基于DNA桥连氧化石墨烯的Fpg荧光检测

甲酰胺嘧啶DNA糖基化酶(Fpg)可特异性识别并切除由鸟嘌呤损伤产生的8-oxoG碱基以修复DNA序列,因此对Fpg进行定量检测可以反映鸟嘌呤受损程度,为污染物毒性效应评价提供技术手段.基于不同长度的DNA桥连氧化石墨烯(GO)强度不同的原理,以及GO优异的荧光淬灭能力,构建了DNA桥连GO基荧光传感器.该传感器在不同浓度Fpg下,特异性识别和切除8-oxoG碱基,产生短链DNA,其上修饰的荧光基团不能被GO有效淬灭,因而产生荧光信号.该荧光信号与Fpg浓度在一定范围内呈线性关系,可实现Fpg的定量检测,检测的线性范围为0~0.4 U/mL,检出限为0.014 U/mL,并表现出良好的特异性识别能力.采用加标回收法对稀释后胎牛血清中的Fpg进行了检测,回收率为93.5%~111%.其为Fpg快速检测提供了可行的方法,为DNA鸟嘌呤损伤评价提供了一种有效的技术手段.

碱基切除修复与分枝杆菌基因组稳定性

维持基因组稳定是生物生存的基础。碱基切除修复(base excision repair,BER)是修复损伤DNA、维持基因组稳定的主要方式之一。碱基切除修复对结核分枝杆菌等胞内致病菌尤其重要。fpg编码碱基切除修复的关键酶。本文通过比较分枝杆菌的基因组,发现结核菌较其他非致病分枝杆菌具有更多的碱基切除修复基因。这提示碱基切除修复可能对结核菌在宿主体内存活和致病至关重要。这条途径也许是新结核病药物研发的重要靶标。