白表达均值为1.33±0.66,斑秃患者活动期组为0.45±0.34,稳定期组为0.80±0.42,3组间比较差异有统计学意义(F=20.89,P<0.05);活动期组和稳定期组蛋白表达水平均低于正常对照组(P<0.05),斑秃活动期组低于稳定期组(P<0.05)。重型斑秃组FOXP3蛋白表达均值为0.41±0.26,局限型斑秃组为0.75±0.43,与正常对照组比较,3组蛋白表达差异有统计学意义(F=19.77,P<0.05);且重型斑秃组和局限型斑秃组均低于正常对照组(P<0.05),重型斑秃组低于局限型斑秃组(P<0.05)。斑秃患者PBMCs中FOXP3蛋白表达水平与斑秃病情的严重程度(SALT)呈负相关(r=-0.33,P<0.05)。结论:斑秃患者PBMCs中转录因子FOXP3蛋白的表达水平降低可能与斑秃的细胞免疫失调有关。

过敏性紫癜患儿外周血淋巴细胞活化基因-3、叉头样转录因子3信使核糖核酸表达与疾病严重程度的相关性分析

目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿外周血中淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)、叉头样转录因子3(Foxp3)信使核糖核酸(mRNA)水平与疾病严重程度的相关性。方法选取2018年11月—2020年11月在衢州市人民医院收治的HSP患儿106例为研究组。将患儿主要症状和次要症状作为评价指标进行积分,依据总积分值将患儿分为轻度组(41例)、中度组(34例)、重度组(31例)。同期选取与研究组年龄、性别相对应的健康儿童106例作为对照组,酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血清中LAG-3水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA水平;比较轻度组、中度组、重度组HSP症状总积分值;利用Pearson法分析血清LAG-3水平、Foxp3mRNA水平与HSP症状总积分值的相关性、LAG-3水平与Foxp3 mRNA水平的相关性。结果HSP患儿血清中LAG-3水平和外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA水平明显低于对照组(P<0.05),且随着病情程度加重,二者水平均逐渐降低(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组HSP症状总积分值依次升高,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。血清LAG-3水平与HSP症状总积分值呈负相关关系(r=-0.632,P<0.05),单个核细胞中Foxp3 mRNA水平与HSP症状总积分值呈负相关关系(r=-0.688,P<0.05),血清LAG-3水平与单个核细胞中Foxp3 mRNA水平呈正相关关系(r=0.595,P<0.05)。结论HSP患儿出现外周血血清中LAG-3水平和外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA水平降低现象,通过监测二者水平有助于评估病情严重程度。

叉头／翼状螺旋转录因子3基因多态性与溃疡性结肠炎的关系

目的在浙江籍汉族人群中探讨叉头/翼状螺旋转录因子3 （Foxp3）基因多态性与溃疡性结肠炎（UC）易感性的关系。方法收集381例UC患者和490名年龄、性别相匹配的健康对照者，采用多重SNaPshot技术检测Foxp3基因4种单核苷酸多态性（SNP） （rs3761547、rs2232365、rs2294021、rs3761548），并进行连锁不平衡和单倍型分析。结果男、女性UC组分别与男、女性对照组比较，Foxp3的4种SNP（rs3761547、rs2232365、rs2294021、rs3761548）的等位基因和基因型频率的差异均无统计学意义（P值均〉0.05）。依据疾病严重程度和累及部位分层分析。男性重度UC患者中，rs2232365、rs2294021、rs3761548的等位基因C、G、A频率均显著高于男性对照组（69.6%比34.3%，P＝0.001；69.6%比34.3%，P＝0.001；39.1%比14.4%，P＝0.002）。与女性对照组相比，女性重度UC患者中不仅rs2232365、rs2294021、rs3761548的等位基因C、G、A频率更高（51.9%比38.0%，P＝0.049；63.5%比39.2%，P＝0.001；53.8%比21.4%，P〈0.001），而且基因型（TC＋CC）、（AG＋GG）、（CA＋AA）的频率亦更高（80.8%比57.7%，P＝0.022；84.6%比58.4%，P＝0.009；76.9%比34.7%，P〈0.001）。虽然上述4种SNP彼此紧密连锁，但男、女性UC组分别与男、女性对照组比较，各单倍型频率的差异均无统计学意义（P值均〉0.05）。结论浙江籍汉族人群中Foxp3（rs2232365、rs2294021、rs3761548）基因变异可能增加重度UC发病风险。

卵泡液 FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与优质胚胎数的相关性及其预测不孕患者IVF-ET临床妊娠的效能研究

目的探讨卵泡液中叉头框转录因子O亚族1(Forkhead box transcription factor O1, FoxO1)mRNA、天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)mRNA、生长分化因子-9(growth differentiation factor-9, GDF-9)水平与优质胚胎数的相关性及其预测不孕患者体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)临床妊娠的效能。方法选取2017年2月至2020年1月期间驻马店市中心医院收治的468例接受IVF-ET治疗的不孕患者进行病例对照研究, 根据是否妊娠分为妊娠组(n=248)、未妊娠组(n=220), 比较两组一般资料、取卵日性激素水平、卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平。采用Pearson分析卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9之间及其与优质胚胎数的相关性, 采用logistic回归方程分析IVF-ET临床妊娠的相关因素并以受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9预测临床妊娠的效能。结果妊娠组优质胚胎数多于未妊娠组[(2.59±0.68)枚比(1.78±0.62)枚, P<0.001], 基础卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)水平、基础黄体生成素(luteinizing hormone, LH)水平低于未妊娠组[(7.16±0.29)U/L比(6.21±0.34)U/L, (8.72±1.24)U/L比(10.65±1.01)U/L, 均P<0.001], 取卵日雌二醇高于未妊娠组[(848.18±50.68)ng/L比(605.35±46.79)ng/L, P<0.001]。妊娠组FoxO1 mRNA、GDF-9水平高于未妊娠组, Caspase-3 mRNA水平低于未妊娠组(均P<0.001);FoxO1 mRNA与Caspase-3 mRNA呈负相关, 与GDF-9呈正相关(均P<0.001);Caspase-3 mRNA与GDF-9呈负相关(均P<0.001);FoxO1 mRNA、GDF-9与优质胚胎数呈正相关, Caspase-3 mRNA与优质胚胎数呈负相关(均P<0.001)。多元线性回归分析显示, 在排除混杂因素后, FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与优质胚胎数相关(均P<0.001)。以IVF-ET临床妊娠为因变量, 纳入优质胚胎数、基础FSH、基础LH、取卵日雌二醇、FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9为自变量进行logistic回归方程分析, 结果显示优质胚胎数、基础FSH、基础LH、取卵日雌二醇、FoxO1 mRNA、Caspase-3、GDF-9均与临床妊娠结局显著相关(均P<0.001)。FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平联合预测IVF-ET临床妊娠的曲线下面积(area under curve, AUC)值为0.891, 大于FoxO1 mRNA指标单独检测(AUC=0.796, P=0.012)。结论 FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与胚胎发育及性激素水平有关, 且FoxO1 mRNA、GDF-9水平升高, Caspase-3 mRNA水平降低有利于临床妊娠, 三者联合检测可为评价IVF-ET临床妊娠提供参考。

宫颈癌患者癌组织与癌旁组织中程序性死亡分子-1、程序性死亡分子配体-1、叉状头/翅膀状螺旋转录因子的差异表达及其临床意义

目的探讨宫颈癌患者组织中程序性死亡分子-1(PD-1)、程序性死亡分子配体-1(PD-L1)、叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FOXP3)的表达及其临床意义。方法选取2018年6月-2020年1月本院收治的330例宫颈癌患者为研究对象,采用免疫组化法测定其癌组织及癌旁组织中PD-1、PD-L1、FOXP3表达情况,分析癌组织中PD-1、PD-L1、调节性T淋巴细胞FOXP3表达率与患者临床特征的相关性。结果宫颈癌组织中PD-1、PD-L1、调节性T淋巴细胞FOXP3阳性率均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组织中PD-1、PD-L1阳性率与患者国际妇产科联合会(FIGO)分期、分化程度、宫旁浸润、淋巴血管间隙侵犯及淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、肿瘤直径、HPV分型无关(P>0.05)。FOXP3阳性率与FIGO分期、分化程度、宫旁浸润、淋巴血管间隙侵犯相关(P<0.05),与年龄、肿瘤直径、HPV分型、淋巴结转移无关(P>0.05)。结论宫颈癌患者癌组织中存在PD-1、PD-L1、调节性T淋巴细胞FOXP3的高表达,且其表达水平与宫颈癌患者疾病分期、浸润与转移密切相关。