和厚朴酚调控FOXM1表达对口腔鳞状细胞癌顺铂耐药的影响

目的 研究和厚朴酚调控叉头盒蛋白M1(FOXM1)表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)顺铂耐药的影响。方法 用药物浓度递增法建立顺铂耐药细胞株CAL27/DDP。将CAL27/DDP细胞随机分为对照组(正常培养)、模型组(4μmol·L^(-1)顺铂)、和厚朴酚组(20μmol·L^(-1)和厚朴酚+4μmol·L^(-1)顺铂)、和厚朴酚+空载组(20μmol·L^(-1)和厚朴酚+4μmol·L^(-1)顺铂+转染空载质粒)、和厚朴酚+FOXM1过表达组(20μmol·L^(-1)和厚朴酚+4μmol·L^(-1)顺铂+转染FOXM1过表达质粒)。以CCK-8法检测细胞增殖情况,以流式细胞实验检测细胞凋亡情况,以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测细胞FOXM1、多药耐药(MDR1) mRNA表达水平,以蛋白质印迹法检测细胞FOXM1、P-糖蛋白(P-gp)表达水平。结果 对照组、模型组、和厚朴酚组、和厚朴酚+空载组、和厚朴酚+FOXM1过表达组的细胞增殖率分别为(100.00±0.00)%、(90.13±17.95)%、(43.69±6.11)%、(45.01±7.23)%和(83.94±15.72)%,细胞凋亡率分别为(3.71±0.85)%、(5.03±1.13)%、(60.12±8.64)%、(61.50±7.96)%和(6.62±0.87)%,FOXM1 mRNA相对表达水平分别为0.99±0.14、0.98±0.19、0.39±0.04、0.37±0.05和0.90±0.17,MDR1 mRNA相对表达水平分别为0.98±0.16、0.99±0.17、0.47±0.08、0.48±0.05和0.91±0.20,FOXM1蛋白相对表达水平分别为1.01±0.20、1.04±0.19、0.60±0.08、0.58±0.06和0.95±0.16,P-gp蛋白相对表达水平分别为0.90±0.21、0.93±0.15、0.49±0.06、0.47±0.09和0.85±0.17。和厚朴酚组的上述指标与对照组、模型组、和厚朴酚+FOXM1过表达组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 和厚朴酚可抑制FOXM1及耐药基因表达,增强人OSCC顺铂耐药细胞株的顺铂敏感性,减弱其耐药性。

白花丹素下调FoxM1对食管鳞癌细胞增殖、凋亡的影响

鉴于白花丹素(Plumbago zeylanica L.)抗癌谱广、毒性低的特点,分析白花丹素抑制食管鳞癌细胞系增殖及诱导凋亡的分子机制对其进一步的结构改造和临床应用具有重要的理论意义。本研究采用0~20μmol·L^(-1)浓度处理KYSE-30、KYSE-70和KYSE^(-1)40细胞24、48和72 h,分别用CCK-8检测细胞增殖、Annexin V和PI荧光染色检测凋亡、real-time PCR和Western blot检测FoxM1表达、双荧光素酶报告基因实验检测FoxM1启动子转录活性。并采用裸鼠体内治疗实验分析白花丹素抗肿瘤作用与FoxM1的关系。结果显示,白花丹素明显抑制食管鳞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制细胞在体内的增殖,其有效作用浓度为5~10μmol·L^(-1)。此外,研究发现白花丹素能够通过抑制FoxM1启动子转录活性而下调FoxM1的m RNA和蛋白表达。本研究表明,白花丹素能够通过下调FoxM1基因的表达抑制食管癌细胞的体内体外增殖。