微小RNA在叉头转录因子M_1激活非小细胞肺癌上皮向间质转化中的作用

目的:探讨微小RNA(microRNA)在叉头转录因子M_1(Fox M_1)激活非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞上皮向间质转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)中的作用。方法:将Fox M_1过表达质粒,Fox M_1-shRNA,miR-539、miR-485-5p模拟物及其抑制物转染至人NSCLC细胞株中,应用Western印迹和real-time PCR检测细胞株中Fox M_1蛋白和mRNA及miR-539、miR-485-5p的表达。同时应用CCK-8和细胞迁移实验观察Fox M_1、miR-539和miR-485-5p对NSCLC细胞的增殖和侵袭功能的影响。应用荧光素酶报告基因实验检测miR-539和miR-485-5p与EMT调控蛋白ZEB_1和Snail_1的关系。结果:Fox M_1过表达下调NSCLC细胞中miR-539、miR-485-5p,转染Fox M_1-shRNA后NSCLC细胞中miR-539、miR-485-5p升高。MiR-539和miR-485-5p抑制Fox M_1对NSCLC细胞增殖和侵袭的促进作用。NSCLC细胞中miR-539对EMT调控蛋白ZEB_1,miR-485-5p对EMT调控蛋白Snail_1的表达有抑制作用。结论:miR-539和miR-485-5p能抑制NSCLC细胞中Fox M_1-EMT通路,从而影响NSCLC细胞的增殖和侵袭,抑制NSCLC的远处转移。

上调叉头框转录因子M1基因对人肿瘤细胞迁移侵袭及上皮．间充质转化的影响

目的探讨上调叉头框转录因子M1（FoxM1）基因对人卵巢癌细胞迁移侵袭的影响及其分子机制。方法构建FoxM1过表达慢病毒载体。HO-8910细胞分为3组，空白对照组、空载对照组和FoxM1慢病毒过表达组。转染HO-8910细胞后，采用Westernblot方法观察FoxM1蛋白表达，采用划痕修复试验检测癌细胞迁移能力，采用Transwell方法检测癌细胞侵袭能力，采用Westernblot法检测癌细胞E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白水平。结果与空白对照组和空载对照组比较，FoxM1过表达组FoxM1蛋白明显升高。划痕修复试验结果显示，空白对照组、空载对照组和FoxM1过表达迁移细胞迁移距离分别为（156．80±2．26）、（161，60±1.81）和（278．60±2．62）μm。统计学分析发现，与空白对照组比较，P〈0．01；Transwell侵袭试验显示，空白对照组、空载对照组和FoxM1过表达迁移细胞数分别为（68．56±1．69）、（67．27±1．36）和（126．38±1．56）个。统计学分析发现，与空白对照组比较，P〈0．01。Westernblot结果显示，与空白对照组比较，FoxM1过表达细胞组E-钙黏蛋白表达降低，而N-钙黏蛋白表达增高。结论FoxM1过表达可促进人卵巢癌细胞迁移和侵袭能力，其机制可能与促进上皮一间充质转化有关。